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| 1 | 高糖刺激对人晶状体上皮细胞中KLF6基因表达的影响显示文摘背景上皮一间充质转化(EMT)是后发性白内障的主要病理机制。锌指蛋白Kruppel样因子6(KLF6)在糖尿病肾病近曲小管中的表达增加,参与并促进转化生长因子-p(TGF-p)诱导的EMT。目的观察高浓度葡萄糖刺激对人品状体上皮细胞(LECs)中KLF6及其调控的靶基因转化生长因子p1(TGFBI)、转化生长因子BI型受体(TGFBRl)、I型胶原d1链(COLlAl)、热休克蛋白47(HSP47)等表达的影响。方法用高浓度D-葡萄糖刺激人LECs系SRAOI/04,运用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Westernblot法检测KLF6mRNA及蛋白水平,同时运用荧光定量PCR检测KLF6下游靶基因TGFBl、TGFBRl、COLlAl、HSP47的mRNA表达水平。结果与对照组(5.5mmol/L)比较,高浓度葡萄糖(22.2、44.4、66.6mmol/L)刺激后的[_KLF6和wt.KLF6mRNA水平明显上升,差异均有统计学意义(F=72.53、42.02,P〈0.01);结合人体血糖范围,在进一步实验中选择22.2mmol/L作为葡萄糖刺激浓度。各时间点t-KLF6和wt—KLF6mRNA水平之间的差异有统计学意义(F=100.12、125.52,P〈0.01),两者mRNA水平均于处理后12h达到高峰,24h则开始出现下降,48h下降更为明显。Westernblot结果显示,对照组(0h)KLF6蛋白表达很弱,高糖处理24h后的细胞表达KLF6蛋白增加,而处理48h后的表达量进一步增加。随着KLF6表达的增加,TGFBl、TGFBRl、COLlAI、HSP47的mRNA水平在高糖刺激12h时明显上升,但24h后开始下降,48h时进一步下降至接近对照组水平(F=6.73、162.35、64.39、12.05,P〈0.05)。结论高浓度葡萄糖可诱导人LECs上调KLF6基因的表达,并短暂促进了其下游与EMT密切相关的靶基因TGFBl、TGFBRl、COLlAl、HSP47等的转录表达。 | 王洪涛 鲍永珍 | 2012 | 中华实验眼科杂志2012，30，2： | 3 |
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