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| 1 | 金匮肾气丸对微波辐射性生殖功能障碍小鼠生精细胞膜流动性的影响显示文摘目的:探讨微波辐射对小鼠生精细胞膜流动性的影响及金匮肾气丸治疗机制。方法:雄性BALB/c小鼠50只,随机分为5组,每组10只。平行对照组不做任何处理;辐射对照组、金匮肾气丸1组、金匮肾气丸2组、金匮肾气丸3组均暴露于频率为2 450MHz连续微波中,功率密度为10m W/cm2,辐射18d,每天辐射1h;辐射对照组用0.9%氯化钠溶液分别灌胃,每天1次,每次0.1m L;金匮肾气丸组用金匮肾气丸(0.1、0.2、0.4g/kg体质量)分别灌胃,每天1次。组合酶法分离各组小鼠生殖细胞,荧光偏振法及激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测膜微黏度(η)、荧光偏振度(P)。结果:微波辐射后,P及η显著升高(P<0.05);金匮肾气丸治疗后,P及η皆有显著改善(P<0.05),金匮肾气丸1组、2组、3组均接近正常,3组之间无显著差异。结论:微波辐射可以使小鼠生精细胞膜流动性下降,而金匮肾气丸的治疗机制是通过增加小鼠精子膜的流动性而起到治疗作用。 | 毕焕洲 宋倩倩 张宝文 | 2015 | 中华中医药杂志2015，30，3： | 6 |
| 2 | 芹菜素对大鼠生精细胞凋亡作用的影响显示文摘目的研究芹菜素对大鼠生精细胞凋亡的影响。方法应用percoll不连续密度梯度分离培养大鼠睾丸生精细胞,应用流式细胞术观察芹菜素对生精细胞凋亡的影响。结果芹菜素作用于大鼠生精细胞,FCM分析显示芹菜素能促进生精细胞凋亡,并呈剂量依赖方式。结论芹菜素能呈剂量依赖式促进睾丸生精细胞凋亡。 | 梁佳 姜恩魁 | 2007 | 辽宁医学院学报2007，28，2： | 3 |
| 3 | 人类睾丸生精细胞体外培养的初步研究显示文摘目的对人类生精细胞体外培养分化、成熟进行初步研究.方法将4例患者的睾丸组织制备成生精细胞,观察生精细胞体外培养后生精细胞的分化、成熟情况.结果 4例患者睾丸生精细胞经体外培养后均有不同程度的分化、成熟.初级精母细胞能分化为精子细胞,分化率平均为0.47%~1.50%;Sa期精子细胞能变形、成熟为Sc期精子细胞,成熟率为0.93%~5.72%.结论在该研究条件下,人类睾丸生精细胞体外培养能进一步分化、成熟. | 檀大羡 王植柔 刘锋 罗开玲 卢晟盛 李莲军 卢克焕 | 2005 | 广西医学2005，27，8： | 3 |
| 4 | 比较机械分离法和组合酶消化法分离大鼠生精细胞的差异显示文摘目的:采用机械分离法和组合酶消化法分离大鼠生精细胞,比较两者在细胞数量、细胞纯度及存活率等方面的优劣。方法:实验于2007-03/05在广东省人民医院医学研究中心进行。分别采用机械分离法和组合酶消化法分离成年SD大鼠睾丸生精细胞,即机械分离法采用锐性分离结合筛网过滤,依次将间质细胞、血细胞剔除,经过滤筛选后,获得较为纯净的生精细胞,最后经差速贴壁法获得纯度较高的生精细胞。组合酶消化法采用胶原酶和胰酶消化相结合的方法,首先用胶原酶Ⅳ将间质细胞分离出来,经胰酶消化后获得单细胞的生精细胞悬液。分析比较两者所得细胞总数及细胞纯度的差异,并检测分离培养前后细胞存活率的变化。结果:组合酶消化法分离的生精细胞数量与机械分离法相当,两者比较差异无显著性意义(P>0.05)。但机械分离法所得生精细胞的纯度高于组合酶消化法,并且分离培养前后细胞存活率也明显高于组合酶消化法,两两比较差异均有显著性意义(P<0.05)机械分离法所得生精细胞悬液中以支持细胞混杂为主,而组合酶消化法则混杂较多支持细胞和间质细胞。结论:机械分离法分离生精细胞纯度高、细胞存活率高及费用低,是一种简单、经济、有效的生精细胞分离方法。 | 李世林 王行环 杨中华 蒲小勇 高炜城 | 2007 | 中国组织工程研究与临床康复2007，11，50： | 3 |
| 5 | BrdU标记在大鼠生精细胞体外培养中的应用显示文摘目的探讨应用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxy-uridine,BrdU)标记检测大鼠生精细胞体外的分化、发育情况。方法采用BrdU体内标记生精细胞的DNA,免疫细胞化学法跟踪观察大鼠生精细胞在体外培养中的分化、发育情况。结果培养前在体内标记BrdU的细胞为初级精母细胞,经培养后在BrdU标记的细胞中出现早期精子细胞。结论大鼠生精细胞体外培养过程中,应用BrdU标记能检测生精细胞的分化、发育情况。 | 檀大羡 王植柔 刘锋 卢晟盛 李莲军 卢克焕 李佳荃 | 2006 | 中国现代医学杂志2006，16，10： | 2 |
