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| 1 | 表皮干细胞的分离培养和鉴定显示文摘目的分离培养和鉴定人表皮基底层干细胞。方法中性蛋白水解酶选择性的消化表皮与真皮之间的细胞连接,采用改良的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法分离、培养表皮中的干细胞,观察培养第2、4、6天时a6、β1整合素、K19、K14、p63、Nestin、CD34、PCNA及K10在表皮干细胞中的表达差异。结果改良过的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法能够有效地促进表皮干细胞的贴壁和伸展。原代分离的表皮基底层干细胞a6、p1整合素,K19,K14,p63,Nestin,CD34及PCNA表达为强阳性而K10不表达。这些细胞具有干细胞的特点,可以形成克隆。随着培养时间的增加,表皮干细胞形态发生变化,a6、β1整合素、K19、K14,表达逐渐减弱,K10表达逐渐增强。此外,在原代分离的细胞中可见单个核样干细胞表达a6、β1整合素,K19,K14,P63,Nestin,CD34及PCNA,这些细胞形态相似体积较表皮基底层干细胞大,胞核为肾形,染色较深。结论中性蛋白水解酶消化合并改良过的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法能够高效地分离表皮中的干细胞。分离的细胞具有干细胞的特点,可以形成集落。此外,原代分离培养的表皮干细胞中仍然可见单个核样干细胞,这些细胞形态相似,类似血液系统来源的单核细胞,胞质内均匀分布着粗大的阳性颗粒。单个核样干细胞可能与皮肤的发牛、发育以及创伤修复有关。 | 孙晓艳 付小兵 孙同柱 | 2007 | 中华实验外科杂志2007，24，2： | 23 |
| 2 | 组织工程皮肤修复全层皮肤缺损的实验研究显示文摘目的探索由人表皮干细胞、成纤维细胞与纤维蛋白支架构建的组织工程皮肤修复全层皮肤缺损的可行性。方法将人全层皮肤采用胰蛋白酶消化法使表皮干细胞和真皮成纤维细胞分离后,分别在无血清培养基中行原代及传代培养。将体外扩增培养至第3、4代的表皮干细胞(5×104/mL)和真皮成纤维细胞(1×104/mL)共0.5mL与纤维蛋白支架(0.5mL)混合凝固构建组织工程皮肤。取4~5周龄雄性裸鼠45只,体重19.5~20.3g,平均20.0g,制备背部全层皮肤缺损模型。随机分为5组,每组9只,分别为空白对照组(C组),创面仅覆盖凡士林油纱,自然愈合;单纯支架组(F组),创面移植无细胞的纤维蛋白支架;表皮支架组(S组),创面移植含有表皮干细胞的纤维蛋白支架复合物;成纤维细胞支架组(Fb组),创面移植含有成纤维细胞的纤维蛋白支架复合物;组织工程皮肤组(T组),创面移植组织工程皮肤。术前及术后1、3、6、8周行全身及移植部位大体观察;移植后3、6、8周,取材行组织学、免疫组织化学及扫描电镜观察。结果?细胞培养4周后,表皮干细胞培养皿内可见圆形细胞,在加有BrdU的培养液中培养6d后可见BrdU染色阳性细胞;成纤维细胞培养皿内可见梭形细胞。构建的组织工程皮肤可见CK19免疫荧光染色阳性细胞、Nestin染色阳性细胞。移植后T组新生皮肤较其余各组生长快、瘢痕轻。术后6周,C、F、S、Fb及T组皮肤厚度分别为:(0.460±0.049)、(0.480±0.055)、(0.540±0.043)、(0.510±0.032)及(0.660±0.047)mm,T组明显厚于其余各组,且差异有统计学意义(P<0.05)。术后3、6、8周,HE染色及扫描电镜示,T组新生表皮层数及真皮成纤维细胞、血管数量均多于其余各组,且T组真皮血管及胶原纤维排列均较其余各组整齐;术后3周,Ⅳ型胶原免疫组织化学染色显示,T组已形成连续的染色带,而其余各组均不连续;术后6周,CK14免疫组织化学染色显示,T组可见阳性细胞,其余各组均未见。结论用表皮干细胞、成纤维细胞及纤维蛋白支架构建的组织工程皮肤移植后能使创面迅速愈合,可望成为一种较理想的组织工程皮肤。 | 张琮 王乃佐 陈辉 周光峰 张国安 韩斌 | 2008 | 中国修复重建外科杂志2008，22，2： | 9 |
