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| 1 | 仔猪感染粪肠球菌的病原鉴定及病原特性初报显示文摘旨在对引起河南省三门峡某猪场肥育仔猪发病死亡的病原菌进行鉴定,并对其病原特性进行初步分析。用常规手段分离纯化可疑病原菌,观察其形态染色特性和培养特性,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并进一步检测分离菌株的明胶酶和溶血素等毒力因子表型及其药物敏感性。结果表明:①经细菌分离纯化,得到2个呈链状排列的G+球菌分离株,分别命名为HE1和HE2株。②经Vitek-32全自动细菌鉴定系统鉴定,2株分离菌均为粪肠球菌(E. faecalis)。③毒力因子表型试验表明,HE1和HE2均具有溶解明胶的能力,且能裂解兔红细胞,其中HE1呈现β型溶血,HE2呈现α型溶血。④动物试验表明,分离菌株对小鼠具有致死作用,其中HE1毒力更强。家兔对上述分离株具有一定耐受性,仅表现出临床症状但不死亡。⑤药敏结果显示分离菌对万古霉素、替考拉宁、利富平和氨苄西林敏感,对诺氟沙星、红霉素、卡那霉素和四环素耐药。粪肠球菌感染可以导致仔猪发病死亡,但不同的粪肠球菌分离株对动物的致死能力有差异。 | 王亚宾 陈丽颖 张红英 金钺 钱伟锋 邵仁东 崔保安 | 2008 | 中国农学通报2008，24，5： | 18 |
| 2 | 粪肠球菌生长曲线的测定及其对小鼠脑组织的影响显示文摘为测定致羔羊脑炎粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的生长曲线,寻求一种快速而准确的方法测定不同生长时期粪肠球菌数量,并客观评价其毒性强弱及其对小鼠脑组织的影响,试验采用平板菌落计数法和OD-Monitor振荡比浊法(Dλ值法)测定粪肠球菌的生长曲线,探究该菌在合适时间段内的吸光值(D600nm)与平板菌落计数法测定的活菌数(CFU)的关系。用粪肠球菌感染小鼠,观察记录小鼠的死亡情况,最后采用Karber法计算粪肠球菌感染小鼠的半数致死量(LD50)。用LD50的剂量感染小鼠,及时采集死亡小鼠脑组织,未死亡的小鼠72h后全部剖杀取脑组织,一部分做涂片染色,制作病理切片,观察病理变化;一部分进行培养,用于PCR方法进行细菌的回收鉴定。结果显示,用两种方法测定此株粪肠球菌的生长曲线基本一致,在2~8h生长迅速,为对数生长期,8~14h生长缓慢,为稳定期,14h之后死亡数增加,进入衰亡期;对12h粪肠球菌D600nm与CFU的关系进行探讨,成功建立回归方程:y=20.769x-1.3422,R2=0.997;其感染小鼠的LD50为7.77×1011个活菌。以此剂量感染小鼠,脑组织涂片染色和培养染色,均能看到革兰氏阳性球菌;PCR结果显示,均出现了大小为112bp的条带。对脑组织进行病理学观察发现该菌可导致脑组织充血、出血、形成微血栓,脑膜充血。通过生长曲线和其D600nm与CFU关系的建立,可实时监测粪肠球菌数量,为后期更深入研究粪肠球菌穿越血脑屏障的机制奠定重要的理论基础。 | 王蒙蒙 张莉 李慧 汪骁轩 魏殿华 高静雯 高建鹏 张华雷 齐亚银 | 2018 | 中国畜牧兽医2018，45，4： | 18 |
