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| 1 | 肾综合征出血热疫苗研究现状显示文摘 | 董关木 | 2003 | 中华实验和临床病毒学杂志2003，17，2： | 8 |
| 2 | 原核细胞表达的肾综合征出血热病毒核蛋白免疫原性及免疫保护作用的研究显示文摘对原核细胞表达的肾综合征出血热病毒核蛋白的免疫原性及免疫保护作用进行了研究,结果发现表达的核蛋白具有很强的免疫原性,免疫小白鼠血清中抗肾综合征出血热病毒荧光抗体滴度达1:12800;用免疫小鼠脾细胞和血情做被动免疫保护实验,结果显示脾细胞对部分乳鼠肾综合征出血热病毒的致死感染有保护作用,保护率可达38%,而血清不具有免疫保护作用;同时也未观察到核蛋白免疫血清具有促感染乳鼠早死作用。表明核蛋白能诱导细胞免疫保护但不诱导抗体介导的免疫保护,同时也不引起抗体介导的早死,这就为肾综合征出血热病毒核蛋白作为该病毒基因工程疫苗的成分提供了一定的理论基础。 | 黄长形 李光玉 杨为松 杭长寿 白雪帆 孙永涛 张文彬 李新红 | 1996 | 中国病毒学1996，11，3： | 7 |
| 3 | 重组抗原的IgM捕捉ELISA在肾综合征出血热诊断中的应用显示文摘用原核表达的汉坦病毒76118株核蛋白为夹心抗原,组合抗人μ链多克隆抗体和酶标抗汉坦病毒单克隆抗体,建立了IgM捕捉法ELISA,用以检测610份疑似患者血清,并与免疫荧光法(IFA)相比较。结果本方法与IFA的阳性符合率9410%、阴性符合率9283%、总符合率9361%,检出率在发病5日内明显高于IFA,6至30日无区别,30天后开始下降,检出病例的月分布与发病规律相符。表明重组核蛋白抗原的IgM捕捉ELISA能够准确早期诊断HFRS。 | 王敬军 田君喜 周燕平 封怀义 张家驹 | 1999 | 中国公共卫生1999，15，7： | 5 |
| 4 | 汉滩病毒S基因真核表达载体的构建及免疫小鼠的初步研究显示文摘目的研究汉滩病毒S片段编码区基因免疫小鼠的作用。方法利用基因重组技术,构建含汉滩病毒S片段编码区基因的真核表达质粒。用此质粒直接注射到BALB/c小鼠骨骼肌内进行DNA免疫,用间接免疫荧光法检测免疫小鼠血清中汉滩病毒抗体。结果在初次免疫的小鼠血清中检测出有低滴度的汉滩病毒抗体。加强免疫后,抗体水平显著上升,免疫荧光抗体(IFAT)滴度最高达1640。约87%的免疫动物发生了血清抗体阳转。抗体水平及小鼠血清抗体阳转率与注射的质粒DNA剂量及注射次数有关。 | 张梦华 杨为松 黄长形 李光玉 王航雁 汪毅 白雪帆 | 1999 | 中华微生物学和免疫学杂志1999，19，1： | 3 |
| 5 | 我国疫区HFRS患者汉滩病毒核蛋白特异性CTL克隆的建立显示文摘目的 探讨汉滩病毒核衣壳蛋白 (HTNV NP)诱生的特异性细胞免疫的分子基础 ,阐明HFRS的发病机理。方法 分离HFRS患者的PBMC ,建立HTNV NP特异性的CTL克隆 ,同时将克隆有HTNVS基因不同片段的真核表达载体转染患者自身的B淋巴母细胞系 (BLCL) ,建立CTL靶细胞系 ,并进行细胞杀伤试验。结果 建立的特异性CTL克隆对表达完整NP、NP羧基和氨基端肽段的靶细胞均有比较明显的杀伤效应 ,平均杀伤率分别为 5 0 .2 %、39.0 %和 2 5 .4 %。结论 HTNV NP优势T细胞表位可能主要位于病毒核蛋白的羧基端。 | 潘蕾 黄长形 李光玉 白雪帆 | 2002 | 中华微生物学和免疫学杂志2002，22，5： | 3 |
| 6 | HTHV核蛋白诱导产生特异性CTL的实验研究显示文摘目的 建立稳定表达核蛋白(NP)的P815细胞株,并以此作为CTL的靶细胞,研究汉滩病毒(HTHV)诱导产生的NP抗原特异性CTL。方法 脂质体介导pEFBOS/HTHVNP和pDORneo质粒DNA共转染P815细胞株,用免疫组化染色法证实NP在胞浆中的表达。分别取HTHV感染小鼠的脾细胞和pEFBOS/HTHVNP质粒DNA免疫小鼠的脾细胞,经体外抗原和IL2再刺激诱导产生CTL效应细胞,进行4h51Cr释放实验。结果 杀伤试验结果表明,无论通过病毒感染还是基因免疫获得的CTL效应细胞,均可以特异性杀伤NP基因转染的靶细胞。结论 HTHVNP可以有效诱导CTL的产生,该研究结果为进一步设计HTHV合成肽疫苗或基因疫苗提供了重要实验依据。 | 张婷婷 朱勇 金伯泉 刘飞 孙忱 陈丽华 | 2000 | 中华微生物学和免疫学杂志2000，20，1： | 2 |
