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| 1 | 大鼠肺成纤维细胞的体外培养及急性炎症模型的建立显示文摘目的:探讨大鼠肺成纤维细胞体外培养及急性炎症模型建立的方法。方法:采用胰酶消化法、差速贴壁法,分离、纯化肺成纤维细胞,然后采用H-DMEM培养液进行细胞培养。采用免疫荧光法对所分离的细胞进行鉴定。采用脂多糖(LPS)干预建立成纤维细胞体外急性炎症模型,实验分组:空白组、0.1μg/mL LPS组、1μg/mL LPS组、10μg/mL LPS组,并利用细胞增殖/毒性检测试剂(MTT)在干预后3、6、9 h分别测定吸光度(OD)值。结果:成纤维细胞体外培养24 h后,镜下可见组织块周边有长梭型细胞爬出,72 h后生长迅速,4 d接近融合。经免疫荧光测定,肺成纤维细胞波形蛋白(vimentin)阳性,CD31阴性。在干预后各时间段中,1μg/mL LPS组测得的OD值高于其他各组,在1μg/mL LPS组中,干预后6 h测得的OD值高于其他各时间段,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:该法可以体外培养出大鼠肺成纤维细胞,用浓度为1μg/mL的LPS干预体外培养的成纤维细胞6 h能建立较为合理的急性炎症模型。 | 朱天琦 郑声星 | 2012 | 温州医学院学报2012,42,2: | 5 |
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