| 3 | 仔猪关节炎粪肠球菌生物学特性研究显示文摘从病猪肿大的跗关节中分离了1株疑似肠球菌菌株,经过常规方法进行染色特性、培养特性观察以及敏感性和致病试验,利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特定,并用PCR方法扩增分离株的16S rRNA基因克隆测序,与GenBank上登录的相关菌株及3个粪肠球菌标准菌株进行16S rRNA序列比较、同源性分析并构建系统发育树.结果表明,该分离株形态及染色特性与肠球菌一致,对仔猪具有一定的致病性,并对临床常用的7种药物产生了耐受性;Vitek-32生化鉴定和16S rRNA基因同源性分析及比对结果均显示其为粪肠球菌. | 王亚宾 张祥 胡清林 孟振北 陈丽颖 陈小丽 崔保安 | 2011 | 河南农业大学学报2011，45，2： | 10 |
| 4 | 新疆北疆地区猪源粪肠球菌的耐药性分析显示文摘为了解新疆北疆地区猪源粪肠球菌的耐药性及相关耐药基因型的分布情况,本试验采用K-B(Kirby-Baller)琼脂扩散法检测了49株猪源粪肠球菌对8种抗菌药物的敏感性,并采用PCR法对9种相关耐药基因进行检测并测序,测序结果与GenBank中的相应基因序列比对。药敏试验结果显示,分离菌对链霉素耐药率最高,其次为青霉素和红霉素,对呋喃妥因、氨苄西林高度敏感。PCR检测结果显示,β-内酰胺类耐药基因tem的检出率最高,为93.88%,其次是四环素类耐药基因tetM,为85.71%,喹诺酮类基因gyrA和parC检出率均为42.86%,氨基糖苷类耐药基因aph(3′)-Ⅲ、aac(6′)/aph2″和ant(6′)-Ⅰ的检出率分别为36.73%、16.33%和16.33%,未检出mefA和ermB基因。本试验从表型与基因型分析发现,北疆地区猪源粪肠球菌的多重耐药现象非常严重,且其耐药表型与基因型并不完全一致。 | 王蒙蒙 张子荣 欧都.吾吐那生 蒲敬伟 袁立岗 齐亚银 | 2018 | 中国畜牧兽医2018，45，5： | 10 |
| 5 | 应用16S rRNA基因序列分析鉴定猪源肠球菌显示文摘对河南省不同地区病猪分离的11株疑似肠球菌提取基因组DNA,PCR扩增16S rRNA基因片段,经克隆后测序,并与GenBank中注册的相关肠球菌菌株的16S rRNA基因序列进行比较、绘制系统发育树,进行鉴定。结果表明,4株临床分离株鉴定为粪肠球菌(E.faecalis),7株为屎肠球菌(E.faecium)。首次从分子水平上证实了猪肠球菌在河南省的存在,为临床诊断及分子鉴定提供依据。 | 程金平 王亚宾 刘磊 王珊 崔保安 | 2008 | 江西农业学报2008，20，11： | 9 |
| 6 | 一株致仔猪关节炎粪肠球菌的鉴定显示文摘对1株分离自关节炎病仔猪的肠球菌进行鉴定。选用常规方法进行染色特性、培养特性观察以及药物敏感性和致病试验,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并用PCR方法扩增分离株的16 S rRNA基因,克隆并测序,与GenBank上登录的相关菌株及3个粪肠球菌标准菌株进行16 SrRNA序列比较、同源性分析并构建系统发育树。结果显示,该分离株形态及染色特性与肠球菌一致,对仔猪具有一定的致病性,并对临床常用的7种药物产生了耐受性;Vitek-32生化鉴定和16 S rRNA基因同源性分析及比对结果均显示其为粪肠球菌(E.faecalis)。试验证实了粪肠球菌可导致仔猪关节炎。 | 王亚宾 胡清林 陈丽颖 程金平 陈小丽 崔保安 | 2010 | 动物医学进展2010，31，S1： | 9 |
| 7 | 致绵羊脑炎型肠球菌溶血素CylA基因的克隆及序列测定显示文摘以致绵羊脑炎型肠球菌(Enterococcus)染色体DNA为模板,PCR扩增溶血素CylA的结构基因,将PCR产物克隆于pMD19-T载体,对PCR产物进行测序鉴定。与已发表的肠球菌溶血素CylA基因序列比较,同源性达99.3%。 | 韩素娟 剡根强 周霞 王静梅 马贵军 | 2007 | 中国预防兽医学报2007，29，4： | 9 |
