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| 1 | 培美曲塞对不同miR-21表达水平人肺癌细胞凋亡影响的实验研究显示文摘目的检测不同miR-21表达水平的人肺癌细胞对培美曲塞的药物敏感性,并探讨可能作用机制。方法采用Annexin V-EGFP荧光染色法定性检测及流式细胞术定量检测培美曲塞对不同miR-21表达水平的A549人肺癌细胞凋亡诱导作用,级联酶底物显色法检测caspase-3的活化状态,蛋白免疫杂交法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平变化。结果20μmol/L培美曲塞作用24h可以诱导高表达miR-21的A549人肺癌细胞(A549-21H0)和低表达miR-21的A549细胞(A549-21L0)的凋亡,且A549-21L0处于细胞凋亡晚期,而A549-21H0处于细胞凋亡早期。5μmol/L培美曲塞作用24h可以诱导65.3%的A549-21L0细胞早期凋亡,仅诱导2.8%的A549-21H0细胞早期凋亡。5μmol/L培美曲塞作用6h即可引起A549-21L0细胞中caspase-3活化,与作用前相比活化效应超过2倍(P<0.01);在9h时活化效应最强,活化效应超过7倍(P<0.01);18h后活化效应超过6倍(P<0.01);至24h时活化效应仍在5倍以上(P<0.01)。同样条件下,5μmol/L培美曲塞作用18h才引起A549-21H0细胞中caspase-3活化,与作用前相比活化效应接近3倍(P<0.01),至24h活化效应在4倍以上(P<0.01)。5μmol/L培美曲塞作用于A549-21L0细胞9h即可引起Bax表达水平显著性升高和Bcl-2表达水平明显下降。结论A549-21L0人肺癌细胞对培美曲塞诱导的细胞凋亡具有更高的敏感性。培美曲塞可引起A549-21L0细胞中caspase-3活化,并可通过调控Bax和Bcl-2表达水平诱导凋亡,这种效应具有一定的时间-效应关系。 | 印洁 李玉枫 宋勇 姚鸣 高云 孙倍成 施毅 | 2012 | 临床肿瘤学杂志2012，17，5： | 0 |
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