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| 1 | 人J链基因的克隆及原核表达研究显示文摘目的用基因工程技术在大肠埃希菌中表达人J链基因重组蛋白,为研究其功能及开发检测J链抗原的试剂盒奠定基础。方法提取人脾细胞总RNA,以此为模板,通过RT-PCR的方法获得J链基因。将该基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,构建J链表达载体,测序证实正确后转化至EcoliBL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE,表达产物经免疫印迹法(western blot,WB)鉴定其免疫反应性。结果测序结果证实笔者成功地获得了J链基因,其序列与GenBank中报道完全一致。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白在EcoliBL21中获得表达,其相对分子量约为15KD左右,表达的蛋白量约占菌体蛋白的15%。结论成功克隆了人免疫球蛋白J链基因,并在大肠杆菌中获得表达。 | 王宪灵 安黎云 王缚鲲 李玮 贾克然 时兰春 | 2009 | 中国现代医学杂志2009，19，18： | 2 |
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