| 8 | 临床感染猪肠球菌菌株的分离与鉴定显示文摘对分离自河南洛阳、济源、许昌、南阳等地送检病猪内脏的42份革兰阳性球菌分离纯化,根据细菌形态学、培养特性和生长耐性试验结果,初步确定为肠球菌,采用V itek-32全自动细菌鉴定系统对其进行鉴定,共鉴定出了34株肠球菌.其中,粪肠球菌(Enterococcus faecalis)10株、屎肠球菌(E.faecium)2株、铅黄肠球菌(E.casselifla-vus)22株.另有8株未鉴定到种的水平. | 王亚宾 张红英 陈丽颖 程金平 刘磊 崔保安 | 2008 | 河南农业大学学报2008，42，5： | 8 |
| 9 | 肠球菌研究进展显示文摘肠球菌(Enterococcus)是革兰阳性、过氧化氢酶阴性球菌,是人和动物肠道内主要常存菌群。该菌可引起群体致病和医院交叉感染,临床上表现为尿路感染、菌血症、心内膜炎等,加之许多报道显示肠球菌对多种抗生素都有耐药性和具有较强的致病性,因此越来越受到人们的关注。论文从生物学特性、毒力因子、耐药性、流行病学、临床检测等方面对该菌的研究现状进行概述。 | 蒋伟 黎满香 林荣高 田世成 | 2011 | 动物医学进展2011，32，5： | 7 |
| 10 | 致动物脑膜炎粪肠球菌人工感染小鼠脑部模型的建立显示文摘为了构建粪肠球菌人工感染小鼠脑部损伤模型,以清洁级昆明小鼠为实验动物,将实验室保存的致羔羊脑膜炎粪肠球菌进行复苏,用寇氏法测定小鼠半数致死量(LD50),并以LD50剂量、1/2 LD50的剂量、2/3 LD50剂量感染小鼠,观察临床症状,选择2、4、8、12、24、36、48、60、72、84 h共10个时间点,无菌取其脑部、内脏组织进行细菌的分离鉴定,并观察病理组织学变化。结果显示,粪肠球菌的LD50为7.59×10^8CFU;感染小鼠后,其致死率1/2 LD50剂量组为3.7%,小于2/3 LD50剂量组的13.0%;1/2 LD50剂量组脑组织开始出现病理变化是在感染后12 h,晚于2/3 LD50剂量组(6 h),病理变化与后者相比较轻。结果表明,选择以2/3 LD50剂量为小鼠感染模型的最佳剂量。该动物模型的建立为进一步研究粪肠球菌感染小鼠导致脑炎奠定了基础。 | 李慧 王蒙蒙 李傲寒 高静雯 高健鹏 张华雷 张莉 齐亚银 | 2019 | 动物医学进展2019，40，8： | 5 |
| 11 | 猪源屎肠球菌致病力与耐药性及生物被膜形成能力的相关性分析显示文摘为研究猪源屎肠球菌的致病力与耐药性及生物被膜形成能力的相关性,本研究分别对9株猪源屎肠球菌进行动物试验、药敏试验和生物被膜形成能力的测定。结果显示有66.67%的菌株引起小鼠肝脏、脾脏出血等病变,并且其中部分菌株导致接种小鼠急性的高死亡率;9株屎肠球菌中KF-QX-1株耐药率最高为100%,其次为ZKXH01(95.24%)、NY01(90.48%)、NY-XY-4(80.95%)、SBLH(76.19%)、HUAX(71.43%)、NY-XY-1(71.43%)和ZHENGY(66.67%),耐药率低于50%的菌株只有JY02(14.29%);生物被膜检测结果显示9株菌中除NY01株外均有不同程度的的被膜形成能力,其中2株菌(JY02和NY-XY-1)生物被膜形成能力相对较强;通过对上述试验结果综合分析显示,肠球菌菌株对受试动物的致病力与其耐药性和生物被膜形成能力之间缺乏明显的相关性,但具有生物被膜形成及耐药两种特性会增强猪源肠球菌的耐药性和传播性,给人类和动物的疾病控制造成更大的威胁。 | 卢彩景 张秀平 陈陆 赵军 王新卫 敬文宪 常洪涛 刘红英 姚慧霞 王川庆 杨霞 | 2014 | 中国预防兽医学报2014，36，5： | 5 |
