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| 1 | 对统计学的课程建设、学科建设和专业建设的几点思考显示文摘在以教学为中心的前提下,统计学的课程建设、学科建设和专业建设应注意解决好以下几个问题:明确相应的建设思路:处理好统计学的课程建设、学科建设和专业建设的关系;协调好建设内容:配置好相应的人力、物力和财力。 | 程士富 杜金柱 | 2005 | 统计教育2005，，7： | 9 |
| 2 | 传染性喉气管炎病毒中国王岗株tk基因的克隆及鉴定显示文摘以质粒pBluescript SK^+为载体克隆传染性喉气管炎病毒(ILTV)中国王岗株的DNA,构建了THind Ⅲ DNA文库。参考ILTV美国632株胸苷激酶(tk)基因的DNA序列,设计并合成了一对20bp长的引物;以ILTV中国王岗株DNA为模板,用PCR方法特异性地扩增出ILTV-713bp的tk DNA片段。用光敏生物素标记该713bp片段作为探针,通过斑点杂交从ILTV中国王岗株Hind Ⅲ DNA文库中筛选出4个含2.4kb外源片段的tk基因阳性重组质粒。经酶切分析、Southern杂交、PCR检测和部分限制酶酶谱分析表明:ILTV中国王岗株DNA 2.4 kb Hind Ⅲ 片段无论是片段大小还是酶切图谱均与美国632株完全相同,而且Southern杂交和PCR检测均为tk阳性,证明其中包含有完整的tk基因。本研究的目标是用克隆的tk基因进行体外缺失和重组,以构建毒力进一步降低的tk缺失减毒株,这些工作正在进行中。 | 张绍杰 于力 王玫 王柳 童光志 | 1994 | 中国兽医学报1994，14，3： | 9 |
| 3 | 鸡传染性喉气管炎病毒核酸探针的制备及特异性鉴定显示文摘从鸡传染性喉气管炎病毒王岗株感染的鸡胚绒毛尿囊膜细胞中提取病毒,并抽提其核酸,经限制性核酸内切酶Pst Ⅰ完全消化后,在0.7%琼脂糖凝胶中电泳分离,然后用DE—81滤纸回收2~6kb区域的片段与质粒pBluescrip^+SK重组.有3个重组质粒(pLT—1,pLT—2和pLT—4)所含外源DNA片段的大小,分别与4.3kb,4.8kb和1.6kb的鸡传染性喉气管炎病毒DNA Pst Ⅰ片段一致,经过Southern杂交试验证明,这3个片段都是病毒DNA的特异性片段.用光生物素标记重组质粒pLT—1和pLT—2后混合作为探针,再与鸡喉气管炎病毒及其他8种鸡传染性病原进行杂交,证明此探针只与喉气管炎病毒反应,而与其他8种病原无任何交叉反应. | 童光志 李峰 王玫 王柳 辛桂香 王锡堃 | 1992 | 兽医大学学报1992，12，3： | 6 |
| 4 | 伪狂犬病病毒gD、gE基因的克隆及转移载体的构建显示文摘利用PCR扩增了伪狂犬病病毒Min_A株gD、gE基因,扩增产物克隆于pGEM_TEasy载体。将gD、gE基因连接于质粒pUC18获得pUgDgE,缺失质粒pUgDgE的BamHI和BstEII位点间391bp的片段。在此缺失位置插入来自质粒pcD NA3.1_的一段含hCMV启动子、多克隆位点和Neo报告基因的片段,构建了通用转移载体pgD_M_gE。该转移载体缺失了伪狂犬病病毒gI基因和gE基因ORF5'端363bp的碱基,有11个酶切位点可供外源基因的插入,上下游侧翼分别为1.25bp和1.42bp。这为开发以伪狂犬病病毒为载体的多价基因工程疫苗提供了有力工具。 | 胡涛 崔保安 杨明凡 王学斌 张素梅 王岩 | 2004 | 中国预防兽医学报2004，26，2： | 6 |
