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1组织工程皮肤种子细胞的同期快速分离显示文摘目的寻找一种快速可行的同期分离组织工程皮肤种子细胞——表皮细胞及成纤维细胞的方法。方法取手术切除包皮,利用型胶原酶结合胰蛋白酶消化法,同期分离表皮细胞及成纤维细胞,观察细胞形态。对表皮细胞及表皮干细胞行PAN-FITC、K19-FITC荧光免疫染色及K19流式细胞仪鉴定;对成纤维细胞行波形蛋白FITC免疫荧光鉴定。并分别对两种细胞培养7d,观察其生长情况。结果应用型胶原酶结合胰蛋白酶,在3h内快速分离得到表皮细胞及成纤维细胞,免疫荧光染色表皮细胞PAN-FITC染色均为阳性、K19-FITC染色部分阳性,流式细胞仪鉴定其K19阳性表达的细胞接近17%。表皮细胞培养48h开始呈克隆样增长,至7d生长停滞,向终末的角细胞分化。成纤维细胞体外培养7d可扩增100倍,波形蛋白FITC免疫荧光染色呈阳性。结论利用胶原酶结合胰蛋白酶消化法可在3h内同期分离到用于构建复合型组织工程皮肤的种子细胞,为复合组织工程皮肤的快速构建提供了可能。杨斌 洪清琦 徐令 丘日升 张琳 董月桐 2006中国修复重建外科杂志2006,20,7:10
2血管内皮细胞和成纤维细胞混合移植对人工真皮血管化的影响显示文摘目的观察同种血管内皮细胞和成纤维细胞移植对人工真皮血管化的促进作用。方法在27只Wistar大鼠背部造成2.5 cm×2.5 cm全层皮肤缺损创面(2处/只),将其分为血管内皮细胞组:将血管内皮细胞混入0.5 ml纤维蛋白胶中,按1.0×105/cm2的密度均匀喷洒于移植床;混合组:将血管内皮细胞和成纤维细胞混入等量纤维蛋白胶后,同前密度喷洒于移植床;对照组:按同样方法喷洒等量纤维蛋白胶。随后各组移植人工真皮,每组9只大鼠18处创面。于移植后5、10 d切取移植的真皮及周围组织行HE、血管内皮生长因子(VEGF)、Masson和墨汁灌注染色,观察新生血管生长情况。于移植后5 d行伊文思蓝灌注,以分光光度计定量检测法测定微血管形成情况。结果移植后5 d,HE、VEGF、Masson和墨汁灌注染色均可见各组移植床有新生血管长入。HE染色见血管内皮细胞组、混合组新生血管数量分别为(14.2±3.6)、(12.1±2.5)条,较对照组[(3.9±1.6)条]明显增多(P<0.05)。移植后10 d,人工真皮内及移植床均有微血管形成,且胶原组织的合成增加。移植后5 d,经伊文思蓝灌注,收集并检测血管内皮细胞组、混合组真皮组织溶出的上清液,吸光度值分别为0.167±0.058、0.155±0.046,均高于对照组的0.066±0.024(P<0.05)。结论同种血管内皮细胞和成纤维细胞移植可促进创面愈合过程中的血管新生,加速人工真皮移植后血管化过程,促进类真皮组织的成熟。陈欣 副岛一孝 野崎斡弘 2006中华烧伤杂志2006,22,6:8
3复合型组织工程皮肤的体外快速构建显示文摘目的寻找一种体外快速构建复合型组织工程皮肤的方法,为大面积烧伤、创伤创面的覆盖提供足够的自体皮源。方法取人的包皮,进行表皮细胞及成纤维细胞的分离鉴定及体外培养扩增,对表皮细胞群行广谱角蛋白抗体-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)、角蛋白19(cytokeratin19,K19)-FITC免疫荧光染色及K19流式细胞仪鉴定;对成纤维细胞行波形蛋白-FITC免疫荧光鉴定。将表皮细胞接种于异体脱细胞真皮(acellular dermalmatrix,ADM)乳头面,于气-液平面培养构建表皮层,实验分两组进行,实验组培养基中添加25ng/ml角化细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF),对照组不添加。6d后,接种成纤维细胞于两组ADM的另一面,继续培养24h。收集构建的组织工程皮肤,切片行苏木素-伊红染色,观察所构建皮肤的镜下结构,并对比添加KGF对其影响。结果免疫荧光染色培养扩增的表皮细胞群广谱角蛋白抗体-FITC染色均为阳性、K19-FITC染色部分阳性,流式细胞仪鉴定其中K19阳性表达的细胞接近17%。成纤维细胞体外培养7d可扩增超过100倍,波形蛋白-FITC免疫荧光染色呈阳性。经过7d的体外培养构建,可以得到复合型皮肤,经苏木素-伊红染色镜下观察显示,实验组表皮层连续,形成细胞层数2-3层的复层结构,真皮中含有成纤维细胞;对照组表皮层不连续,细胞层数少,两组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。结论利用胶原酶结合胰蛋白酶消化法进行种子细胞的分离,应用添加KGF的条件培养基,采用分步接种构建的方法,可在7d内构建出复合型组织工程皮肤。杨斌 洪清琦 丘日升 张琳 董月桐 2007中国修复重建外科杂志2007,21,4:4
