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| 1 | Sanger测序法确证硫代修饰反义脱氧寡核苷酸的序列显示文摘目的 :建立一种简便、可靠的硫代修饰反义脱氧寡核苷酸序列确证方法 ,为反义药物的质量控制及新药研究与开发奠定基础。方法 :选择含有待测反义脱氧寡核苷酸序列在内的一段靶基因为模板 ,以待测序的硫代修饰反义脱氧寡核苷酸作为下游引物 ,同时在其上游设计一条引物 ,进行PCR扩增 ,使待测序的反义序列以修饰形式掺入到PCR扩增产物中 ;以上述掺入反义序列的PCR扩增产物为模板 ,利用Sanger双脱氧链终止测序法对其进行自动序列分析。结果 :该方法可对不同长度硫代修饰的反义序列进行测定 ,并且可有效地检测出合成过程中产生的突变和缺失序列 ,与质谱法相比 ,仪器和试剂更普及 ,方法易于掌握且测序成本低 ,用样量少。结论 :该方法可用于硫代修饰反义脱氧寡核苷酸药物的序列确证。 | 陈苏红 鲁丹丹 张嵬 王升启 | 2004 | 军事医学科学院院刊2004，28，5： | 1 |
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