| 5 | 伪狂犬病病毒Min-A株TK基因的克隆与序列分析显示文摘参考GeneBank收录的伪狂犬病病毒TK基因的序列设计了1对引物,对PRVMin A株进行了PCR扩增,扩增产物克隆于pGEM TEasy载体.对重组质粒进行限制性内切酶分析和基因测序,证实了克隆片段的可靠性.测序结果表明目的片段包含1个957bp的开放性阅读框(ORF),编码318个氨基酸组成的多肽.在TKORF上游 22,-166,-199位存在3个GC框样序列,在终止密码子下游第110个核苷酸处的1306位存在有多聚腺苷加尾信号.PRVMin A株与PRVEa株、NIA 3株TK的核苷酸同源性分别为98.4%,97.9%;推导氨基酸的同源性分别为97.8%,97.2%.通过对α疱疹病毒TK氨基酸进行多序列比较,获得了在PRVTK氨基酸序列上的6个保守区间.推测这些保守氨基酸对于胸苷激酶(TK)结构的稳定性和催化活性的发挥是必需的. | 胡涛 崔保安 王岩 杨明凡 王学斌 张素梅 | 2004 | 河南农业大学学报2004，38，1： | 4 |
| 6 | 伪狂犬病病毒Min-A株gE基因的克隆及序列分析显示文摘参考GenBank中伪狂犬病病毒 (PRV) gE基因的序列设计了 1对引物 ,对PRVMin A株进行了PCR扩增 ,扩增产物克隆于 pGEM TEasy载体。对重组质粒进行限制性内切酶分析和基因测序 ,证实了克隆片段的可靠性。测序结果表明 ,目的片段包含 1个 174 0bp的开放性阅读框(ORF) ,编码由 5 79个氨基酸组成的多肽。同源性分析表明 ,PRVMin A株与PRVEa株、SH株gE基因的核苷酸同源性分别为 99.2 %、98.7% ;推导氨基酸的同源性分别为 98.6 %、97.2 %。 | 胡涛 崔保安 王学斌 杨明凡 张素梅 王岩 | 2003 | 中国兽医科技2003，33，8： | 2 |
| 7 | 伪狂犬病病毒Min-A株gD基因的克隆及其真核表达质粒的构建显示文摘参考GeneBank收录的伪狂犬病病毒gD基因的序列设计了一对引物,对PRVMin_A株进行了PCR扩增,扩增产物克隆于pGEM_TEasy载体。对重组质粒PGTE_gD进行限制性内切酶分析和基因测序,证实了克隆片段的可靠性。测序结果表明目的片段包含一个1203bp的开放性阅读框(ORF),编码400个氨基酸组成的多肽。将gD基因亚克隆至真核表达载体pcDVA3.1_的CMV启动子下游,构建了真核表达质粒pcDNA_gD,为下一步基因免疫奠定了基础。 | 胡涛 崔保安 王岩 祁小乐 王丽娟 | 2004 | 中国预防兽医学报2004，26，1： | 1 |
| 8 | 单纯疱疹病毒通用及Ⅱ型特异性DNA探针的制备及应用研究显示文摘单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ型及Ⅱ型之间有很多共同抗原,能引起血清学交叉反应,鉴别诊断比较困难。本实验利用重组DNA技术,将部分HSV-2DNA的PstI片段克隆到载体质粒PSK中,并筛选出两个重组质粒(P和P)只与HSV-2反应,与HSV-1不反应,这两个重组质粒中所含的HSV-2DNA片段大小分别是3.1和4.3kb,另外,还筛选了一个重组质粒(PHSV2-1,含5.8kbHSV-2DNA片段)与HSV-1和HSV-2均反应。将4.3kb的片段用光生物素标记后作为探针检测了159份人阴道拭子,其中23份样品呈阳性反应,其余均为阴性,从23份阳性样品中挑选12价涂片用间接荧光抗体法检测也都呈阳性反应,随机挑选的几份杂交反应阴性样品在间接荧光试验中也是阴性。本实验制备的HSV通用及HSV-2型特异性探针将比常规的血清学方法诊断和鉴别HSV-1和HSV-2感染更为可靠。 | 童光志 刘学礼 王柳 王玫 张宝海 卢景良 | 1994 | 生物技术1994，4，1： | 0 |
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