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| 1 | 蛋白激酶C调节血管内皮细胞CD44分子表达的机制显示文摘目的:研究血管内皮细胞蛋白激酶C对CD44分子表达的调控机制。方法:以人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilical vein endothelial cells,HUVECs)为研究模型。利用免疫沉淀法制备Raf-1激酶的提取物,以Western blot及增强化学发光法检测Raf-1激酶活性;放射自显影检测CD44的磷酸化情况;RT-PCR方法检测CD44基因表达。结果:与未处理的细胞相比较,加入10ng/ml的Phorbol-myristate-acetate(PMA)后,CD44磷酸化随时间延长而明显增强,尤以30分钟时最显著。HUVECs的PKC活化后,Raf-1Kinase活性明显增强,加入Calphostin C后其活性则被抑制;10ng/ml PMA处理1分钟,即能看到CD44基因表达明显升高(P<0.05),而先加入0.05μmol/L Calphostin C、30μmol/L RKIP,5μmol/L PD98059、10μmol/LGenistein预处理HUVECs,则能抑制PMA对CD44基因表达的上调作用。结论:PKC活化通过对CD44的磷酸化作用而影响CD44基因表达,其信号传导途径为PKC→Raf-1Kinase→MEK→ERK。此路径相关酶的抑制剂能抑制CD44基因的表达。 | 郝一文 周文玲 刘显智 | 2007 | 中国免疫学杂志2007，23，11： | 0 |
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