| 12 | 两种粪肠球菌的分离方法比较显示文摘本研究利用采集的鸡泄殖腔和猪肛门拭子样本400份,采用两种方法分离粪肠球菌并进行对比。结果显示,两种方法对4类样品中粪肠球菌的分离率分别为22%、33%、23%、22%(方法Ⅰ)和86%、91%、87%、82%(方法Ⅱ),说明建立了准确、高效、可靠的粪肠球菌分离方法。 | 韩镌竹 李欣南 苏葳艺 杨文腰 | 2015 | 现代畜牧兽医2015，，1： | 4 |
| 13 | 一株裂解性奶牛乳房炎源屎肠球菌噬菌体的分离及其生物学特性分析显示文摘从新疆石河子地区奶牛粪样中分离裂解性屎肠球菌噬菌体,对其进行纯化及生物学特性分析,为治疗和控制细菌性感染提供基础。利用双层平板培养法从奶牛粪样中分离、纯化噬菌体,并观察噬菌斑特征,将纯化后的噬菌体浓缩液用磷钨酸负染,通过透射电子显微镜观察其形态特征。对该噬菌体进行全基因组测序和遗传进化分析,用双层平板培养法测定其宿主谱、最佳感染复数、一步生长曲线、热稳定性及pH稳定性。结果如下:分离并纯化出一株裂解性屎肠球菌噬菌体,命名为vB_EfaM_XJ3,其噬菌斑圆形透明、无晕环且边缘整齐,直径1.2~1.5mm;电镜观察其头部呈廿面体,头长约53.15nm,尾长约14.42nm×199.62nm;核酸类型为dsDNA,基因组全长为157.189kb,GC含量为50.27%;其基因序列与沙门菌噬菌体SKML-39的相似性高达98%。生物学特性研究显示vB_EfaM_XJ3目前只裂解其宿主菌;最佳感染复数为0.001,潜伏期为15min,爆发期为175min,裂解量约为84;能耐受50℃左右高温,在pH 5.0~11.0范围内效价稳定。分离鉴定出一株裂解性肌尾科屎肠球菌噬菌体,对它进行了生物学特性和亲缘性分析,为沙门菌和屎肠球菌抑菌剂的研究与应用奠定了基础。 | 张倩 于会举 孙耀强 张湘莉兰 张培生 刘鸽 屈勇刚 童贻刚 李岩 | 2017 | 畜牧兽医学报2017，48，4： | 4 |
| 14 | 体外血脑屏障模型的构建及致脑膜炎粪肠球菌对其的影响显示文摘试验旨在探索致脑膜炎粪肠球菌对体外血脑屏障功能的影响,寻求稳定的构建体外血脑屏障损伤模型的方法。选用1周龄ICR小鼠进行原代脑微血管内皮细胞(BMEC)分离并通过BMEC特有的凝血因子Ⅷ(coagulation factorⅧ,FactorⅧ)进行荧光标记,鉴定分离的细胞并判定分离率。选用1~3日龄ICR小鼠分离星形胶质细胞并通过其特有的胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)对进行荧光标记,鉴定分离的细胞并判定分离率。将原代细胞传至3代,用Transwell二维小孔分别构建单层BMEC和BMEC与星形胶质细胞共培养的血脑屏障模型。选用致脑膜炎粪肠球菌、非致脑膜炎粪肠球菌和大肠杆菌DH5α感受态细胞分别与构建的体外血脑屏障模型共培养,评估致脑膜炎粪肠球菌对体外血脑屏障模型的穿透性。通过4 h渗透试验、荧光素钠通透性试验和血脑屏障损伤相关标志基因基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达量的检测,评估致脑膜炎粪肠球菌对体外血脑屏障模型的影响。结果显示,试验成功分离到BMEC和星形胶质细胞,纯度分别达90%和95%以上。细菌穿透试验结果显示,所选的3株细菌只有致脑膜炎粪肠球菌可穿越体外血脑屏障模型。4 h渗透试验和荧光素钠通透性试验结果显示,共培养模型优于单层BMEC模型。与其他组相比,构建的体外血脑屏障与致脑膜炎粪肠球菌共培养组荧光素钠的穿透力更高,MMP-2基因的表达量明显上升。综上,BMEC与星形胶质细胞共培养的模型优于单层BMEC模型,致脑膜炎粪肠球菌可穿越体外血脑屏障模型,并介导体外血脑屏障损伤,本试验结果为揭示致脑膜炎粪肠球菌对体外血脑屏障损伤机制提供了理论依据。 | 李益涛 曹梦园 陈明杰 齐亚银 | 2021 | 中国畜牧兽医2021，48，7： | 4 |
