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| 1 | 小鼠Tim-3真核表达载体pTARGET-Tim-3的构建显示文摘目的构建小鼠Tim-3真核表达载体,并在黑色素瘤细胞系B16中表达小鼠TIM-3。方法以脾细胞RNA为模板,逆转录PCR扩增鼠Tim-3编码区基因,T-A克隆至真核表达载体pTARGET,构建重组质粒pTARGET-Tim-3,采用脂质体转染法转染黑色素瘤细胞系B16细胞,以逆转录PCR和Westernblot验证Tim-3在B16细胞中的表达。结果利用酶切和测序的方法,筛选、鉴定pTARGET-Tim-3真核表达载体,转染黑色素瘤细胞系B16细胞,经逆转录PCR和Westernblot证实TIM-3高效表达。结论成功构建小鼠Tim-3真核表达载体,Tim-3在转染的小鼠B16细胞系中高表达。 | 孟静 刘晓立 郭春 马春红 | 2010 | 山东大学学报(医学版)2010，48，11： | 0 |
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