| 3 | 胚胎组织提取液影响表皮干细胞表型变化的初步研究显示文摘目的:模拟表皮干细胞周围生态微环境,研究表皮干细胞在此环境中的表型变化,表皮干细胞微环境在表皮干细胞'命运'决定过程中的作用。方法:分离、培养表皮干细胞,观察其形态,并进行免疫组织化学鉴定及免疫荧光检测。制备小鼠胚胎组织匀浆液,荧光活细胞示踪法和逆转录聚合酶链式反应检测胚胎组织提取液对表皮干细胞表型变化的影响。结果:原代分离培养的表皮基底层干细胞表达α6、β1整合素、K19、K14、p63、Nes-tin、PCNA为阳性,而K10不表达。激光共聚焦检测显示α6整合素和CD71在表皮干细胞中的分布存在着区域性差异。此外,流式细胞检测显示胚胎组织提取液作用后α6+CD71-表达细胞由细胞总数的22.49%减少至10.92%,而α6+CD71+、α6-CD71+表达细胞则分别由诱导前的62.29%及0.19%增加至诱导后的68.34%及4.51%。RT-PCR结果表明胚胎组织提取液作用后,表皮干细胞中β1整合素、K19、K10表达增强,而K14表达减弱。结论:Ⅳ型胶原黏附法分离的表皮干细胞具有干细胞的特点。α6整合素、CD71在表皮干细胞中分布的区域差异及CD71表达位点的空间变化可以作为区分表皮干细胞及其子代细胞标志之一。胚胎组织提取液对表皮干细胞的增殖分化具有促进作用。胚胎组织提取液中的某些因子可能抑制了K14表达的TA细胞的终末分化,甚至诱导其发生逆向分化,导致诱导后K14的总体表达水平下调。 | 孙晓艳 付小兵 盛志勇 张翠萍 孙同柱 | 2008 | 中国病理生理杂志2008，24，5： | 5 |
| 4 | 脑胶质瘤干细胞研究进展显示文摘脑胶质瘤是常见的脑原发恶性肿瘤,其治疗主要依据WHO分级;手术切除为首选,术后放疗及放化疗是提高脑胶质瘤生存期的重要手段。低分级脑胶质瘤的治疗效果较好,生存期较长;而高分级患者治疗后的生存期只能以月来描述。脑胶质瘤治疗失败的主要原因是局部复发,而导致复发的重要原因是胶质瘤干细胞未得到有效控制。因此,脑胶质瘤干细胞的鉴别及生物学特性的研究成为近年来国内外学者关注的热点,笔者综述脑胶质瘤干细胞的研究进展。 | 盖雪 杨伟志 | 2011 | 中华放射肿瘤学杂志2011，20，6： | 2 |
| 5 | 皮肤干细胞在胎皮中分布的免疫组织化学研究显示文摘目的采用免疫组织化学方法研究不同时期胚胎皮肤中的干细胞,分析皮肤干细胞的形态、分布特点及发育过程中在胎儿皮肤中的迁徙、增殖分化特征,探讨皮肤干细胞与皮肤发生发育的关系。方法不同发育时期胎儿皮肤,取材、固定、制成石蜡切片,SP法检测整合素-β1、角蛋白19(K19)、K14、K10和PCNA的表达。结果胚胎发育期可见整合素-β1阳性的细胞在基底层散在分布。随胎龄增加,整合素-β1表达减弱,表达范围减小。同时,胚胎发育的不同阶段K19均在表皮基底层强烈表达。表皮分层期后,K14阳性细胞从基底层向上延伸至亚基底层。而K10作为表皮终末分化细胞的标志,主要分布在表皮的中层和外层。此外,在毛囊发育过程中,胎皮表皮嵴的细胞相互聚集成团,形成毛囊初级原基,表达整合素-β1、K19、K14及PCNA为阳性。随着毛囊的形成、成熟,皮肤干细胞主要聚集在与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质,表达整合素-β1、K19、K14和PCNA为阳性。结论(1)皮肤的发生、发育与角蛋白的程序性改变密切相关;(2)毛囊的发生、发育受到毛乳头的诱导作用。毛囊成熟期后,皮肤干细胞主要迁移至与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质等处。此外,还发现毛乳头及其周围组织内分布着单核样细胞表达整合素-β1、K19和K14为阳性。 | 邬彩虹 孙晓艳 付小兵 韩伊林 | 2007 | 中华实验外科杂志2007，24，9： | 1 |
| 6 | CK15和Nestin在皮肤上皮性肿瘤诊断中的应用显示文摘皮肤上皮性肿瘤种类繁多,在临床皮肤肿瘤病理检查工作常常需要借助各种免疫标志物的检测,但由于皮肤上皮性肿瘤的复杂性和各个肿瘤免疫标记表达的重叠,其对诊断和鉴别诊断的帮助仍然有限。探讨更多新标志物对皮肤上皮性肿瘤的诊断价值,依然是重要的任务。近年毛囊干细胞标记物CK15和Nestin被用于皮肤附属器肿瘤的病理诊断和皮肤附属器肿瘤与皮肤转移性癌的鉴别,是一种新的诊断思路。 | 周晓秋 李新功 | 2013 | 中国麻风皮肤病杂志2013，29，11： | 0 |
| 7 | 第七届泛珠江区域放射肿瘤学学术大会会讯显示文摘由泛珠江区域11省(区、市)及港澳台(11+3)放射肿瘤学界同道共同发起的泛珠江区域肿瘤放疗协作组于2006年成立。协作组秉持团结、协作、发展的宗旨,构建区域内肿瘤放疗学共同发展的学术交流和临床协作研究平台,促进区域内放射肿瘤学事业发展。现已在广州、成都、福州、武汉、昆明及南昌成功地举办了6届学术大会,在国内外形成了一定影响力。 | | 2011 | 中华放射肿瘤学杂志2011，20，6： | 0 |
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