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12009-2010年黑龙江中俄边境口岸鼠类动物中汉坦病毒分子流行情况调查及分析显示文摘目的研究黑龙江省中俄边境6个口岸鼠类动物的种类和携带汉坦病毒情况及病毒基因分型,为口岸防控肾综合症出血热提供科学依据。方法采用夹夜法和鼠笼法捕获鼠类,荧光定量PCR(TaqMan探针法)对鼠肺标本进行检测。结果此次调查共捕获鼠类动物295只,经鉴定隶属3科8属10种,其中黑线姬鼠为优势种群,占42.37%。检测出汉坦病毒核酸阳性鼠肺标本22份,鼠总带毒率为7.46%,其中,汉滩型15份,汉城型共7份。在调查的6个口岸中逊克、抚远、黑河、东宁和绥芬河5个口岸发现了汉坦病毒核酸阳性标本。结论本次共调查黑龙江省中俄边境6个口岸,其中有5个口岸发现了汉坦病毒核酸阳性标本,北部边境逊克、抚远和黑河3个口岸均发现了汉坦病毒核酸阳性标本,东部边境东宁、绥芬河、牡丹江3个口岸中东宁和绥芬河发现了汉坦病毒核酸阳性标本,黑龙江省口岸肾综合症出血热防控形势依然严峻。侯咏 李大鹏 刘宇鹏 鞠文东 程成 高丹凝 富英群 赵亚双 2012中国国境卫生检疫杂志2012,35,3:2
2汉坦病毒的基因分型及其序列分析显示文摘为了探讨从核苷酸水平耐汉坦病毒进行分型,设计两对型特异性引物,采用反转录和聚合酶链式反应(RT-PCR),对亚太地区18株汉坦病毒进行了扩增鉴定,并对其中7株汉坦病毒的PCR产物进行了测序分析。PCR的分型结果表明,Ⅰ型引物只能扩增血清Ⅰ型病毒的cDNA;Ⅱ型引物也只能扩增血清Ⅱ型病毒,其间无交叉反应。采用巢式PCR和限制性内切酶验证了PCR产物的特异性。序列分析结果表明,R36M片段G1区的核苷酸序列与血清Ⅰ型病毒代表株76-118的同源性为78.4%,而与血清Ⅱ型病毒R22的同源性为68.1%;R36与汉坦病毒序列同源性的成对比较结果也表明,R36与血清Ⅰ型病毒的同源性均高于血清Ⅱ型病毒;Leakey虽然能被Ⅱ型引物扩增,但其序列与血清Ⅱ型病毒R22的同源性仅为44.9%,故不属于血清Ⅱ型病毒。上述研究结果表明,反转录聚合酶链反应能对多数汉坦病毒准确分型,但最终结果尚有赖于序列分析。孙永涛 白雪帆 杨为松 黄长形 周永兴 1996中国病毒学1996,11,4:2
3逆转录-聚合酶链反应对肾综合征出血热早期的诊断显示文摘为了选择更为敏感,特异,快速的肾综合征出血热(HFRS)的诊断方法。我们建立了碘化钠—异流氰酸胍—氯仿法提取汉坦病毒(HV)核酸(RNA)用于逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同病型HFRS患者一周内血清中HV-RNA且与酶联免疫吸附法(ELISA)检测HFRS-IgM进行比较。45例HFRS患者血清中HV-RNA阳性率为82.2%,其中轻、中、重型阳性中分别为75%,78.5%,86.9%。HFRS-IgM阳性率55.5%,其中轻、中、重型阳性率分别为37.5%,50.0%,65/2%。RI-PCR法检出率高于ELISA法,差别有显著性。RT-PCR法和ELISA法均可以用于HFRS的早明诊断。但前者更为敏感。毛琳 申元英 李向群 李宗山 杨占秋 邱雨石 1999基础医学与临床1999,19,6:1
4RT-PCR技术在流行性出血热病毒分型诊断中的应用显示文摘目的 运用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)技术对流行性出血热 (EHF)病人标本进行研究 ,以建立一项有效的 EHF病毒分型诊断方法。方法 收集发病 10 d以内的早期 EHF病人血浆、外周血单个核细胞 (PBMC)、尿沉淀细胞。采用异硫氰酸胍 -酚 -氯仿一步抽提各种标本的总RNA。两对特异性引物分别互补于汉滩病毒 ( 型 )及汉城病毒 ( 型 ) M基因片段的 G1区。分别在两对引物的正链引导下反转录合成特异性 c DNA,用相应的引物对进行 PCR扩增。产物经琼脂电泳 ,标准分子量对照鉴定。同时以 Vero- E6细胞及鼠脑传代的标准病毒株进行阳性对照 ,以正常人血浆作阴性对照。结果 19例病人的 30份标本均能被 I型或 型引物扩增出特异性产物 ,其中I型阳性 13例 , 型阳性 4例 ,I、 型同时阳性 2例 ,同一病人的不同标本结果一致。结论 标准病毒株 RT-张淑玲 郑曲波 曾令兰 2000临床内科杂志2000,17,4:0
5汉坦病毒R36株的基因分型研究显示文摘采用汉坦病毒M片段特异性核苷酸分型引物,对R36等7株汉坦病毒进行反转录和聚合酶链式反应扩增鉴定,结果R36株仅能被Ⅰ型分型引物扩增出特异性片段,而不能被Ⅱ型引物扩增;PCR产物的序列分析结果表明,R36与HTN型病毒76-118株的同源性为78.4%,与SEO型病毒R22株的同源性为68.1%。文中对R36与汉坦病毒其它毒株的核苷酸同源性进行了配对比较。该项研究为从核苷酸水平对R36株的分型,提供了科学依据。孙永涛 白雪帆 黄长形 李光玉 张文彬 周永兴 杨为松 1996中华微生物学和免疫学杂志1996,16,3:0
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