4烧伤皮肤替代物研究进展显示文摘对于烧伤引起的大面积皮肤缺损来说,使用理想的皮肤替代物尽早封闭、修复缺损皮肤是非常重要的。多年来人们研制和应用了多种生物皮肤替代物和人工合成皮肤替代物用于烧伤创面的暂时性或永久性的覆盖,并取得了很大的成就。本文就烧伤皮肤替代物的研究进展进行综述,并对目前存在的问题和未来研究方向进行介绍。郭海雷 方林森 2007安徽医药2007,11,5:3
5皮肤替代物的过去、现在和未来显示文摘皮肤是人体最大的器官,也是人体抵御外部环境的第一道防线,具有保护、分泌、排泄、感觉及免疫等功能[1]。当皮肤受到高温、化学、感染和创伤等物理、化学及机械因素损伤时,人体的体表防线被破坏,环境中的微生物可侵入人体造成致命的感染,体内的水、电解质及营养物质丢失也会对人体形成严重威胁。全层皮肤损伤超过一定面积后很难通过表皮组织的增殖爬行修复创面,往往需进行自体皮肤移植,造成供皮区的损伤和痕迹。谢卫国 2022中国医刊2022,57,12:1
6桃红四物丸促兔自体皮片移植术后不同时限VEGF表达的研究显示文摘目的:研究桃红四物丸对兔自体厚中厚皮片移植术后3个不同时限皮片成活的影响。方法:将60只新西兰大白兔随机分为两组,均进行皮片移植手术造模,治疗组予桃红四物丸灌胃治疗,对照组予等容积蒸馏水灌胃。通过免疫组化染色的方法,观察两组术后5d、8d和14d皮片VEGF的表达情况,并进行比较。结果:治疗组在术后5d、8d和14d均有较高的VEGF积分光密度值,其在3个时限的值均高于对照组(P<0.05)。两组内3个时限比较,VEGF的积分光密度值在术后14d达最高值(P<0.05)。结论:桃红四物丸对兔自体厚中厚皮片移植术后皮片VEGF的表达有促进作用,且在术后14d的作用最明显。孙绍裘 李益亮 陈孟交 陈希龙 张德生 2013湖南中医杂志2013,29,3:1
7组织工程血管化研究进展显示文摘理想的组织工程组织或器官需要有足够的微循环结构来保证其存活,缺乏足够的血管网是组织工程组织发展相对落后的主要原因之一,也是商品化组织工程产品临床应用效果不太理想的关键因素之一。目前,组织工程血管化在支架材料的改进、细胞和生长因子应用领域方面已取得较大进展,现就这3个热门方向的研究进展及存在的问题进行综述。石海飞 韩春茂 张莉萍 王新刚 2008中华烧伤杂志2008,24,4:1
8组织工程皮肤的血管化策略和未来方向显示文摘皮肤组织工程是修复重建外科中快速发展且相对成熟的领域,通过人造皮肤替代物的植入,能促进伤口快速愈合,防止体液丢失和感染。然而目前尚无具备完整生物学性能的完美人工皮肤产品,主要存在以下问题:缺乏皮肤附属结构如毛囊、皮脂腺及神经,生物相容性及生物力学性能欠佳、植入后无法快速血管化、感染、疤痕形成等,皮肤移植后的早期阶段营养物质供应及废物的排泄问题。所以快速血管化是组织工程皮肤存活的关键,目前各项基础研究致力于组织工程皮肤的快速血管形成策略,从血管形成微环境出发,包括支架方面、细胞方面、基因方面及其他新兴技术,这里将对此类研究展开综述。黄声震 吕长胜 2020中国医疗美容2020,10,4:0
9铜绿假单胞菌对白念珠菌生物活性体外影响的研究显示文摘目的观察铜绿假单胞菌(PA)对白念珠菌(CA)标准株ATCC90028体外生物活性的影响。方法抑菌圈法了解50株PA对CA平板生长的抑菌作用,分别取抑菌作用明显和无抑菌作用的PA各3株菌的上清液作用于CA后镜下观察形态转换情况,96孔板半定量法(MTT)测定上述上清液对CA生物膜增殖的影响。结果 50株PA中有19株出现了明显的抑菌圈(19/50),但直径大小不等,镜下观察只有抑菌圈明显的3株上清液抑制了CA向菌丝相的转换,且能够阻碍生物膜的增殖(P<0.01),无抑菌圈的PA上清中也有一株出现阻碍生物膜增殖的作用(P<0.05)。结论部分PA菌株能够有效抑制体外CA的生物活性。孙念 黄青 陈曦 孔钦翔 叶英 许夕海 李家斌 2016中国抗生素杂志2016,41,10:0
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