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| 1 | 不同分化状态的供体细胞对小鼠克隆胚胎发育的影响显示文摘目的:探讨不同分化程度的供体细胞对克隆胚胎发育潜能的影响。方法:采用'一步法'核移植技术将供体细胞核直接注入小鼠卵母细胞,成功构建克隆胚胎。颗粒细胞克隆胚胎经含有10mmol/L的SrCl2和5ug/mLCB的培养液中激活处理5~6h,R1胚胎干细胞克隆胚胎经含有10mmol/L的SrCl2的培养液中激活处理3h,然后移入CZB培养液中继续培养。结果:颗粒细胞克隆胚胎体外的激活率、卵裂率和囊胚率与胚胎干细胞克隆胚相比具有显著差异,克隆胚胎体内移植后胚胎干细胞克隆胎儿出生率稍高(2.3%vs.1.2%),但没有显著差异。结论:供体细胞分化程度越低,克隆胚胎体内外发育潜能越高。 | 范勇 陈欣洁 孙筱放 | 2010 | 实用医学杂志2010，26，8： | 2 |
| 2 | 绵羊体细胞核移植去核前程序的优化显示文摘目前绵羊体细胞克隆效率仍然很低,本研究拟对去核前的操作环节进行优化。主要为卵巢保存时间(3 h和3–5 h)、卵母细胞体外成熟时间(18 h和24 h)、供核细胞贴壁率(10%和30%)和盲吸法去核时间(16 hpm和18 hpm)等4个方面优化。以成熟率、融合率和重构胚胎发育能力作为评价参数。结果表明:在卵巢保存方面,卵巢保存3 h组卵母细胞成熟率显著高于3–5 h组卵母细胞成熟率(60.18%vs 52.50%)(P<0.05),重构胚胎发育力差异不显著(P>0.05);在体外成熟时间方面,体外成熟18 h组和24 h组卵母细胞成熟率差异极显著(53.81%vs 89.06%)(P<0.01),胚胎发育力差异不显著(P>0.05);在融合率方面,贴壁率30%组极显著高于贴壁率10%组(80.85%vs 57.69%)(P<0.01),在克隆胚胎发育率方面没有显著差异(P>0.05),具有贴比率差异性的细胞在细胞生长平台期表现出差异性;在去核时间方面,16 hpm组和18 hpm组胚胎卵裂率差异显著,囊胚发育力差异不显著(P>0.05),16 hpm组获得一只克隆羊,重复16 hpm获得4只妊娠克隆羊。组织微卫星序列经SDS-PAGE分析,DNA指纹与供体细胞相同。结论:去核前程序的优化保证了材料的质量,为提高克隆胚胎数量和质量奠定基础,可以获得体细胞克隆羊。 | 郭延华 张译元 王立民 唐红 李迎利 周平 | 2017 | 生物工程学报2017，33，5： | 2 |
| 3 | 水牛体细胞核移植方法比较及激活前的时间间隔对全细胞胞质内注射法核移植效果的影响显示文摘本研究旨在比较水牛2种体细胞核移植(Somatic Cell Nuclear Transfer,SCNT)方法的效果以及激活前的时间间隔对全细胞胞质内注射法(Whole-Cell Intracytoplasmic Microinjection,WCICSI)核移植效果的影响。采用水牛胎儿成纤维细胞作为供核,比较了透明带下注核法(Perivitelline Microinjection,PM)和WCICSI核移植效果。另外,试验了不同类型的供体细胞进行全细胞胞质内注射后与激活前的受体胞质的最适宜作用时间。结果,WCICSI构建核移植重构胚的成功率显著高于PM(87.1%vs 81.1%,P〈0.05),虽然其重构胚的分裂率极显著低于PM(49.5%vs 71.8%,P〈0.01),但囊胚率、核移植的效率无显著差异(P〉0.05)。卵丘细胞和胎儿成纤维细胞在注射后3 h激活,重构胚的囊胚发育率最高;颗粒细胞注射后与激活前的最佳时间间隔可在1.5~3 h,但3 h是最佳的作用时间。结果表明,(1)WCICSI可用于水牛体细胞核移植的研究;(2)水牛胞质内注射供体细胞后3 h进行激活,核移植重构胚的发育效果最好。 | 杨素芳 陈自洪 韦精卫 陆凤花 石德顺 | 2009 | 畜牧兽医学报2009，40，12： | 1 |
