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1EB病毒基因组结构及其基因体外转染研究现状显示文摘张钦明 1997广东医学院学报1997,15,4:1
2上皮组织特异性表达N-LMP1和CR2转基因猪胚胎成纤维细胞的构建与鉴定显示文摘目的构建上皮组织特异性表达鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1(N-LMP1)和人补体受体2(CR2)真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有N-LMP1和CR2基因的细胞克隆,为构建与EBV感染相关的猪鼻咽癌模型奠定基础。方法通过直接合成ED-L2启动子和N-LMP1,从人B淋巴细胞中的RNA经RT-PCR扩增出CR2,将上述3个片段逐个连接到真核表达载体pN1上,构建上皮组织特异性表达N-LMP1和CR2的载体pN1-EDL2-N-LMP1-CR2;用脂质体转染猪胚胎成纤维细胞,经药物G418筛选和PCR鉴定阳性克隆。结果成功构建上皮组织特异性表达N-LMP1和CR2的真核表达载体pN1-ED-L2-N-LMP1-CR2,并成功整合到猪胚胎成纤维细胞的基因组中,获得了整合有目的基因N-LMP1和CR2的猪胚胎成纤维细胞克隆。结论获得了上皮组织特异性表达N-LMP1和CR2的猪胚胎成纤维细胞克隆,为通过细胞核移植方法获得表达N-LMP1和CR2转基因猪提供了供体细胞。黄海城 刘欢 安靓 2014中国比较医学杂志2014,24,2:0
3采用原位杂交及电镜检测CR2转染小鼠细胞的EB病毒感染显示文摘EB病毒不能感染小鼠是因为小鼠CR2受体构像与人的不同。通过对小鼠CR2受体进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用基因转移技术导入小鼠鼻咽上皮细胞系 (TMNE)进行表达 ,观察转染阳性细胞是否具有结合EB病毒的能力。EBER - 1杂交结果显示 ,只有转染hCR2和突变型MCR2(mtMCR2 )的TMNE细胞可以感染EB病毒 ,但是前者感染EB病毒的阳性率比后者的高得多。电镜结果也进一步证实EB病毒可以感染这两种细胞。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。任彩萍 蓝轲 冯湘玲 许亮国 何志巍 刘卫东 王慧 姚开泰 2001病毒学报2001,17,1:0
4小鼠补体受体Ⅱ型基因改造后感染EB病毒显示文摘通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因 (CR2 )进行定点突变 ,然后将野生型和突变型小鼠CR2 / 1(MCR2 / 1)及人CR2 (hCR2 )用电穿孔方法导入小鼠SP2 / 0进行表达 ,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染 ,EBER 1杂交结果显示 ,仅转染hCR2和突变型MCR2 (mtMCR2 )的SP2 / 0细胞感染了EB病毒 ,前者感染EB病毒的阳性率较后者高很多。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。任彩萍 蓝轲 刘卫东 何志巍 王慧 姚开泰 2001湖南医科大学学报2001,26,2:0
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