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| 1 | 两株棉铃虫胚胎新细胞系的建立及其对杆状病毒侵染的反应显示文摘昆虫细胞系的建立在病毒学和昆虫学等领域的研究和应用中发挥着重要的作用。本研究由棉铃虫Helicoverpa armigera胚胎组织建立了两株细胞系,分别命名为QB-Ha-E-1和QB-Ha-E-5,在含10%胎牛血清的TNM-FH培养基中已传代60余代。两株细胞系均以圆形和短梭形细胞为主。DAF鉴定结果表明,两株细胞系均来源于棉铃虫胚胎,其扩增谱带与其他几种昆虫细胞系明显不同;QB-Ha-E-1和QB-Ha-E-5的第30代细胞群体倍增时间分别为63.7h和66.9h。两株细胞系均能被棉铃虫核型多角体病毒(HaSNPV)感染,4d的感染率分别为86.6%和56.5%,对甘蓝夜蛾Mamestra brassicae核型多角体病毒(MbNPV)7d的感染率均为15%左右,但对苜蓿银纹夜蛾Autographacalifornica核型多角体病毒(AcMNPV)侵染的反应不同。DAPI染色和基因组DNA电泳结果表明,AcMNPV可诱导QB-Ha-E-5细胞发生凋亡,极少数细胞内可形成多角体,但不能诱导QB-Ha-E-1细胞发生凋亡,其感染率为55.3%;两株细胞系均可被1.25μg/mL的放线菌素D诱导发生凋亡。两株细胞系具有相同的遗传背景,但对AcMNPV侵染的反应不同,可作为昆虫病毒和细胞之间相互关系以及细胞凋亡机制研究的理想材料。 | 郑桂玲 李长友 周洪旭 李淑文 李国勋 薛明 | 2010 | 昆虫学报2010，53，2： | 6 |
| 2 | 条件培养基对昆虫细胞BTI-Tn5B1-4及克隆株特性的影响显示文摘研究了条件培养基对细胞BTI-Tn5B1-4及其克隆株特性的影响。用含20%条件培养基以2×105cells/ml浓度测定细胞生长曲线,并与新鲜培养基作比较。结果显示,含条件培养基的细胞培养中的最大浓度比对照培养基的浓度高,同时细胞群体倍增时间比对照培养基中缩短3~5小时。当用野生型病毒AcMNPV感染时,两种培养基中细胞敏感性均在93%以上,OB产量差异不显著。重组蛋白半乳糖苷酶和碱性磷酸酶表达量测定比较,结果显示条件培养基中两种重组蛋白表达量均比对照培养基中高大约10%。 | 崔英伟 李长友 李国勋 | 2010 | 青岛农业大学学报(自然科学版)2010，27，2： | 2 |
| 3 | 昆虫细胞BTI-Tn-5B1-4和Sf-9的无血清培养及其特性研究显示文摘本研究对目前应用最多的两种昆虫细胞BTI-Tn-5B1-4和Sf-9在无血清培养基Sf-900Ⅲ中进行驯化和培养,现已稳定传至45代以上。比较了两种细胞在Sf-900Ⅲ和有血清培养基TNM-FH中的细胞形态、生长速率、病毒产量和重组蛋白表达水平。结果表明,在Sf-900Ⅲ中Sf-9细胞比TNM-FH培养的略大,BTI-Tn-5B1-4的圆形细胞增多,BTI-Tn-5B1-4和Sf-9在Sf-900Ⅲ中生长速度快,群体倍增时间分别为18.5h和21.7h,而在TNM-FH中,BTI-Tn5B1-4和Sf-9的群体倍增时间分别为21.9h和25.4h;在两种培养基中BTI-Tn-5B1-4和Sf-9细胞的病毒感染率、多角体产量和β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的表达水平均无明显差异,而碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)在Sf-900Ⅲ中的表达水平明显高于TNM-FH中的水平。 | 李银花 郑桂玲 李长友 马明 李国勋 | 2009 | 青岛农业大学学报(自然科学版)2009，26，2： | 1 |