| 15 | 应用16SrRNA基因序列鉴定柞蚕空胴病病原菌显示文摘20世纪70年代末,采用形态分类学方法,将引起柞蚕空胴病的致病菌鉴定为柞蚕链球菌(Streptococcus pernyi sp.nov)。分别提取已分离柞蚕空胴病的5株病原菌株的基因组DNA,PCR扩增16S rRNA基因片段,经克隆、测序后,与GenBank中登录的相关肠球菌、链球菌菌株的16S rRNA基因序列进行同源性比对并构建系统进化树。结果表明,供试的5株菌株的16S rRNA基因序列相似性在99.5%~99.9%之间,相互之间存在着10个可变位点,推测5株菌株属于同一个菌种;5株菌株的16S rRNA基因序列与肠球菌属(Enterococcus)16S rRNA基因序列的相似性较高,在92.4%~99.8%之间,而与链球菌属(Streptococcus)16S rRNA基因序列的相似性相对较低,在87.3%~87.8%之间;5株菌株与肠球菌属在系统进化树上聚为一类。基于菌株的16S rRNA基因序列分析,鉴定柞蚕空胴病的病原菌应归属于肠球菌属。 | 商翠芳 秦利 赵振军 宋策 李树英 姜德富 范琦 | 2011 | 蚕业科学2011，37，5： | 4 |
| 16 | 罗非鱼非肠道组织内粪肠球菌的分离和鉴定显示文摘从患链球菌疾病的罗非鱼的肝、肾、血液内分离出β溶血性无乳链球菌的同时,分离出1株γ溶血性的粪肠球菌。粪肠球菌是鱼类肠道内的正常菌群,一般不会出现在其他组织器官内。在病鱼非肠道组织内发现该菌,可能是由于患病罗非鱼组织间的屏障被无乳链球菌破坏,从而引起了粪肠球菌在罗非鱼各器官间的转移。 | 左跃 易弋 夏杰 杨军 冯丹 罗福广 伍时华 | 2013 | 中国兽医杂志2013，49，3： | 3 |
| 17 | 波杂山羊绿脓杆菌和肠球菌的分离与鉴定显示文摘江苏省溧阳某羊场2007年6-7月间发生了一起疫情,部分波杂山羊尤其羔羊出现连续发病和死亡。采取病死羊病料做病原分离、纯化,对纯化的分离菌开展培养特性、菌体形态特性、生化特性鉴定及对ICR小鼠致病性实验、药物敏感性试验等工作。根据以上试验结果,分离菌鉴定为波杂山羊的绿脓杆菌和肠球菌。 | 张则斌 王芳 徐为中 范志宇 何孔旺 高成华 王平生 | 2008 | 江苏农业科学2008，36，5： | 3 |
| 18 | 猪源粪肠球菌Ace蛋白间接ELISA方法的建立与应用显示文摘根据GenBank已发表粪肠球菌Ace基因(AF260879)的核苷酸序列设计1对引物,通过PCR扩增Ace基因保守序列A片段部分序列,将其克隆到pET-32a(+)裁体中,构建了原核表达载体pET-32a(+)-Ace,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,成功表达并纯化了重组蛋白;以此重组蛋白作为抗原建立了检测粪肠球菌Ace抗体的间接ELISA方法。经反复试验,确定该间接ELISA的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1mg/L,被检血清稀释度为1∶800,1%BSA为封闭液,血清和二抗的作用时间均为60min,底物TMB反应时间为15min,反应的阳性判定值为0.126。交叉试验、批内重复和批间重复试验证明,所建立的间接ELISA方法具有特异性高、重复性好的特点,可用于粪肠球菌Ace蛋白血清抗体的检测。 | 陈丽颖 张祥 李晓博 李英英 邵刘云 胡慧 王亚宾 | 2014 | 中国兽医学报2014，34，5： | 3 |
