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1Sonic hedgehog protein promotes bone marrow-derived endothelial pro-genitor cell proliferation,migration and VEGF production via PI 3-kinase/Akt signaling pathways显示文摘瞄准:调查声音的刺猬(嘘) 的效果骨髓上的蛋白质 -- 表明小径的导出的内皮祖先房间(BM-EPC ) 增长,迁居和脉管的内皮生长因素(VEGF ) 生产,和潜力在这些包含了效果。方法:骨头导出髓的 Flk-1 (+) 房间从成年 Kunming 鼠标用 MACS 系统被充实然后 BM-EPC 在明胶涂的培养皿是有教养的。BM-EPC 增长上的嘘 N 终端肽的效果用 MTT 比色测定被评估。细胞移行是用一种修改 Boyden 房间技术的 assayed。VEGF 的生产被 ELISA 和免疫萤光分析决定。表明小径的 PKC 和 PI3K 的潜在的参与用选择禁止者或西方的污点被探索。结果:在 BM-EPC 的增长,迁居和 VEGF 生产能被内长的嘘 N 终端肽在 0.1 microg/mL 的集中提升到 10 microg/mL,并且能被反嘘抗体禁止。在 BM-EPC 的调停嘘的增长和移植能被 anti-VEGF 部分稀释。在最新分开的 BM-EPC 的 Phospho-PI3-kinase 表示是低的,并且外长的嘘 N 终端肽什么时候被增加,但是能被 anti-human/mouse 嘘 N 终端肽抗体稀释,显著地增加了。而且, PI3-kinase 的禁止者,然而并非 PKC 的禁止者,显著地禁止了调停嘘的增长,迁居和 VEGF 生产。结论:嘘蛋白质罐头 stimulate 骨头导出髓的 BM-EPC 增长,移植和 VEGF 生产,它可以把 neovascularization 提升到是化学家纸巾。这也结果建议表明小径的 PI3-kinase/Akt 涉及嘘的 angiogenic 效果。Jin-rong FU Wen-li LIU Jian-feng ZHOU Han-ying SUN Hui-zhen XU Li LUO Heng ZHANG Yu-feng ZHOU 2006Acta Pharmacologica Sinica2006,27,6:7
2Sonic hedgehog信号通路对AGM区来源的成血-血管细胞增殖、迁移和分化作用显示文摘目的探讨 Sonic hedgehog(shh)信号通路对小鼠主动脉-中肾-肾上腺(AGM)区来源的成血-血管细胞增殖、分化和迁移的影响。方法联合应用抗小鼠 CD34、Flk1单克隆抗体(单抗)的磁珠,从孕11 d BALB/c 鼠胚胎 AGM 区分离培养成血-血管干细胞,并同时培养 AGM 区来源基质细胞,用流式细胞术对所分离细胞进行表型鉴定。用免疫组织化学法检测基质细胞表达 Shh 蛋白的情况;借助 Transwell 细胞共培养体系,观察在 AGM 的基质细胞共培养体系中,不同浓度的 Shh 活性肽及其单抗对成血-血管干细胞增殖、细胞周期、迁移及向内皮细胞定向分化的影响。结果 AGM 区基质细胞高表达 Shh 蛋白(阳性率高达90%以上),并可促进成血-血管干细胞增殖,其增殖效应可被10.00 μg/mlShh 单抗阻断;0.10~10.00 μg/ml 外源性 Shh 活性蛋白与 AGM 区基质细胞共培养的成血-血管干细胞,可使成血-血管干细胞长时间增殖,并促进细胞迁移,但并不诱导细胞凋亡与分化;而当0.10~10.00 μg/ml 外源性 Shh 活性蛋白作用于单独培养的成血-血管干细胞,细胞经过短时间增殖后,随后发生凋亡并向内皮细胞分化。结论 Shh 信号通路参与了成血-血管干细胞的增殖、分化、凋亡及迁移等生物学特性的调控,但其具体作用存在时空的差异,AGM 区微环境对 Shh 信号通路具有整合和调试的作用。付劲蓉 刘文励 周剑锋 孙汉英 冉丹 郑邈 罗莉 张恒 周玉峰 2007中华血液学杂志2007,28,11:4