| 7 | 汉滩病毒S基因免疫小鼠的细胞免疫应答的初步观察显示文摘将汉滩病毒S片段编码区基因插入到含CMV启动子 /增强子 (promoter/enhancer)的真核表达载体pVR10 12中 ,构建成真核表达质粒 pVRS2 2。质粒DNA经纯化后 ,注射经布比卡因预处理的Balb/c小鼠的股四头肌 ,多次免疫后 ,免疫小鼠淋巴细胞增殖功能的检测结果显示 :免疫鼠的脾细胞能够对体外抗原刺激产生增殖反应 ;CTL活性检测结果表明 :靶细胞51Cr的释放是效应细胞依赖性的 ,并且与病毒感染组的淋巴细胞的细胞毒活性相似。结果显示 ,用重组质粒pVRS2 2免疫小鼠 ,能够诱导小鼠产生特异性淋巴细胞增殖反应和细胞毒性T淋巴细胞活性(CTL)。 | 张梦华 王航雁 杨为松 黄长形 李光玉 汪毅 白雪帆 | 2000 | 病毒学报2000，16，3： | 2 |
| 8 | 原核表达汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和G2的免疫学特性显示文摘目的 研究大肠杆菌表达的汉滩病毒囊膜糖蛋白G1和 G2的免疫原性和免疫保护作用 .方法 将大肠杆菌表达的 G1和 G2免疫小白鼠 ,测定免疫小鼠血清中汉滩病毒抗体的间接免疫荧光抗体和中和抗体滴度并利用被动免疫保护试验观察 G1和 G2免疫小鼠血清和脾细跑对汉滩病毒致死性感染乳鼠的保护作用 .结果 表达 G1和 G2免疫小鼠血清中抗汉滩病毒抗体的滴度分别为 1∶ 16 0 ,1∶ 32 0 ;G1,G2共同免疫不能提高免疫效果 ;NP,G1,G2共同免疫 ,血清中抗汉滩病毒抗体的滴度较 NP单独免疫低 ;有一份 G2免疫血清中检测到低效价的中和抗体 ,效价为 1∶ 10 ;G1,G2免疫血清及免疫小鼠脾细胞对致死性感染的乳鼠都有一定保护作用 ,且 G2较明显 .结论 表达的 G2能刺激小白鼠产生中和抗体 ,但表达的 G1不能刺激产生可测定的中和抗体 ,表达的G1,G2和 NP共同免疫不能提高中和抗体的滴度 ;G1和 G2免疫血清和脾细胞都能被动保护致死性感染的乳鼠 ,或使乳鼠免于死亡或延长其存活时间 ,G2的保护作用更明显 ,G2免疫血清的保护率可达 5 0 % ,脾细胞的保护率可达 10 % . | 李光玉 黄长形 白雪帆 潘蕾 杨为松 | 2000 | 第四军医大学学报2000，21，7： | 2 |
| 9 | 汉滩病毒S基因-重组痘苗病毒的制备和表达鉴定显示文摘目的 :制备和鉴定汉滩病毒 (HTNV)S基因 重组痘苗病毒 ,为进一步建立肾综合征出血热 (HFRS)患者HTNV核衣壳蛋白特异性细胞毒T淋巴细胞 (CTL)的靶细胞奠定基础。 方法 :用野生型痘苗病毒和HTNVS基因 重组痘苗病毒分别感染Vero细胞 ,进行病毒扩增和滴度测定。用PCR和斑点杂交鉴定重组痘苗病毒基因组中的HTNVS基因 ,用间接免疫荧光和westernblot检测核衣壳蛋白的表达。 结果 :制备了含HTNVS基因的重组痘苗病毒 ,滴度为 4 .0 2× 10 7。该重组痘苗病毒基因组中存在HTNVS基因 ,它在Vero细胞中能有效地表达核衣壳蛋白。 结论 :制备了较高滴度、能有效表达HTNV核衣壳蛋白的重组痘苗病毒。 | 王平忠 白雪帆 张颖 陈红梅 | 2004 | 医学研究生学报2004，17，1： | 0 |
