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| 1 | 冬虫夏草的成熟伴随着冬虫夏草子座中多个基因突变型冬虫夏草菌表达的变化显示文摘目的:检测冬虫夏草成熟过程中冬虫夏草菌转换突变和颠换突变基因型在子座中表达的动态变化。方法:采用MassARRAY单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)质谱基因分型法,根据冬虫夏草菌基因内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列中大量散在的点突变,设计了8个SNP延伸引物,其中5个位于rDNA ITS1和ITS2段:067721-211,067721-240,067721-477,067721-531和067721-581,用于检验GC和AT偏倚基因型,但不区分两个AT偏倚基因型;另外3个延伸引物位于rDNA 5.8S段:067740-324,067740-328和067740-360,用于区分两个AT偏倚基因型。应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ioniza-tion-time of flight,MALDI-TOF)测定各个SNP位点的单核苷酸延伸反应,观察未成熟和成熟冬虫夏草子座中转换突变和颠换突变基因型表达的动态变化。结果:冬虫夏草子座rDNA的8个SNP位点的质谱图显示复杂的动态变化。067721-211位点的AT偏倚型等位基因的分子浓度明显高于GC偏倚型,但随着冬虫夏草的成熟,这个位点的AT型等位基因消失。多个SNP位点的质谱图中不仅显示转换突变的等位基因,颠换突变等位基因也有很高的检出率,有些甚至超过GC和AT偏倚基因型等位基因的峰高;而随着冬虫夏草的成熟,颠换突变等位基因的检出率和峰高趋于下降。在区分两个AT偏倚基因型的研究中,AB067744和AB067740两个基因型的等位基因同时存在于未成熟冬虫夏草子座中。随着冬虫夏草的成熟,AB067744基因型等位基因的峰高大幅度降低,而AB067740基因型等位基因的峰高大幅度升高。结论:在冬虫夏草子座中共存的至少5个冬虫夏草菌突变基因型的表达随着冬虫夏草的成熟呈现动态变化,这些突变基因型菌的存在和它们的动态变化对于冬虫夏草子座的萌发和成熟具有重要意义。 | 高凌 李晓红 赵建晴 陆继红 赵家刚 朱佳石 | 2012 | 北京大学学报(医学版)2012，44，3： | 10 |
| 2 | 冬虫夏草成熟过程中冬虫夏草菌及其突变基因型在子座和僵虫体中的差异表达显示文摘文献报道了从冬虫夏草(Cs)中同时检出蝙蝠蛾拟青霉(Ph)、中华被毛孢(Hs)和冬虫夏草菌(Os)的多个基因型;Cs的成熟伴有化学成分的改变和僵虫体中Hs竞争性菌落形成能力的下降。同时检验了Cs成熟过程中Os突变基因型生物量的变化。应用Southern杂交检验发现:Cs的成熟伴有Ph和2组Os基因型生物量的显著增加。Os突变基因型ITS片段的EcoRⅠ酶切位点缺失。Southern检验发现:在未成熟Cs中,AT偏倚型菌在子座中的rDNA生物量占绝对优势,在僵虫体中几乎没有;而GC偏倚型菌则相反。随着Cs的成熟,AT型菌在僵虫体中大量增加;GC型菌在子座中逐渐增加,但正向和逆向排列的GC型菌的总量远低于AT型。研究结果表明:Cs的成熟伴有Ph和Os菌的显著增加和几个Os突变基因型菌在Cs子座和僵虫体中差异表达的动态变化。这些变化可能对Cs子座的萌发和成熟至关重要,为Cs无性世代的研究提供了重要线索。 | 姚艺桑 周妍娇 高凌 陆继红 吴子 朱佳石 | 2011 | 菌物研究2011，9，1： | 9 |
| 3 | 天然冬虫夏草有性生殖过程中交配基因的差异表达和生殖模式的探讨显示文摘天然冬虫夏草为冬虫夏草菌侵染蝙蝠蛾幼虫后形成的虫菌复合体,从中检出17种基因型冬虫夏草菌和多种真菌。该文综述天然冬虫夏草、中国被毛孢(GC偏倚基因型#1冬虫夏草菌)的交配基因及其转录,探讨其交配模式。冬虫夏草宏基因组和宏转录组中含有特异交配型MAT1-1和MAT1-2的交配基因和转录子,因其菌物来源不详,无法准确推测其交配模式。该文揭示237株中国被毛孢菌株的交配基因差异性存在,构成基因水平的有性生殖调控。中国被毛孢转录水平的有性生殖调控包括:交配基因差异性转录沉寂;交配基因MAT1-2-1转录子含未剪切的内含子Ⅰ,内含终止密码。中国被毛孢L0106和1229号菌株交配基因互补性差异转录,不支持(假)同宗配合的自交;但可产生互补的交配蛋白,完成异宗配合。冬虫夏草子座、子囊果和子囊孢子中检出多种AT偏倚基因型菌,具有基因组独立性,能否成为中国被毛孢的交配伴侣、完成有性生殖有待证实。蝙蝠蛾拟青霉FENG号菌株的交配基因差异性转录,与中国被毛孢L0106号菌株形成互补,能否突破生殖隔离完成杂交有待证实。基因型#13~14冬虫夏草菌呈现2种亲代真菌的大片段DNA交叉互换和遗传物质重组,可能代表杂交或准性生殖的子代变异菌。冬虫夏草菌交配基因的差异性存在和表达,为人工培殖冬虫夏草、解决日益匮乏的天然资源提供了生殖生理学的关键科学信息。 | 李秀璋 李玉玲 朱佳石 | 2023 | 中国中药杂志2023，48，10： | 0 |
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