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| 1 | 过表达基质细胞衍生因子1基因促进骨髓间充质干细胞增殖和迁移显示文摘背景:基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor,SDF-1)/CXCR4轴不仅能够促进骨髓间充质干细胞向损伤组织迁移,而且具有抑制骨髓间充质干细胞凋亡、增加骨髓间充质干细胞存活率及增殖活性等作用。目的:建立慢病毒介导的稳定过表达SDF-1α的骨髓间充质干细胞系,在体外观察其对骨髓间充质干细胞增殖和迁移的影响。方法:构建过表达SDF-1α重组慢病毒载体(pNL-SDF-1α-IRES_2-EGFP),并以空载体质粒pNL-IRES_2-EGFP、基因沉默质粒GV-118-SDF-1α-siRNA作为实验对照,分别转染293T细胞和骨髓间充质干细胞,建立稳定过表达SDF-1α的骨髓间充质干细胞系:SDF-1α-BMSCs组、null-BMSCs组和siRNA-BMSCs组;采用RT-PCR、Western Blot方法检测SDF-1αmRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测骨髓间充质干细胞的增殖能力;Transwell迁移实验检测SDF-1α对骨髓间充质干细胞迁移能力的影响。结果与结论:(1)成功构建pNL-SDF-1α-IRES_2-EGFP质粒,经测序结果表明pNL-SDF-1α-IRES_2-EGFP重组质粒构建成功;(2)慢病毒转染48 h后可见293T细胞和各组骨髓间充质干细胞强烈表达EGFP;(3)SDF-1α-BMSCs组高效表达SDF-1α,siRNA-BMSCs组SDF-1α表达明显被抑制;(4)SDF-1α-BMSCs组的细胞增殖能力增强,SDF-1α可明显促进骨髓间充质干细胞的跨膜迁移。在抗SDF-1α多抗作用后各组细胞迁移指数明显下降;(5)结果可见,慢病毒载体可介导外源性基因SDF-1α在大鼠骨髓间充质干细胞中高效表达,并促进骨髓间充质干细胞的增殖和迁移。 | 陈少强 吴碧莲 王姗姗 黄海辉 | 2018 | 中国组织工程研究2018，22，1： | 6 |
| 2 | Effect of intravenous transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells on neurotransmitters and synapsins in rats with spinal cord injury显示文摘Bone marrow mesenchymal stem cells were isolated, purified and cultured in vitro by Percoll density gradient centrifugation combined with the cell adherence method. Passages 3-5 bone marrow mesenchymal stem cells were transplanted into rats with traumatic spinal cord injury via the caudal vein. Basso-Beattie-Bresnahan scores indicate that neurological function of experimental rats was significantly improved over transplantation time (1-5 weeks). Expressions of choline acetyltransferase, glutamic acid decarboxylase and synapsins in the damaged spinal cord of rats was significantly increased after transplantation, determined by immunofluorescence staining and laser confocal scanning microscopy. Bone marrow mesenchymal stem cells that had migrated into the damaged area of rats in the experimental group began to express choline acetyltransferase, glutamic acid decarboxylase and synapsins, 3 weeks after transplantation. The Basso-Beattie- Bresnahan scores positively correlated with expression of choline acetyltransferase and synapsins. Experimental findings indicate that intravenously transplanted bone marrow mesenchymal stem cells traverse into the damaged spinal cord of rats, promote expression of choline acetyltransferase, glutamic acid decarboxylase and synapsins, and improve nerve function in rats with spinal cord injury. | Shaoqiang Chen Bilian Wu Jianhua Lin | 2012 | Neural Regeneration Research2012，7，19： | 5 |