| 10 | 汉滩病毒核蛋白在大肠杆菌中高效表达显示文摘目的:提高汉滩病毒核蛋白的表达量,进一步研究核蛋白的功能,并利用其建立HFRS的血清学诊断方法.方法:利用已有的含PRPL启动子的汉滩病毒核蛋白编码区的表达载体S22,通过酶切和连接的方法,将汉滩病毒S片段核蛋白的编码区基因插入融合蛋白表达载体pGEX-4T-1的GST基因的3'末端,构建了一种表达核蛋白的融合质粒pTHanS.结果:经薄层扫描仪扫描,pTHanS核蛋白的表达量占细菌总蛋白量的32%.并对两种不同质粒的表达产物进行比较,结果发现:表达核蛋白编码区的两种不同载体pB-VS22和pTHanS的表达产物量和免疫原性差别很大(P<0.01),S22及pTHanS的表达上清抗原性均高于尿素裂解沉淀的抗原性(P<0.01),融合蛋白表达质粒pTHanS的核蛋白表达量远远大于S22的表达量(P<0.01).结论:融合蛋白表达载体pTHanS能高效表达汉滩病毒核蛋白. | 李新红 杨为松 黄长形 白雪帆 李光玉 张文彬 | 1997 | 第四军医大学学报1997，18，3： | 0 |
| 11 | 汉滩病毒S片段基因编码区在Vero-E_6细胞中的表达显示文摘汉滩病毒属于布尼亚病毒科汉坦病毒属,主要引起人类肾综合征出血热[1]。我国是肾综合征出血热发生和流行的主要疫区,该病起病急、病死率高,流行范围广,因此寻找安全有效、低廉的疫苗是控制本病流行和发生的关键。基因免疫是近年来微生物学和免疫学研究的新热点[2... | 张梦华 王航雁 杨为松 黄长形 李光玉 汪毅 白雪帆 | 1999 | 中国病毒学1999，14，2： | 0 |
| 12 | 含HTNV S基因重组痘苗病毒在HFRS患者B淋巴母细胞系中的表达显示文摘采用Ficoll密度梯度离心法(淋巴细胞分离液)分离肾综合征出血热(HFRS)患者外周血单个核细胞(PBMC),并用EB病毒(EBV)感染B淋巴细胞,建立永生化的B淋巴母细胞系(B-LCL)。然后,用含汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)S基因的重组痘苗病毒感染B-LCL,应用间接免疫荧光检测核衣壳蛋白的表达。结果表明,B淋巴细胞经EBV感染4周左右,可形成永生化B-LCL。成功转化后的B-LCL,体积增大,且增殖的淋巴细胞积聚成团。汉滩病毒S基因在B-LCL中能有效表达核衣壳蛋白。含S基因的重组痘苗病毒感染的B-LCL可用作HTNV核衣壳蛋白特异性CTL活性研究的靶细胞。 | 王平忠 白雪帆 潘蕾 张颖 黄长形 | 2003 | 中国病毒学2003，18，5： | 0 |
| 13 | 汉滩病毒S片段基因cDNA 3′端非编码区对核蛋白在大肠杆菌中表达的影响显示文摘为了探讨汉滩病毒S片段cDNA3′端非编码区基因对核蛋白表达的影响,先后构建了两个核蛋白的表达质粒(pBVS22和pBVSX),其中pBVS22不含非编码区基因,pBVSX含有3′端非编码区基因。比较两者在大肠杆菌中表达核蛋白的水平后发现3′端非编码区对核蛋白的表达有明显的负调控作用,表达量下降近50%。可能的原因是非编码区中含有非常丰富的AT碱基。该研究结果为进一步提高汉滩病毒核蛋白的表达量积累了经验,也为高效表达其它病毒结构蛋白提供了有益的资料。 | 黄长形 杨为松 杭长寿 白雪帆 李光玉 李新红 孙永涛 张文彬 | 1997 | 中华微生物学和免疫学杂志1997，17，4： | 0 |
| 14 | 汉滩病毒S基因体外转染Vero-E_6细胞显示文摘 | 张梦华 杨为松 黄长形 李光玉 汪毅 李新红 白雪帆 | 1999 | 第四军医大学学报1999，20，2： | 0 |
| 15 | 重组汉坦病毒核壳蛋白抗原诊断肾综合征出血热显示文摘目的 证实重组汉坦病毒核壳蛋白 (rNP)对肾综合征出血热的诊断价值。方法 用大肠埃希菌表达汉坦病毒 76 118株S基因获得rNP ,从该病毒感染细胞裂解液获得天然NP。在相同的捕捉法酶联免疫吸附测定 (ELISA)系统中 ,比较研究rNP与天然NP的抗原功能。用rNP抗原的捕捉法ELISA检测临床血清 ,与间接免疫荧光 (IFA)检测特异性IgG的结果相比较。结果 用rNP和天然NP平行检测 116份各类血清 ,两者符合率达 99.2 1% ;用rNP的捕捉法ELISA检测 6 10份临床血清 ,结果与IFA的符合率为 93.6 1%。结论 rNP抗原的捕捉法ELISA对肾综合征出血热具有诊断价值。 | 田君喜 王敬军 周燕平 封怀义 张家驹 | 2000 | 中华检验医学杂志2000，23，2： | 0 |
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