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| 1 | 组织蛋白酶L基因的RNA干扰真核表达载体的构建显示文摘目的:构建组织蛋白酶L(CTSL)基因的RNA干扰真核表达载体。方法:根据GenBank数据库提供的CTSL基因核苷酸序列,设计并化学合成4对双链小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA),瞬时转染卵巢癌细胞系A2780细胞,通过半定量RT-PCR检测各转染细胞CTSL表达筛选一个有效的si RNA序列。设计并合成能表达其小发卡结构RNA(Small hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与psilence4.1-CMV-neo质粒定向连接,构建真核表达载体,DNA测序进行鉴定,并通过半定量RT-PCR验证其干扰效果。结果:构建CTSL的RNA干扰真核表达载体psilence4.1-CMV-neo-CTSL,经DNA测序证实与设计完全一致,通过半定量RT-PCR证实其能够沉默A2780细胞的CTSL基因表达。结论:CTSL基因RNA干扰真核细胞表达载体构建成功。 | 王素梅 李力 张玮 黎丹戎 唐步坚 | 2008 | 广西医科大学学报2008，25，1： | 0 |
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