| 3 | 过表达CXCR4的骨髓间充质干细胞移植对抗庆大霉素耳毒作用的研究显示文摘目的:在成功建立了过表达CXCR4骨髓间充质干细胞系(CXCR4-BMSCs)的基础上,观察CXCR4-BMSCs在庆大霉素致感音神经性聋的豚鼠耳蜗内的生存和迁移能力,探讨SDF-1/CXCR4轴是否能够介导BMSCs向耳蜗归巢。方法:分离并提取豚鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并成脂肪、成骨、成神经诱导,鉴定其多向分化能力,建立CXCR4-BMSCs;取健康豚鼠50只,庆大霉素[100mg/(kg·d)]腹腔注射建立感音神经性聋动物模型,将成功致聋动物随机分为3个组:A组:感应神经性聋组(14只),耳蜗鼓阶途经植入灭菌注射用水;B组:感音神经性聋植入BMSCs(14只),耳蜗鼓阶途经植入;C组:感应神经性聋植入过表达CXCR4BMSCs组(14只),耳蜗鼓阶途径植入。并于2周、4周后进行听性脑干反应(ABR)检测,耳蜗组织冷冻切片荧光追踪植入细胞在耳蜗内的定向归巢情况。结果:耳聋动物造模成功后ABR检测3组听阈分别为(91.3±5.2)dB(SPL)、(90.7±4.8)dB(SPL)、(90.9±5.6)dB(SPL),差异无统计学意义(P>0.05)。A组豚鼠2周及4周听阈分别为(89.7±6.4)dB(SPL)和(89.2±6.7)dB(SPL),未见明显提高(P>0.05);B组豚鼠2周后听阈为(88.6±5.3)dB(SPL),差异无统计学意义(P>0.05),4周后听阈为(78.4±7.3)dB(SPL),差异有统计学意义(P<0.05);C组术后2周听阈为(75.3±7.8)dB(SPL),听力提高约15dB;4周后听阈为(62.1±8.4)dB(SPL),听力提高约28dB,均差异有统计学意义(P<0.05)。荧光追踪显示CXCR4-BMSCs定向归巢的细胞数量明显增多,且呈现出队列样排列。结论:SDF-1/CXCR4轴在BMSCs向耳蜗定向归巢及分化过程中发挥了重要作用,可提高庆大霉素致感音神经聋豚鼠的听力修复能力。 | 黄少鹏 王晓燕 方超 吴丽华 林碧玉 叶青 | 2018 | 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志2018，32，5： | 5 |
| 4 | 骨髓基质干细胞旁分泌作用促进大鼠损伤脊髓的血管新生显示文摘目的 观察移植骨髓基质干细胞(BMSCs)旁分泌作用对大鼠损伤脊髓血管新生的促进作用. 方法 用密度梯度离心及贴壁法相结合的方法分离、纯化、培养大鼠BMSCs,应用流式细胞技术检测BMSCs表面细胞标志CD34、CD45、CD29、CD90;根据改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型,54只清洁型SD大鼠分为假手术组、对照组和实验组(n=1 8),假手术组和实验组经尾静脉注射BMSCs,对照组经尾静脉注射PBS.移植BMSCs后l、7、14d应用免疫荧光标记观察羧基荧光素乙酰乙酸标记的BMSCs表达血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的情况;应用免疫组化检测移植BMSCs对损伤脊髓第Ⅷ因子相关抗原表达的影响;应用逆转录-聚合酶链反应法检测移植BMSCs对损伤脊髓VEGF和bFGF mRNA表达的影响. 结果 激光共聚焦显微镜显示移植的BMSCs可在脊髓损伤处及损伤附近区域聚集、存活且表达VEGF和bFGF.实验组大鼠脊髓内第Ⅷ因子相关抗原的灰度值、微血管密度以及VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达量明显高于对照组和假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05);而且实验组14d微血管密度、VEGF mRNA、bFGF mRNA的表达量较1、7d明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 BMSCs在损伤脊髓内可以通过旁分泌VEGF和bFGF增加微血管密度,促进损伤脊髓的结构和功能恢复. | 陈少强 吴碧莲 贾小力 林建华 | 2015 | 中华创伤骨科杂志2015，17，3： | 4 |
| 5 | 分区式脊髓导管联合骨髓基质干细胞修复脊髓横断损伤模型大鼠显示文摘背景:脊髓损伤致残率高,治疗上仅限于早期手术干预、药物治疗和后期功能锻炼等手段,运动功能稍有改善,但目前尚无有效治愈办法。目的:探讨分区式脊髓导管和骨髓基质干细胞联合对大鼠T8脊髓全横断损伤模型的修复效果。方法:根据数字表法将50只大鼠随机分为5组,每组10只,Ⅰ组为T8脊髓全横断切除5 mm,不做其他处理;Ⅱ组为造模后将分区式脊髓导管植入形成的缺损内;Ⅲ组为造模后将分区式脊髓导管植入形成的缺损内,同时植入骨髓基质干细胞;Ⅳ组为造模后将分区式脊髓导管植入形成的缺损内,同时植入聚乙醇酸纤维;Ⅴ组为造模后将分区式脊髓导管植入形成的缺损内,同时植入骨髓基质干细胞和聚乙醇酸纤维。结果与结论:(1)术后2周和12周Ⅲ组和Ⅴ组的BBB评分明显高于Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅳ组,差异有显著性意义(P<0.05)。(2)术后12周Ⅴ组损伤平面以下运动诱发电位的潜伏期明显少于Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组,差异有显著性意义(P<0.05)。(3)免疫组化显示Ⅲ组和Ⅴ组在导管中间能找到染色阳性的再生神经纤维并生长有序,无明显缠绕成团的现象。(4)透射电镜显示桥接各组都有一定数量的有髓神经纤维。(5)结果表明分区式壳聚糖脊髓导管联合骨髓基质干细胞植入可以较好的连接脊髓损伤缺损,恢复一部分电生理特性,加快轴突再生,恢复运动功能,为脊髓损伤的治疗提供了一个新的方向。 | 赵锡武 刘鑫 于大鹏 荣辉 于兴胜 杨长生 刘通 赵廷宝 | 2016 | 中国组织工程研究2016，20，1： | 1 |
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