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| 1 | 检测粪便c-ki-ras2基因点突变筛查大肠癌显示文摘目的:研究大肠癌患者粪便c-ki-ras2基因外显子1第12位密码子点突变情况,探讨检测粪便c-ki- ras2基因点突变对筛查大肠癌的价值。方法:提取2005年于广州市第一人民医院就诊的25例大肠癌患者粪便、肿瘤组织和癌旁组织黏膜的DNA,结合限制性内切酶Mva I,用普通聚合酶链反应-限制性片段长度多态性 (PCR-RFLP)及突变富集型聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(mutant-enriched PCR-RFLP),分析c-ki-ras2 基因外显子1的12位密码子第一、二位碱基是否存在点突变;用同样方法分析正常对照组17例。特异性分析采用经克隆测序已知突变型(12GGT→AGT)及野生型(12GGT)的c-ki-ras2外显子1片段。取同期住院的166 例胃肠道疾病患者大便潜血试验(FOBT)检查结果作对照。结果:25例大肠癌患者粪便中,突变富集型PCR- RFLP检出7例k-ras基因点突变(28%),其中6例在相应组织中也检出突变,粪便与组织DNA检测结果高度一致(Kappa=0.896,P<0.01)。正常人粪便未检出突变,两组相比差异有显著性(P<0.05)。癌旁黏膜均未发现突变。普通PCR-RFLP只检出其中3例(12%)。c-ki-ras2点突变更多见于左半结肠癌,与结肠其他部位相比差异有显著性(P<0.05)。肠癌患者与其它胃肠道疾病者FOBT阳性率无差异,分别为58%、46%(P> 0.05)。结论:粪便c-ki-ras2基因点突变检测特异性达100%,比FOBT(50.6%)高,但单个基因的检测敏感性较FOBT低(28% vs 51.2%,P<0.05),粪检基因诊断大肠癌有一定应用前景;突变富集型PCR-RFLP较普通 PCR-RFLP有更高的检出率。 | 钱林 李瑜元 聂玉强 魏亚明 杜艳蕾 江庆澜 | 2005 | 广州医学院学报2005，33，6： | 3 |
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