3体外诱导人类诱导性多能干细胞分化为造血干/祖细胞的研究显示文摘本研究探讨体外诱导人诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)分化为造血干/祖细胞的能力。在体外用小鼠骨髓基质细胞OP9与人类iPSC共培养的方法,将iPSC诱导分化为造血干/祖细胞;用流式细胞术检测造血干/祖细胞表面标志物的表达水平;用实时定量PCR检测分化过程中iPSC及造血干/祖细胞的相关基因mRNA表达水平的变化;用免疫磁珠法分离CD34+造血干/祖细胞并进行半固体集落形成实验检测细胞的集落形成能力。结果表明,iPSC与OP9细胞共培养诱导造血分化的第4天即可观察到iPSC形态变化;流式细胞术检测显示,分化得到的细胞表达已知的造血干/祖细胞相关表面标志物CD34和CD43分子。在体外分化过程中多能性的标志基因Oct4的表达逐渐下降,造血相关转录因子Gata-2的表达逐渐升高,而Runx-1的表达量则呈波浪式变化,CD34表达量逐渐升高。集落培养14 d能够得到红系集落(CFU-E),粒系集落(CFU-G),巨核系集落(CFU-M),粒-巨核系集落(CFU-GM)和混合系集落(CFU-GEMM)。结论:iPSC细胞能够在体外通过与OP9细胞共培养分化为造血干/祖细胞。张坤 黄可 李栋 潘光锦 汪运山 2014中国实验血液学杂志2014,22,1:2
4人脐血源基质细胞移植重建造血微环境促进巨核细胞生成的实验研究显示文摘目的探讨人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)移植重建裸鼠造血微环境对巨核细胞生成的促进作用。方法取63只雌性BALB/c-nu/nu裸鼠,经5.0Gy60Coγ射线照射后,随机分为对照组、人骨髓基质细胞(hBMSCs)组和hUCBDSCs组(n=21),分别输注生理盐水、hBMSCs(1×105/只)和hUCBDSCs(1×105/只),观察移植后1、3、5、7、10、14、21d裸鼠血小板计数(PLT)变化,以及移植后1、7、14、21d的巨核细胞数、类成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)、骨髓象和骨髓病理组织变化。结果3组裸鼠移植后PLT、巨核细胞和CFU-U计数均降低(P<0.05),其中hUCBDSCs组裸鼠以上3个指标降低程度最轻(P<0.05),且恢复速度优于hBMSCs组和对照组(P<0.05)。hUCBDSCs组移植后骨髓抑制程度减轻,所有裸鼠均健康存活。结论hUCBDSCs具备修复造血微环境、促进巨核细胞增殖和血小板生成的作用,输注hUCBDSCs可作为一种安全有效的促进放/化疗或造血干细胞移植后血小板数量和功能恢复的方法。高蕾 张曦 陈幸华 张诚 高力 冯一梅 龚奕 彭贤贵 梁雪 郝磊 王庆余 2009解放军医学杂志2009,34,3:1
5不同造血微环境对诱导人胚胎干细胞向造血细胞分化的影响显示文摘目的:通过观察人卵黄囊基质细胞、人胎肝基质细胞和人胎骨髓基质细胞对人胚胎干细胞向造血细胞分化诱导效率,探讨不同造血微环境对造血发生的影响。方法:本实验诱导人胚胎干细胞分化为造血细胞的方法采用两步法:先用细胞因子培养形成5d的拟胚体,然后再模拟体内造血发生的微环境,分别用人卵黄囊基质细胞、人胎肝基质细胞和人胎骨髓基质细胞诱导拟胚体10d,通过流式细胞术检测细胞的flk,CD34和CD45表面抗原表达情况,观察3种基质细胞对人胚胎干细胞向造血细胞分化的影响。结果:5d拟胚体与卵黄囊基质细胞接触培养10d生成的细胞表达flk,CD34,CD45百分率分别1.80%±0.56%,1.30%±0.14%,1.05%±0.63%;与胎肝基质细胞接触培养10d生成的细胞表达为flk,CD34,CD45百分率分别为34.0%±25.45%,38.4%±24.8%,72.6%±25.7%;与骨髓基质细胞接触培养10d生成的细胞表达flk,CD34,CD45百分率分别为2.50%±1.48%,3.20%±0.56%,1.65%±0.21%;5d拟胚体自发分化10d生成的细胞表达flk,CD34,CD45百分率分别为0.30%±0.07%,0.65%±0.07%,0.15%±0.07%。