| 4 | 电脉冲对不同卵龄的MⅡ期卵母细胞激活影响显示文摘目的研究电脉冲对不同卵龄小鼠MⅡ期卵母细胞电激活影响,寻找小鼠体细胞克隆避免电激活的适宜卵龄的卵母细胞。方法在180V/mm,9s,1个电脉冲(1p)下,比较了注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后13,16h卵母细胞经体外培养(IVC)4h的激活率、碎裂+死亡率。结果hCG后13h和16h的MⅡ期卵母细胞相比,激活率分别是6.2%和29.5%,两者间差异有极显著性意义(P<0.01)。碎裂+死亡率两组间没有显著性差异。结论注射hCG后13h的卵母细胞为适宜的小鼠核移植的受体细胞,在一定程度上可以有效的避免电激活重构胚。 | 白莉 刘海燕 | 2009 | 齐齐哈尔医学院学报2009，30，18： | 0 |
| 5 | 电脉冲对不同卵龄的MⅡ期卵母细胞激活影响显示文摘目的研究电脉冲对不同卵龄小鼠MⅡ期卵母细胞电激活影响,寻找小鼠体细胞克隆避免电激活的适宜卵龄的卵母细胞。方法在180V/mm,9s,1个电脉冲(1p)下,比较了注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后13,16h卵母细胞经体外培养(IVC)4h的激活率、碎裂+死亡率。结果hCG后13h和16h的MⅡ期卵母细胞相比,激活率分别是6.2%和29.5%,两者间差异有极显著性意义(P<0.01)。碎裂+死亡率两组间没有显著性差异。结论注射hCG后13h的卵母细胞为适宜的小鼠核移植的受体细胞,在一定程度上可以有效的避免电激活重构胚。 | 纪红 秦逸人 刘慧雯 | 2009 | 齐齐哈尔医学院学报2009，30，10： | 0 |
| 6 | 不同融合方式对核移植后胚胎融合的影响显示文摘目的本文是通过对核移植后胚胎融合时不同排队方式的影响进行研究,试图提高重构胚胎的融合率,以提高核移植的效率。方法采用手动排队和交流电+手动方法两种不同的排队方式,将体细胞核移植后胞质体-核质体复合体融合。结果体细胞核移植后得到的胞质体-核质体复合体融合时,采用手动和手动+交流电两种方法调正胞质体-核质体复合体,其融合率分别为38.5%和75.7%。结论在核移植后胞质体-核质体复合体融合时,采用交流电+手动排队融合率明显高于手动排队。 | 纪红 刘慧雯 秦逸人 | 2010 | 齐齐哈尔医学院学报2010，31，8： | 0 |
| 7 | 批量细胞吸附固定装置的研制显示文摘针对目前胞浆内单精子注射(ICSI)效率低、对操作人员技术要求较高的问题,研制了一种批量细胞吸附固定装置。首先,基于微流道低雷诺数的特点,通过COMSOL软件进行流体仿真,分析了细胞吸附固定的机理;然后,搭建了压力控制系统,以实时检测并调节微管道内的压力,利用所设计制作的细胞吸附固定装置,结合显微操作系统对小鼠卵细胞进行大量实验并分析影响吸附固定效果的因素;最后,进行单细胞受力分析,推导得出压力泵流量与管道内压力之间、压力与细胞变形量之间的关系。得到的实验数据证明了利用细胞吸附固定装置可以实现批量细胞的自动固定,提高了注射效率。 | 皋龙成 朱军辉 汝长海 | 2015 | 现代制造工程2015，，8： | 0 |
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