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| 1 | 长链人胰岛素样生长因子-1的分离纯化显示文摘目的建立长链人胰岛素样生长因子-1(Long chain Arg3 human insulin-like growth factor-1,LR3IGF-1)的分离纯化方法。方法将LR3IGF-1毕赤酵母工程菌接种至30 L发酵罐进行高密度发酵,发酵液经离心、超滤浓缩后,采用SP Sepharose FF阳离子交换层析、Phenyl Sepharose FF疏水层析、S-100凝胶过滤层析和DEAE Sepharose FF层析对发酵上清液中的表达产物进行分离纯化,测定蛋白浓度,计算蛋白收率,并分析纯化样品的浓度。采用MTT法检测各步纯化样品促NIH-3T3细胞增殖的活性。结果纯化LR3IGF-1的蛋白总收率为28%,RP-HPLC纯度可达95%以上。随着纯化过程中样品纯度的增加,LR3IGF-1的活性也相应增强,各纯化步骤基本不影响LR3IGF-1的生物活性。结论初步建立了LR3IGF-1的分离纯化工艺,其简便有效,为LR3IGF-1的规模化生产奠定了基础。 | 张文明 洪静 林殿海 孙天玮 梁军 黄国团 | 2012 | 中国生物制品学杂志2012，25，6： | 0 |
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