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| 1 | 人胚胎视网膜色素上皮细胞在微孔聚酰胺纳米纤维膜上的培养显示文摘目的研究人胚胎视网膜色素上皮(RPE)细胞在微孔聚酰胺纳米纤维膜(EPN)上的生长和分化情况,观察EPN能否作为一种理想的膜性支架而支持RPE细胞的生长和分化,为后续Bruch膜替代物的研究奠定基础。方法将培养的人胚胎RPE细胞分别以5×105/cm2的密度种植在EPN和常规塑料(对照组)的Transwell植入物的24孔培养板中,低钙培养基(Ca2+浓度0.1mmol/L)中培养,待细胞贴壁生长后,改用正常钙培养基(Ca2+浓度1.8mmol/L)培养4周。用相差显微镜每天观察2组细胞的形态及生长情况;分别以免疫荧光染色及Westernblot法鉴定RPE细胞中CK-18、细胞连接蛋白ZO-1及RPE65的表达,观察培养的RPE细胞遗传表型的维持情况。结果培养在EPN上的RPE细胞与对照组一样,能够较好地贴壁生长,形成单细胞层。EPN较常规塑料更适于RPE细胞贴附生长。EPN的纤维排列类似Bruch膜内胶原层纤维排列。EPN上培养的人胚胎RPE细胞CK-18表达阳性,与对照组相比,ZO-1和RPE65均呈较强表达,较好地保持了原代RPE细胞的表型。结论生长在EPN上的人胚胎RPE细胞能够较好地生长、分化并形成单细胞层,有效地维持了原代RPE细胞的表型。为后续Bruch膜替代物组织工程学研究提供了新的思路。 | 李筠萍 唐罗生 | 2010 | 眼科研究2010，28，11： | 0 |
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