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| 1 | 超低温冰箱转液氮阶梯降温法与传统程序降温法保存造血干细胞的比较显示文摘背景:在造血干细胞整个冷冻保存过程中,受到降温速率、储存温度深浅、冷冻保护剂组合等因素影响,各国学者在提倡选择何种保存方法上面存在不同的主张。目的:比较-80℃低温冰箱转液氮阶梯降温法与传统程序降温法保存外周造血干细胞的效果。方法:将采集的造血干细胞分两组,第一组细胞浓度为1×1011L-1,加入10%二甲基亚砜,放入程序冷冻仪内程序设置为室温至-4℃按1℃/min的速率降温,按35℃/min快速降至-45℃,再以15℃/min升至-21℃,然后以5℃/min降至-90℃,取出冷冻管置-196℃液氮罐内。第二组细胞浓度为1×1011L-1,加入5%二甲基亚砜、3%羟乙基淀粉、4%人血白蛋白,将冷冻管置-80℃冰箱过夜后取出,置-196℃液氮罐内的气相,再过夜后置液氮罐液相内。结果与结论:两组冷冻方法保存细胞的锥虫蓝拒染率、回收率、凋亡率和死亡率差异无显著性意义(P>0.05)。结果显示用5%二甲基亚砜、4%白蛋白、3%羟乙基淀粉组成的冷冻保护剂,通过-80℃低温冰箱转液氮阶梯降温法冷冻保存造血干细胞与传统10%二甲基亚砜作为冷冻保护剂用程序降温的方法取得一样效果,操作简便易于临床应用。 | 赵仁彬 张爱玲 陆洁 杨泽凤 杨同华 | 2011 | 中国组织工程研究与临床康复2011，15，19： | 6 |
| 2 | 阶梯降温冷冻保存的自体外周血造血干细胞移植的临床研究显示文摘目的:观察低温冰箱转液氮阶梯降温冷冻保存的自体外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病的效果,并分析造血干细胞移植后患者生存情况。方法:使用3%羟乙基淀粉、4%白蛋白和5%二甲亚砜(DMSO)组成的冷冻保护剂保护自体造血干细胞,后置于-80℃低温冰箱,再置-196℃液氮罐长期储存,然后用于自体移植。2002年1月至2016年12月98例恶性血液病患者,其中包括急性淋巴细胞白血病10例,非急性髓系白血病24例,多发性骨髓瘤11例,恶性淋巴瘤53例的自体移植。对患者造血恢复时间、总生存率(overall survival,OS)、无进展生存率(progression-free survival,PFS)进行了统计分析。结果:除1例因颅内出血死亡未成功植入外,余97例患者均获得造血重建。中性粒细胞计数≥0.5×10~9/L所需时间平均为9.24±1.89 d,连续3 d不输血小板且血小板≥20×10~9/L所需时间平均为11.04±1.84 d。中位生存时间为47.6 (1-80)个月。1、3和5年总生存率分别为(97.2±1.9)%、(84.2±4.6)%和(77.8±5.6)%。3和5年PFS分别为(74.4±5.1)%和(61.2±6.2)%。结论:通过低温冰箱转液氮阶梯降温法冷冻保存造血干细胞自体移植,可以达到和传统的程序降温冷冻保存法一样的临床移植效果,且移植后并发症发生率无增多。 | 胡芃 杨同华 赵仁彬 史克倩 杨艳梅 赖洵 | 2018 | 中国实验血液学杂志2018，26，5： | 1 |
| 3 | 不同冷冻保护剂对低温冰箱转液氮阶梯降温冷冻保存造血干细胞效果的影响(英文)显示文摘背景:非程序降温-80℃低温冰箱保存方便快捷,程序降温-196℃液氮保存可靠长久,将两者合二为一简化流程已成功用于临床。目的:观察不同冷冻保护剂对-80℃低温冰箱转液氮阶梯降温冷冻保存造血干细胞效果的影响。方法:分设10%二甲亚砜组、5%二甲亚砜联合3%羟乙基淀粉组、5%二甲亚砜联合0.25mol/L海藻糖组、5%二甲亚砜联合3%羟乙基淀粉及0.25mol/L海藻糖组。采用-80℃低温冰箱转液氮阶梯降温法对单采外周造血干细胞进行冷冻保存,通过透射电镜观察细胞超微结构变化,流式细胞仪观察Annexin-V、PI、Caspase-3水平。结果与结论:4组冷冻保存细胞的存活率、凋亡率和死亡率差异均无显著性意义(P>0.05)。透射电镜下各组细胞超微结构变化差异不明显。单个核细胞群落冷冻保存后存活率在90%以上,含成熟细胞较多的CD45+细胞群落凋亡发生率可达50%左右。造血干祖细胞群落中,早期细胞较晚期细胞更能耐受冷冻损伤。提示在基础冷冻保护剂二甲亚砜的基础上,加入羟乙基淀粉和海藻糖并未显示出对冷冻保存效果的增强作用。 | 杨同华 赵仁彬 蒋雅先 欧阳红梅 张爱玲 胡芃 刘建琼 闻艳 | 2011 | 中国组织工程研究与临床康复2011，15，19： | 1 |
| 4 | 不同种冷冻保护剂嗜酸乳杆菌保存效果的比较研究显示文摘在相同的时间内,比较不同的冷冻保护剂配制和不同冷冻条件对嗜酸乳杆菌的保存效果。应用冷冻和低温冷冻2种冻存方法,于预定时间,分别对预设的7个不同冷冻保护剂进行复苏以及相关检测。冷冻保护剂分组为:DMSO-脱脂乳(1:9)、DMSO-液体MRS(1:9)、甘油-脱脂乳(1:1)、甘油-脱脂乳(8:2)、甘油-生理盐水(1:1)、甘油-液体MRS(1:1)、甘油-液体MRS(8:2)。试验结果显示:-80℃的试验组的嗜酸乳杆菌存活量大于除温度外同等条件下-20℃组的存活量。采用DMSO为冷冻保护剂、脱脂乳或液体MRS为冷冻介质的试验组的菌存活量明显大于其他试验组。本试验分组内,-80℃条件下,DMSO作为冷冻保护剂,冷冻介质为脱脂乳或液体MRS时,试验组的菌存活量明显大于其他试验组。 | 朱志宁 赵燕 黄惠 任晓明 | 2011 | 中国农学通报2011，27，5： | 0 |
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