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1抗人M和N型GPA特异性单克隆抗体的制备和鉴定显示文摘目的:为了建立“血型糖蛋白A(GlycophorinA,GPA)突变分析”技术。方法:采用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)。结果:获得3株分泌抗GPA特异性McAb的杂交瘤细胞系,这3株McAb均属于IgG2a亚类、Kappa型轻链,其中2株特异性抗M型GPA,另外1株特异性抗N型GPA。3株McAb所针对的抗原决定簇位于GPA多肽链N末端第1~39位氨基酸之内,抗体与其结合依赖糖链的完整性。结论:制备的McAb可用于“GPA突变分析”的研究,也可以作为血型试剂在血液免疫学、遗传学和法医学的领域中应用。董燕 毛建平 刘斌 孙志贤 2000中国免疫学杂志2000,16,2:3
2抗人红细胞非凝集单克隆抗体的研制与应用显示文摘目的 研制出抗人红细胞非凝集单克隆抗体,进而构建双功能抗体试剂,用于临床实验室诊断。方法 用自愿者O型红细胞免疫BALB/C小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗人红细胞非凝集单克隆抗体。结果 获得4株分泌抗人红细胞非凝集单克隆抗体的杂交瘤细胞株(7A1、7A2、1H7、7H3)。4株单克隆抗体免疫球蛋白的轻链均为k型,重链均为IgG1类。检测200例正常人红细胞(A、AB、B、O型)。Cooma’s试验均发生凝集;与实验所用10种动物的红细胞无交叉反应。进一步对其在检测肾综合征出血热抗体的全血凝集试验方法方面的应用进行了初探。结论研制的7A1抗人红细胞非凝集单克隆抗体可用于构建双功能试剂。段薇 张健 鲍蕾 郑剑玲 赵洪礼 苏丹 王美慧 2002中国公共卫生2002,18,4:1
3单克隆抗体双位点一步ELISA方法检测MN血型显示文摘目的 :对法医学样品中微量液体血、血痕进行MN分型。方法 :利用抗M、抗N及抗血型糖蛋白A单抗 ,采用双位点一步ELISA方法。结果 :此法可检测的最低全血量约0 065μl,血痕约10~50ng。对455份新鲜血液及200份新鲜血痕的标本均正确检出 ;对58例陈旧血痕的检出率为96 6 %。结论 :此法准确率高且简便、快速 ,具有很大的实用价值。鲍蕾 张健 孙玉显 郑剑玲 孙辉 2000法医学杂志2000,16,3:0
4抗人GPA^N单克隆抗体的制备及鉴定显示文摘目的 制备抗GPA单克隆抗体以建立“GPA体细胞突变分析法”。方法 用O ,N型人红细胞 ,以及纯化人GPAN 免疫BALB/c小鼠 ,经杂交瘤技术制备 ,用细胞凝集、间接免疫荧光筛选 ,用ELISA、Westernblot、酶处理红细胞的间接免疫荧光标记鉴定。结果 获得抗GPAN 单克隆抗体 6A8杂交瘤细胞系。其单抗属lgG3亚类 ,λ型轻链 ,识别和结合GPAN 氨基端 1~ 8位决定位点 ,对糖链依赖。流式细胞分选结果显示 6A8特异结合二甲亚胺固定的人MN和N型红细胞。结论 对分析由于基因突变和糖基化变异所致N ,MN红细胞GPAN 突变有理论研究和应用价值。毛建平 董燕 刘斌 孙志贤 2000中国生物制品学杂志2000,13,4:0
5检测M、N血型抗原的双位点一步ELISA方法的建立显示文摘目的 建立一种特异性强、灵敏度高的检测MN抗原的新方法。方法 应用抗M、抗N及抗血型糖蛋白A单克隆抗体 ,建立双位点一步ELISA法。结果 检测M、N抗原的最适pH值分别为 6 0及 7 5。适宜的反应温度为 2 0 30℃。利用表面活性剂l o n octyl β D glucopyranoside(OBG)浸泡血痕 ,可明显提高ELISA法检测陈旧血痕中N抗原的灵敏度 ,检测微量液体血和新鲜血痕的灵敏度分别为 0 .0 3μg血液和 0 .0 1~0 .0 5 μg干血。 结论 该法特异性强、灵敏度高 。鲍蕾 张健 段薇 郑剑玲 张秀梅 2000中国生物制品学杂志2000,13,3:0
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