| 19 | 羊源肠球菌溶血性的检测显示文摘【目的】了解羊源肠球菌溶血素的特性。【方法】以平板法、接触法、培养法、上清法及PCR法,对11株肠球菌临床分离株、30株健康羊分离株、肠球菌参考株和G群链球菌参考株进行了溶血性检测。【结果】接触法和上清法均不能检测到11株肠球菌临床分离株对兔血和羊血的溶血;平板法和培养法测得11株肠球菌临床分离株中,63.6%对兔血呈现β溶血,36.4%对羊血平板呈现α溶血;基于检测cylA基因的PCR法,63.6%溶兔血菌能扩增出特异性条带,扩增产物序列与GenBank(L37110)中肠球菌同源性达99.3%。平板法测定30株健康羊分离株,初次分离培养53.3%对兔血β溶血,53.3%对羊血α溶血,43.3%对羊血β溶血,但二次传代后只有6%对兔血仍有溶血能力,且30株均不能检测到cylA。标准肠球菌对羊血平板有α溶血,而对兔血没有溶血性。【结论】提示肠球菌溶血性具有一定的溶血谱,不同检测方法检测的溶血情况不同;并且肠球菌溶血素必须在红细胞诱导下,通过细菌的生长繁殖产生;溶血素表型和基因型的检测不完全一致,对二者同时检测能提高肠球菌溶血素检测的准确性。 | 康立超 韩素娟 王静梅 薄新文 马勋 | 2008 | 微生物学报2008，48，7： | 2 |
| 20 | 陕西扶风某生猪养殖场肠球菌分型与毒力基因检测显示文摘[目的]分析分离自陕西扶风某生猪养殖场的肠球菌的亚型及毒力基因携带情况,为保障猪肉食品安全和临床感染治疗提供依据。[方法]采用PCR方法,对从陕西省扶风县某养殖场生猪鼻腔、粪便及其养殖场环境样品中分离到的87株肠球菌进行粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、鸡肠球菌(Enterococcus gallinarum)特异性基因的扩增,根据凝胶成像中条带位置对其进行分型,检测其ace、cylA、cylB、cylM、cylL1、efaA、esp、gelE、AS、asal和hyl等11种毒力基因的携带情况。[结果]87株肠球菌中,粪肠球菌、屎肠球菌、鸡肠球菌和其他类型肠球菌(Other Enterococcus)的检出率分别为57.5%,10.3%,4.6%和27.6%;5种毒力基因asal、gelE、cylL1、ace和esp的平均检出率分别为50.6%,27.6%,19.5%,18.4%和1.2%,在猪舍地面菌株中均有检出。粪肠球菌中的asal检出率显著高于其他4种毒力基因(P<0.05),各毒力基因在未定型的其他亚型肠球菌中的检出率无显著差异(P>0.05)。在生猪育肥前期和后期,所有源菌株中毒力基因ace、cylL1、esp、gelE和asal的总检出率分别为93.7%和6.3%,82.3%和17.7%,100.0%和0%,75.0%和25.0%及84.1%和15.9%。[结论]扶风县某生猪养殖场中流行的肠球菌主要为粪肠球菌,其次为屎肠球菌和鸡肠球菌。不同来源菌株中毒力基因检出率不同,生猪育肥后期菌株中各毒力基因的检出率均有所降低。 | 廉鲁昕 牛沁雅 曹晨阳 盛焕精 李伟 施春雷 史贤明 杨保伟 | 2021 | 西北农林科技大学学报(自然科学版)2021，49，4： | 2 |
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