| 4 | 柑橘凤蝶细胞克隆株RIRI-PX1-C24的生物学及重组蛋白表达特性显示文摘【目的】研究柑橘凤蝶Papilio xuthus细胞系RIRI-PX1的单细胞克隆株RIRI-PX1-C24的生物学和重组蛋白表达特性。【方法】用野生型苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(wild-type Autographa californica multiple nucleopolyhedrosis virus, wt-AcMNPV)侵染RIRI-PX1-C24与RIRI-PX1,检测细胞对野生型病毒的敏感性;使用重组绿色荧光蛋白杆状病毒(AcMNPV-GFP)、重组β-半乳糖苷酶杆状病毒(AcMNPV-Gal)以及重组分泌型碱性磷酸酶杆状病毒(AcMNPV-SEAP)分别侵染细胞系RIRI-PX1-C24和RIRI-PX1,在之后的24, 48, 72, 96, 120, 144和168 h检测3种重组蛋白的表达量;通过简单重复序列区间(inter simple sequence repeat, ISSR)标记比较RIRI-PX1-C24与RIRI-PX1的遗传相似性。【结果】亲本细胞系RIRI-PX1和克隆株RIRI-PX1-C24均能被wt-AcMNPV侵染,其中RIRI-PX-C24对wt-AcMNPV的敏感性较RIRI-PX1有显著提高。3种重组蛋白均能在2个细胞系中表达,其中重组绿色荧光蛋白在RIRI-PX1-C24中的表达水平远高于在亲本细胞系RIRI-PX1中的表达水平,但重组β-半乳糖苷酶蛋白和重组分泌型碱性磷酸酶蛋白在RIRI-PX1-C24中的表达水平较在RIRI-PX1中的无显著提高。用10条ISSR引物进行的RIRI-PX1-C24和RIRI-PX1 2个细胞系的指纹图谱分析中,4条引物扩增条带在这2个细胞系间存在差异;2个细胞系的遗传相似性范围在0~83.33%之间,说明克隆株及其亲本细胞系在基因型上存在差异。【结论】通过对柑橘凤蝶细胞系RIRI-PX1进行单细胞克隆,确实获得了使重组绿色荧光蛋白表达水平有显著提高的克隆株RIRI-PX1-C24,其利用价值仍需进一步的研究。 | 孙娜 丁伟峰 刘志刚 张欣 李娴 冯颖 | 2019 | 昆虫学报2019，62，3： | 0 |
| 5 | 杆状病毒P35蛋白抗凋亡作用机制及应用展望显示文摘P35蛋白是由杆状病毒入侵宿主细胞后自身编码的具有抗细胞凋亡活性的蛋白。P35蛋白能在哺乳动物、昆虫和线虫中抑制细胞的凋亡,是一种广泛有效的凋亡抑制因子。研究表明,P35蛋白通过与凋亡途径中的保守成分caspases结合并相互作用从而抑制caspases的活性而起作用。人类也存在类似的P35基因,其编码的P35蛋白具有独特的功能。P35蛋白的抗凋亡作用已开始被科学家们逐渐应用于生物、医学等领域,成为一个应用前景广泛的重要蛋白。 | 周仲春 卢汀 丁显平 | 2006 | 中国优生与遗传杂志2006，14，9： | 0 |
| 6 | 三株烟草天蛾新细胞系的生长特性及重组蛋白表达显示文摘从尚未涉及的昆虫种类中建立新的细胞系能为基础研究和生物技术应用提供重要资源。本实验通过细胞培养技术,建立了3株来源于鳞翅目昆虫烟草天蛾Manduca sexta卵组织的新细胞系,分别命名为QB-Ms1-8,QB-Ms2-2和QB-Ms2-7。这3株细胞已经培养在TNM-FH培养基中,28℃条件下传代培养了约50代,大部分细胞呈梭形,细胞群体倍增时间分别为51,31和49h。虽然这3株细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV)不够敏感,侵染后96h感染率在33%~40%之间,但是QB-Ms2-2细胞与BTI-Tn5B1-4细胞比较,分泌型碱性磷酸酶(SEAP)活性表达更高。本研究从建立的3株烟草天蛾新细胞系中筛选出SEAP高表达的细胞系QB-Ms2-2,为进一步细胞克隆和筛选提供了新资源。 | 姜磊 李国勋 李长友 Robert R.GRANADOS Gary W.BLISSARD | 2010 | 昆虫学报2010，53，11： | 0 |
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