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| 1 | 流行病学研究设计进展显示文摘 | 胡浩 姜宝法 高琦 孙修福 | 2008 | 中国公共卫生2008，24，7： | 4 |
| 2 | 人ANKRD49基因真核表达载体的构建及其功能的初步研究和RNA干扰靶点的鉴定显示文摘目的:克隆人ANKRD49基因并构建其真核表达重组体,利用构建成功的ANKRD49真核表达重组体对其进行功能的初步研究,并筛选和鉴定其RNA干扰靶点。方法:提取人肺腺癌细胞株A549总RNA,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对ANKRD49进行扩增,扩增产物与真核表达载体p3×Flag-CMV-14同时进行双酶切,酶切产物连接后转化入感受态细胞Top10,阳性重组质粒p3×Flag-CMV-14/ANKRD49经菌液PCR、双酶切和测序鉴定正确后,用脂质体法(LipofectamineTM2000)转染人胚肾细胞(HEK 293T),免疫印迹(Immunoblotting)和免疫荧光技术检测表达产物。免疫荧光法检测ANKRD49在宿主细胞内的定位。MTT法检测ANKRD49对宿主细胞的增殖作用。设计并合成针对人ANKRD49基因的RNA干扰靶点序列,与p3×Flag-CMV-14/ANKRD49共转染HEK 293T细胞后,Immunoblotting鉴定ANKRD49的RNA干扰靶点。结果:RT-PCR结果显示,从A549细胞中扩增出约720 bp的片段。菌液PCR、双酶切及测序结果显示重组质粒p3×Flag-CMV-14/ANKRD49构建成功且序列正确。免疫荧光和Immunoblotting结果显示,在转染p3×Flag-CMV-14/ANKRD49的细胞中有ANKRD49的表达,蛋白质相对分子质量(Mr)约为27kDa,而转染空质粒组未见表达。MTT结果显示,ANKRD49对细胞增殖没有影响。共转染实验结果显示,1号和4号RNA干扰序列可以有效降低人ANKRD49的表达。结论:成功构建了真核表达重组体p3×Flag-CMV-14/ANKRD49,该蛋白质位于细胞核,不参与细胞增殖;同时鉴定出该基因的2个有效干扰靶点,为进一步研究其功能奠定了基础。 | 庞敏 王海龙 郭民 郭睿 | 2014 | 中国生物工程杂志2014，34，10： | 1 |
| 3 | 强直性脊柱炎IL-1F10-3基因与环境暴露因素交互作用研究显示文摘目的研究强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)IL-1F10-3基因(rs3811058)与环境因素的交互作用。方法对110例AS患者环境因素进行调查,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerasechain reaction restriction-fragment length polymorphism,PCR-RFLP)检测技术对基因型筛查,并进行基因组测序验证,采用单纯病例研究方法对AS病人IL-1F10-3基因与吸烟、饮酒、饮食、居住噪音、睡眠质量等7个环境暴露因素进行交互作用研究。结果 110例AS病人IL-1F10-3基因与7个环境因素之间均不存在交互作用(均有P>0.05)。结论 AS病人IL-1F10-3基因rs3811058位点与评价的环境暴露因素不存在交互作用。 | 张立 潘发明 王迎新 段振华 王笙 李建平 刘萍 徐彬 徐胜前 | 2012 | 中华疾病控制杂志2012，16，9： | 0 |
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