与自发分化10d比较,3种基质细胞与5d拟胚体接触培养,均能够促进拟胚体向造血细胞的分化,且胎肝基质细胞诱导的效率显著优于其他两种基质细胞(P(0.05)。结论:与卵黄囊基质细胞和骨髓基质细胞比较,胎肝基质细胞更有利于诱导人胚胎干细胞向造血细胞的分化。赵惠萍 赵海军 林戈 周菂 刘天成 卢光琇 2007中南大学学报(医学版)2007,32,6:1
6γ射线对小鼠主动脉性腺中肾区基质细胞氨基肽酶N/CD13活性的影响显示文摘目的探讨小鼠主动脉性腺中肾(AGM)区基质细胞氨基肽酶N/CD13(APN/CD13)的表达和放射损伤前后该酶活性的变化及意义。方法采用免疫组织化学染色、RT-PCR检测AGM区基质细胞APN/CD13的表达;^60Coγ射线8.0Gy照射细胞,在不同的时间点用分光光度计检测APN/CD13的酶活性。结果AGM区基质细胞APN/CD13呈强阳性表达;放射损伤后酶活性呈一过性降低,继而升高,4h达高峰,24—48h基本恢复至照射前水平。结论APN/CD13在AGM区基质细胞上呈强阳性表达;在放射损伤后酶活性增高,可能是促进造血功能恢复的一种代偿机制。朱艳 黄丽芳 罗小华 孙汉英 冉丹 张可杰 郑邈 周琨 刘文励 2007中华放射医学与防护杂志2007,27,4:1
7两种条件培养基促进鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞(英文)显示文摘目的:从鼠胚胎干细胞获得具有造血重建功能的造血干细胞。方法:将ES-D3细胞形成4天拟胚体(4dEBs),再用骨髓内皮细胞条件培养液(mBMEC-CM)和/或胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM)诱导4dEBs生成造血干细胞。实验为mBMEC-CM+FLSC-CM组、mBMEC-CM组、FLSC-CM组,对照组。检测诱导生成的细胞造血干细胞特异抗原表达、造血相关基因表达、造血集落的形成以及造血重建能力。结果:从诱导ES-D3细胞生成造血干/祖细胞的数量和生成的集落总数看,mBMEC-CM+FLSC-CM组诱导效率显著高于其他3组。mBMEC-CM+FLSC-CM组诱导生成的细胞能重建照射鼠的造血系统。结论:骨髓内皮细胞条件培养液联合胎肝基质细胞条件培养液可促进鼠胚胎干细胞分化为具有造血重建能力的造血干细胞。赵惠萍 卢光琇 王绮如 2007中南大学学报(医学版)2007,32,1:1
8Irradiation Injury Temporarily Induces Enhancement of APN/CD13 Peptidase Activity on Aorta-gonads-mesonephros (AGM)-derived Stromal Cells显示文摘This study was designed to investigate the expression of aminopeptidase N (APN)/CD13 on intraembryonic AGM stromal cells, and the change of its enzymatic activity after irradiation injury. The expression of APN/CD13 on AGM stromal cells was assayed by RT-PCR and immunihistochem- istry. After the stromal cells in AGM region were irradiated with 8.0 Gy of 60Co γ-rays, APN/CD13 enzymatic