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| 1 | PAI siRNA表达载体的构建及鉴定显示文摘目的构建和鉴定针对PAI的发卡样小干扰RNA(siRNA)真核表达载体PAI siRNA。方法人工合成一对互补并编码相应短发夹状PAIsiRNA的寡核苷酸链,将其插入到pSilencerTM2.1-U6neo载体中,经测序鉴定所构建的重组载体是否正确;采用电转染法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达。结果经测序证明PAI siRNA序列正确;转染PAI siRNA载体后,HpG2细胞PAI mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降(P<0.01)。结论测序结果表明发卡样PAI siRNA真核表达载体构建成功,转染HpG2细胞后获得稳定表达,并可特异性封闭PAI的表达,为进一步研究PAI siRNA载体提供了实验基础。 | 杜建时 赵晴 张静菊 王嘉桔 | 2007 | 中国老年学杂志2007，27，15： | 1 |
| 2 | 针对PAI基因的小干扰RNA特异性调节PAI及tPA表达的实验研究显示文摘目的设计针对纤溶酶原激活物抑制物(plasminogen activator inhibitor,PAI)基因的小干扰RNA(PAI siRNA),研究其对PAI和组织型纤溶酶原激活物(tPA)表达的影响。方法体外化学合成PAI siRNA,电转染法转染人主动脉平滑肌细胞(HASMC),采用RT-PCR及Western印迹法分别从mRNA和蛋白水平上检测转染细胞PAI及tPA蛋白的表达情况。结果转染细胞PAI mRNA和蛋白表达水平均较对照组明显下降(P<0.01),tPA蛋白表达较对照组明显升高(P<0.01)。结论PAI siRNA可快速特异性封闭PAI基因表达,并调节tPA蛋白表达,使其升高,为进一步研究PAI在血栓性疾病中作用机制以及探讨PAI与tPA之间关系提供了实验基础。 | 侯旭晖 杜建时 尹健 张静菊 | 2008 | 中国老年学杂志2008，28，21： | 0 |
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