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1基于CD_(107a)标记流式细胞仪检测NK细胞毒性方法的建立显示文摘目的建立基于CD107a标记、利用流式细胞仪检测NK细胞毒性的方法。方法首先将外周血单个核细胞(PBM-Cs)与K562细胞以3∶1比例混合,2 h后加入莫能菌素,1.5 h后加入CD107a和CD56标记抗体,流式细胞仪分析CD107a阳性细胞的频率。其次观察CD107a抗体孵育时间、不同效靶比例对CD107a阳性细胞检测的影响。最后观察该方法与传统LDH释放法检测NK细胞毒活性的一致性。结果 NK细胞活化后可在其表面检测到高水平表达的CD107a分子,效靶细胞孵育结束后加入CD107a抗体可降低检测背景,低效靶比例同样具有检测敏感性。该方法与LDH释放法的检测结果一致。结论利用CD107a抗体标记检测NK细胞毒活性的方法具有快速、敏感、所需效应细胞少的优点。龚春香 王长荣 龚卫娟 胡茂志 季明春 2010实用临床医药杂志2010,14,7:4
2免疫学参数HLA与腹腔子宫内膜异位症病因学关系显示文摘目的:将子宫内膜异位症女性的腹水(PF)巨噬细胞和患有其他妇科疾病的女性的PF巨噬细胞表面抗原的表达进行比较,通过这一方法来研究宿主免疫应答对子宫内膜异位症病因学的影响。方法:对象为患有子宫内膜异位症的女性和患有其他妇科疾病的女性并且均需要通过手术治疗。在术中收集PF制成PFMC后,用流式细胞仪进行分析。结果:实验组中巨噬细胞表达的人类白细胞抗原(HIA)-ABC和-DR的表达明显降低,这提示我们子宫内膜异位症患者腹腔内腹水中的巨噬细胞免疫活性减弱。结论:本实验可以推断PF巨噬细胞免疫功能的紊乱可能为子宫内膜异位症发生的危险因素。胡玉红 徐建 2014黑龙江医药科学2014,37,6:4
3重组可溶性MHCI类相关蛋白A对NK细胞生物学活性的影响显示文摘目的:研究体外重组可溶性MHCI类相关蛋白A(sMICA)对NK细胞杀伤靶细胞活性、分泌IFN-γ、增殖和凋亡的影响。方法:将重组sMICA蛋白与人外周血NK细胞相互作用过夜后,流式细胞仪检测NK细胞杀伤K562靶细胞的能力;ELISA检测培养上清IFN-γ浓度;MTS/PMS法检测sMICA对NK细胞增殖的影响;给NK细胞标记Annexin V和碘化丙啶检测凋亡情况。结果:可溶性MICA抑制NK细胞杀伤K562细胞的活性,下调IFN-γ的分泌,却对NK细胞的增殖和凋亡没有影响。结论:肿瘤细胞表面脱落的sMICA抗原可通过抑制NK细胞活性而逃逸机体的免疫监视功能。龚卫娟 王海洋 范敏其 龚春香 刘丹 季明春 2009细胞与分子免疫学杂志2009,25,10:2
4K562细胞survivin基因表达对淋巴细胞增殖和功能的影响显示文摘目的探讨K562细胞中survivin基因的表达对淋巴细胞增殖和功能的影响。方法将融合重组质粒pEGFP-C1-survivin和靶向survivin基因的RNAi的重组质粒pTZU6+1-survivin分别转染K562细胞,得到K562/survivin+和K562/survivin-2种细胞,用G418筛选K562/survivin+细胞,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法及免疫细胞化学法检测K562/survivin+和K562/survivin-2种细胞中survivinmRNA及蛋白水平的表达,并与K562细胞作对照。将这3种细胞与健康人外周血单个核细胞(PBMC)混合培养(MLTC),检测混合培养体系中淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性及培养上清中IFN-γ水平。结果K562/survivin+组的淋巴细胞增殖指数明显低于其余两组。survivin基因的表达水平与NK细胞活性呈负相关。混合培养上清中分泌的IFN-γ,K562/survivin+组是K562组的1/4.5,是K562/survivin-组的1/8。结论高表达的survivin可以抑制淋巴细胞的增殖、NK细胞活性及IFN-γ的分泌。罗颖 温贤浩 徐酉华 2008第三军医大学学报2008,30,23:1
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