activity was measured by spectrophotometer at different time points. The result showed that AGM stromal cells strongly expressed APN/CD13. The enzymatic activity of APN/CD13 de- creased temporarily after irradiation injury, then increased to higher level 4 h after irradiation, and it returned to the pre-irradiation level 24 to 48 h after the irradiation. The enzymatic activity of APN/CD13 was temporarily enhanced after irradiation injury, which might be one of the compensa- tory mechanisms that promote the hematopoietic recovery after irradiation.朱艳 黄丽芳 罗小华 孙汉英 冉丹 张可杰 郑邈 周琨 刘文励 2007Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)2007,27,2:0
9拟胚体对成体细胞参与胚胎嵌合的影响显示文摘试验尝试构建成体细胞同小鼠早期胚胎的嵌合共生胚胎。取成年人皮肤组织的成纤维细胞,慢病毒转染皮肤成纤维细胞标记EGFP荧光蛋白,同小鼠早期8-细胞胚胎进行嵌合。结果显示慢病毒高效标记人皮肤成纤维细胞表达EGFP荧光蛋白,通过皮肤成纤维细胞与小鼠胚胎干细胞形成的拟胚体环境作用后,皮肤成纤维细胞成功与小鼠胚胎形成嵌合胚,嵌合囊胚形成率为38.08%,表达EGFP荧光蛋白的皮肤成纤维细胞能够嵌合到小鼠胚胎的不同部位。嵌合胚在胚胎干细胞分离培养环境下进行培养,嵌合到小鼠内细胞团的皮肤成纤维细胞参与小鼠内细胞团的组成,参与小鼠内细胞团组成的胚胎占嵌合胚比率为1.74%。小鼠胚胎干细胞拟胚体环境作用可以成功介导人皮肤成纤维细胞同小鼠早期胚胎形成嵌合共生体系。曹鸿国 李运生 曲秀霞 邓宏魁 2008中国农学通报2008,24,9:0
10人主动脉-性腺-中肾区基质细胞诱导胚胎干细胞分化为造血干细胞及体内造血重建显示文摘背景:研究证实多种造血生长因子、基质细胞饲养层及其条件培养液可促进胚胎干细胞向造血干细胞分化。目的:以人主动脉-性腺-中肾(aorta-gonad-mesonephros,AGM)区基质细胞为饲养层体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为造血干细胞,并比较不同移植途径对造血干细胞体内造血重建能力的影响。方法:将小鼠E14胚胎干细胞诱导为拟胚体,采用Transwell非接触共培养体系在人AGM区基质细胞饲养层上诱导6d,接种NOD-SCID小鼠检测体内致瘤性。再将诱导后的拟胚体细胞移植经致死量60Coγ射线辐照的BALB/C雌鼠,受鼠随机分为静脉移植组、骨髓腔移植组、照射对照组及正常对照组。结果与结论:拟胚体细胞经人AGM区基质细胞诱导后Sca-1+c-Kit+细胞占(13.12±1.30)%。NOD-SCID小鼠皮下接种经人AGM区基质细胞诱导的拟胚体细胞可出现畸胎瘤,经骨髓腔接种未见肿瘤形成。静脉移植组动物全部死亡,骨髓腔移植组生存率为55.6%,移植后21d外周血象基本恢复,存活受鼠检测到供体来源Sry基因。提示小鼠胚胎干细胞经人AGM区基质细胞诱导分化的造血干细胞通过骨髓腔移植安全并具有一定的造血重建能力。蔡耘 张绪超 陈惠芹 黄绍良 2011中国组织工程研究与临床康复2011,15,36:0
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