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1抗癌生物活性肽对人乳腺癌nm231细胞的增殖抑制作用显示文摘目的探讨抗癌生物活性肽(ACBP)对人乳腺癌nm231细胞的作用及其机制。方法nm231细胞经不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.25μg/ml)ACBP作用72h,以噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性。以0.25μg/ml的ACBP分别作用于nm231细胞4、6、24、48、72h,行光镜和透射电镜(作用48h细胞)观察。应用DNA凝胶电泳和磷脂结合蛋白V(AnnexinV,AV)/碘化丙啶(PI)双标记染色流式细胞术等方法,观察0.25μg/ml的ACBP作用不同时间对nm231细胞凋亡发生及作用48h对细胞周期的影响。以上各项检测均设以RPMI1640培养液取代ACBP的对照组。结果浓度为0.1μg/ml的ACBP即对nm231细胞的增殖有明显抑制作用,抑制率为10.3%,抑制作用具有浓度依赖性,ACBP浓度为0.25μg/ml时抑制率达35.1%。光镜观察显示,经0.25μg/ml的ACBP作用24h,细胞出现凋亡特征;作用48h,光镜及电镜下均可见大量的典型凋亡细胞。DNA凝胶电泳显示,经0.25μg/ml的ACBP作用24h的细胞出现DNA断裂;作用48h的细胞出现典型的梯形电泳图谱。流式细胞术分析显示,ACBP作用后AV(+)/PI(-)细胞和AV(+)/PI(+)细胞比例均随培养时间延长而增大;作用48h的nm231细胞G0/1期细胞比例高于对照组(P<0.01),而细胞增殖指数低于对照组(P<0.01)。结论ACBP可抑制nm231细胞的增殖,其机制与抑制nm231细胞的DNA合成和诱导细胞凋亡相关。贾淑芹 王文礼 苏秀兰 2007中国医药生物技术2007,2,4:7
2环磷酰胺和环孢素A对SLE患者外周血Th细胞亚群免疫调节的作用显示文摘目的:探讨环磷酰胺(CY)和环孢素A(CsA)对SLE患者外周血Th细胞亚群的免疫调节作用。方法:以10例重度活动的SLE患者和6例正常对照的PBMC为研究对象,将细胞悬液分为空白组、植物血凝素(PHA)刺激组、PHA+CY组、PHA+CsA组、CY组和CsA组分别给药,体外细胞培养24h后,利用三色流式细胞术检测CD4+IL-10+T细胞、CD4+IFN-γ+T细胞比例和CD8+IL-10+T细胞、CD8+IFN-γ+T细胞等比例,同时记录相应细胞的荧光强度。结果:CsA促进静息和活化状态下PBMC培养中表达CD4+IL-10+T细胞比例增加,同时CD4+T细胞表达IL-10荧光强度增强。CY虽然促进SLE PBMC培养中表达CD4+IL-10+T细胞比例增加,但对CD4+T细胞表达IL-10的荧光强度无明显增强。CsA抑制PBMC培养中表达CD8+IL-10+T细胞的比例,同时CD8+T细胞表达IL-10的荧光强度减弱。而CY虽然抑制SLE PBMC培养中表达CD8+IL-10+T细胞的比例,但CD8+T细胞表达IL-10的荧光强度却是减弱的。CsA对活化状态下正常对照和SLE PBMC培养中表达CD4+IFN-γ+T细胞比例的抑制作用优于CY,且CY对SLE患者PBMC培养中CD4+T细胞表达IFN-γ荧光强度抑制作用也是减弱的。CsA和CY均可抑制活化状态下,正常对照PBMC和静息状态下SLE PBMC培养中表达CD8+IFN-γ+T亚群细胞的比例,且CY的抑制作用优于CsA。但CY对SLE PBMC培养中CD8+T细胞表达IFN-γ荧光强度的增强作用不如CsA。结论:CsA和CY均能使CD4+T细胞受抑,CD8+T细胞上升。但CsA对T细胞活化,炎症相关细胞因子表达启动的反应更为敏感,免疫调节作用更为显著。姜玉章 季晓辉 李玉峰 李媛媛 2008细胞与分子免疫学杂志2008,24,2:2
3霉酚酸衍生物对人PBMC产生IL-17和IFN-γ的抑制作用显示文摘目的探讨霉酚酸衍生物(JU95-07B)对人外周血单个核细胞(PBMC)产生IL-17和IFN-γ的抑制作用,为临床治疗炎症及自身免疫性疾病提供依据。方法用anti-CD3+anti-CD28刺激PBMC,酶联免疫吸附法(ELISA)检测加入不同浓度JU95-07B及作用不同时间点的IL-17和IFN-γ水平。用流式细胞术(FCM)检测JU95-07B对T细胞不同亚群表达IL-17和IFN-γ的影响。用RT-PCR法测定JU95-07B对IL-17和IFN-γmRNA的作用。结果 JU95-07B对anti-CD3+anti-CD28诱导PBMC产生的IL-17和IFN-γ均呈剂量依赖性的抑制,与作用时间有关,早期无明显的抑制现象,12 h后开始出现有统计学意义的抑制效果(P<0.05),培养时间越长抑制效果越明显。JU95-07B可明显降低CD4+和CD8+T细胞产生IL-17和IFN-γ的比例,对IL-17的抑制率高于IFN-γ。此外,JU95-07B抑制IL-17和IFN-γmRNA的表达。结论 JU95-07B能有效抑制T细胞产生IL-17和IFN-γ。唐泽丽 黄河 江玉霞 张燕楠 杨滨燕 吴长有 2013热带医学杂志2013,13,4:0
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