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1肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B的构建及表达显示文摘目的:构建小鼠白蛋白启动子引导下携带野生及常见突变型Arg778Leu、His1069Gln的人ATP7BcD-NA的肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B,并检测其表达情况。方法:定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及His1069Gln两种ATP7B突变体,定向克隆将小鼠白蛋白启动子Alb序列及野生和突变的ATP7BcDNA依次亚克隆至转基因载体Kbpala上,得到可在肝脏特异性表达的正常及突变型人ATP7B的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B。将其短暂转染BRL细胞及BHK细胞,通过Western blotting检测其蛋白表达情况。结果:经酶切鉴定及定点测序证实,转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B构建成功;Western blotting显示仅在肝脏细胞实现表达。结论:带有人类ATP7BcDNA的野生及常见致病突变型的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B构建成功并在肝脏细胞特异性表达。徐琳 梁秀龄 徐评议 2006中国病理生理杂志2006,22,6:3
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