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| 1 | 转基因玉米LY038转化事件的特异性检测显示文摘转基因高赖氨酸玉米LY038在畜禽饲料中已得到广泛应用,但目前还没有关于其侧翼序列扩增及转化事件特异性定性PCR检测方法方面的报道。本研究采用修饰接头连接PCR(modified adapter-linked PCR,M-AL-PCR)技术获得了转基因玉米LY038的外源基因与玉米基因组之间的5'端侧翼序列。据此侧翼序列设计其转化事件特异性引物,建立了转基因玉米LY038转化事件特异性定性检测方法,扩增片段175bp。以转基因玉米(ZeamaysL.)LY038、MIR604、Bt176、Bt11、MON810、MON863、GA21、NK603、非转基因玉米、转基因水稻(Oryzasativa L.)Cry1C*、Cry2A*、转基因大豆(Glycine max)Roundup Ready和转基因油菜(Brassica campestrisL.)GT73为材料,验证该方法具有高特异性及灵敏度,最低检测限约为0.1%。研究结果提示,该定性检测体系可准确、快速、高效的检测转基因玉米LY038及其产品。 | 翟志芳 许文涛 张南 闫兴华 王一南 罗云波 黄昆仑 | 2011 | 农业生物技术学报2011，19，3： | 5 |
| 2 | 烟草T-DNA插入位点侧翼序列扩增方法的筛选与优化显示文摘烟草T-DNA激活标签插入突变体库的创制过程中,需要进行大量的T-DNA插入位点的侧翼序列扩增,因此选择一种适用于烟草T-DNA侧翼序列扩增的高效方法尤为必要。本研究比较了TAIL-PCR、PCR-walking、FPNI-PCR三种方法对T-DNA插入位点侧翼序列的扩增效率、插入位点确定的比例和同源蛋白比对结果,并对3种方法的PCR程序、体系和引物设计等方面进行了优化,确定TAIL-PCR更适合烟草的侧翼序列扩增,通过产率、条带长度、插入位点和同源蛋白比对结果的比较,得出TAIL-PCR更适合烟草的侧翼序列扩增。这一结果为应用烟草突变体开展烟草基因功能的研究奠定了基础。 | 刘慧 刘贯山 刘峰 龚达平 张雪峰 崔萌萌 路铁刚 王元英 | 2014 | 中国烟草科学2014，35，1： | 2 |
| 3 | 转抗草甘膦基因烟草T-DNA侧翼序列的扩增与分析显示文摘[目的]研究抗草甘膦基因在烟草中的插入位点、T-DNA结构等整合情况。[方法]利用现有的3个转抗草甘膦基因的烟草材料,通过PCR Walking的方法扩增出携带抗草甘膦基因的T-DNA侧翼序列,并用DNAMAN、BLAST等生物信息学方法进行分析。[结果]对获得的PCR条带进行分析,结果表明这些侧翼序列均含载体骨架序列且结构各不相同,T-DNA和载体骨架序列都存在重组现象。[结论]研究在转基因植株中检测到了载体的骨架结构,说明转基因的同时有可能会造成非目的基因的转移,即转基因植物存在一定的风险,应对转基因植物转化载体和基因工程技术路线进一步改良。 | 李同亮 王坤波 宋国立 刘方 黎绍惠 王春英 张香娣 王玉红 | 2009 | 安徽农业科学2009，37，21： | 1 |
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