| 6 | 非梗阻性无精子症患者睾丸生精细胞体外培养后受精能力的研究显示文摘目的:探讨非梗阻性无精子症患者睾丸生精细胞体外培养后的受精能力。方法:选取8例非梗阻性无精子症患者的睾丸组织制备成生精细胞,经体外培养后得到长形精子细胞显微注射到卵细胞内,观察其受精情况。结果:8例患者睾丸生精细胞经体外培养后均有不同程度的分化、成熟。将培养后接近成熟的精子细胞通过显微注射到卵细胞内,卵细胞受精率为4.52%,荧光原位杂交试验结果显示卵细胞有受精。结论:非梗阻性无精子症患者睾丸生精细胞经体外培养后有潜在的受精能力。 | 檀大羡 莫毅 陈自洪 张海英 刘琼东 牛向丽 孙燕萍 | 2014 | 中国性科学2014，23，2： | 1 |
| 7 | 小鼠精原细胞体外培养分化的研究显示文摘目的探讨小鼠精原细胞的分离纯化及体外培养条件。方法采用组合酶消化法分离纯化小鼠精原细胞和支持细胞,在添加FSHC和TC的基本培养基中进行体外培养。采用反转录PCR方法检测精子细胞特异性基因过渡蛋白9(Tnp2)的表达以对分化细胞进行鉴定。结果培养5 d后有分化的圆形精子细胞出现,培养7d后收集的细胞可见Tnp2基因表达。结论通过体外培养小鼠精原细胞可迅速完成减数分裂过程和减数分裂后的分化过程,并可获得更接近成熟阶段的精子细胞。 | 杨丹彤 杨晓梅 邱毅 贾颐舫 | 2011 | 实验动物科学2011，28，2： | 1 |
| 8 | 金匮肾气丸对微波辐射性生殖功能障碍小鼠生精细胞Ca^(2+)、RyRs及MMP的影响显示文摘目的:探讨微波辐射对小鼠生精细胞损伤机制及金匮肾气丸治疗机制。方法:将50只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组,辐射组,金匮1、2、3组。除正常组外,其余4组均暴露于2 450MHz、10m W/cm2连续微波中,1h/d,18d。金匮1、2、3组每次分别给予0.1、0.2、0.4g/kg体质量金匮肾气丸灌胃,正常组、辐射组分别给予0.1m L 0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d,18d。检测小鼠生精细胞内Ca^(2+)荧光强度、内质网钙通道蛋白(Ry Rs)、线粒体膜电位(MMP)。结果:与正常组比较,辐射组Ca^(2+)荧光强度显著升高,而MMP、Ry Rs阳性表达显著降低(P<0.05);而金匮1、2、3组与辐射组比较,Ca^(2+)荧光强度降低,MMP、Ry Rs阳性表达显著升高(P<0.05),呈浓度依赖型,其中,金匮3组在Ca^(2+)荧光强度方面改善优于金匮1、2组(P<0.05)。结论:微波辐射损伤可使生精细胞内Ca^(2+)浓度增高,MMP、Ry Rs阳性表达降低,金匮肾气丸可通过调节Ry Rs、MMP修复损伤,降低细胞内Ca^(2+)浓度而达到治疗效果,且药量增加效果显著。 | 毕焕洲 彭超 徐世杰 | 2017 | 中华中医药杂志2017，32，1： | 1 |
| 9 | 哺乳动物初级精母细胞体外培养的研究显示文摘目的:探讨哺乳动物初级精母细胞体外培养分化的可能性。方法:制备雄性大鼠睾丸初级精母细胞,与非洲绿猴肾上皮细胞(Vero细胞)共培养,观察初级精母细胞体外培养过程中的生长行为,用5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)标记跟踪观察大鼠初级精母细胞在体外培养中的分化情况。结果:大鼠初级精母细胞与Vero细胞共培养后能进行减数分裂阶段分化,生成精子细胞;BrdU标记检测结果显示,培养前在体内标记BrdU的细胞为初级精母细胞,培养后在有BrdU标记的细胞中有早期精子细胞。结论:哺乳动物初级精母细胞在体外培养中能进行分化。 | 檀大羡 刘锋 王植柔 卢晟盛 李莲军 卢克焕 | 2006 | 广西医科大学学报2006，23，3： | 0 |
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