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| 1 | 新生儿心电图判读指南(二)显示文摘 | 魏丽 周同甫 Schwartz PJ Garson A Jr Paul T | 2009 | 中华妇幼临床医学杂志(电子版)2009，5，1： | 4 |
| 2 | 重组慢病毒介导的OPCML基因的体外转导及其对卵巢上皮性癌细胞的抑制作用显示文摘目的探讨重组慢病毒介导的体外转导OPCML基因的可行性及其对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞的抑制作用。方法采用PCR技术,用基因特异性引物将OPCML基因的cDNA从CD1小鼠脑组织中扩增,并将OPCML基因克隆到慢病毒载体表达质粒pWPI GFP上,构建慢病毒载体表达质粒pWPI OPCML;将pWPI OPCML或pWPI GFP(空载体对照)质粒和包装质粒pCMVdR8.74、pMDG共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,获得携带OPCML和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组慢病毒WPI OPCML或仅携带GFP基因的重组慢病毒WPI GFP;用重组慢病毒WPI OPCML和WPI GFP分别转导靶细胞,即人卵巢癌细胞系A2780、OCC1细胞和小鼠正常卵巢上皮细胞系CD1细胞,以未转染任何基因者为空白对照。通过细胞增殖实验、细胞聚合力实验、细胞周期分析和体内成瘤实验观察OPCML基因对卵巢癌细胞的抑制作用。结果(1)OPCML基因能被重组慢病毒高效地转导入靶细胞,转导效率几乎达100%,并稳定表达;蛋白印迹法检测显示,靶细胞中OPCML和GFP蛋白均有表达。(2)细胞增殖实验显示,A2780细胞中,转导OPCML基因72h后的A2780/OPCML细胞为(7.6±1.0)×105个,明显少于未转导基因的A2780细胞或仅转导空载体的A2780/pWPI细胞[分别为(20.0±2.6)×105和(18.1±1.7)×105个;P<0.01];但OCC1和CD1细胞中,OPCML基因对细胞的增殖无明显的影响(P>0.05)。(3)细胞周期分析显示,OPCML基因对A2780细胞的细胞周期有明显的阻滞作用(转导前、后G0~G1期细胞分别为67%、75%;P<0.05),但对OCC1、CD1细胞则无明显阻滞作用(P>0.05)。(4)细胞聚合力实验显示,与空载体对照相比,OPCML基因能明显增强细胞的黏附力(P<0.05)。(5)移植瘤实验显示,将A2780/OPCML细胞注射到裸鼠皮下,4只裸鼠中仅1只裸鼠有肿瘤生长,其肿瘤重量为10mg,显著低于注射A2780、A2780/pWPI细胞的裸鼠[各4只裸鼠均有肿瘤生长,其肿瘤重量分别为(280±53)及(677±323)mg;P<0.01]。免疫组化法检测显示,肿瘤组织中OPCML蛋白有表达。结论用重组的慢病毒载体作为转基因的工具,具有高效性,同时能使目的基因达到持续稳定的表达。OPCML基因能够增加A2780细胞的黏附能力,抑制A2780细胞的增殖和体内成瘤,提示OPCML基因可能是一个新的抑癌基因。 | 姚德生 李力 Kenneth Garson Barbara C.Vanderhyden | 2006 | 中华妇产科杂志2006，41，5： | 4 |
| 3 | 携带OPCML基因的慢病毒表达质粒的构建显示文摘目的:建立携带和表达OPCML基因的慢病毒(lentiviral viruses,LV)表达质粒。方法:用内切酶将OPCML基因从已构建的表达质粒pcDNA3-OPCML上切下,插入慢病毒载体pWPI-GFP中,构建慢病毒表达质粒pWPI-OPCML,通过酶切、测序和检测验证OPCML蛋白后,将pWPI-OPCML、pCMV-dR8.74和pMDG共转染包装细胞293T,获得重组慢病毒,再感染靶细胞A2780,通过检测标志蛋白-绿色荧光蛋白(GFP)和目的蛋白OPCML进一步验证pWPI-OPCML在细胞中OPCML的表达。结果:(1)pWPI-OPCML中携有正确的OPCML基因,并能在人类细胞中表达;(2)pWPI-OPCML共转染包装细胞293T能产生重组病毒;(3)目的基因OPCML能被重组慢病毒高效地转导入靶细胞A2780,并达到稳定的表达,转导效率几乎达100%,荧光显微镜下能直接观察到GFP,Western blotting能检测到OPCML和GFP蛋白在靶细胞中的表达。结论:pWPI-OPCML能在人细胞中表达OPCML蛋白,共转染包装细胞获得的重组慢病毒能感染人细胞,作为转基因的工具,具有高效性。 | 姚德生 李力 Kenneth Garson Barbara C.Vanderhyden | 2006 | 现代妇产科进展2006，15，7： | 4 |
| 4 | OPCML基因的克隆显示文摘目的:建立OPCML真核细胞表达质粒。方法:利用计算机软件Vector NTI,根据GenBank中OPCML的序列,用RT-PCR法从小鼠大脑组织中扩增OPCML基因全长片段,将其克隆入真核细胞表达质粒pcDNA3,建立OPCML的表达质粒pcDNA3-OPCML,后将其转染入人胚胎肾细胞(293T),用Western blot检测OPCML蛋白在293T中的表达。结果:OPCML能被成功地从正常组织中克隆,构建了真核细胞表达质粒pcDNA3-OPCML,测序表明其携带有正常OPCML的全长序列;转导入人类细胞后有OPCML蛋白的高量表达。结论:pcDNA3-OPCML携带有正常的OPCML全长基因序列,其能在真核细胞中高量表达功能蛋白。 | 姚德生 李力 Kenneth Garson Barbara C.Vanderhyden | 2006 | 广西医科大学学报2006，23，2： | 3 |
| 5 | 癌基因c-myc和K-ras在卵巢癌发生发展中的作用显示文摘目的:探讨癌基因c-myc和K-ras在卵巢癌发生发展中的作用。方法:用Moloney逆转录病毒载体先后将正常的c-myc基因和突变的K-ras基因转导入小鼠正常卵巢上皮细胞(MOSE),建立表达c-myc或(和)K-ras基因的细胞系,分别称为Myc细胞、Ras细胞、RM细胞,通过细胞增殖试验、裸鼠体内成瘤试验研究转基因后MOSE细胞生物学特性的改变。结果:用携带有c-myc和K-ras基因的重组逆转录病毒感染MOSE后,用RT-PCR和Westernblot能分别检测到有相应的c-myc或(和)K-rasmRNA转录以及蛋白的表达;Ras细胞增殖显著快于MOSE和Myc细胞(P<0·01),RM细胞显著快于Myc细胞(P<0·05);将Ras和RM细胞腹腔注射于裸鼠体内,有肿瘤形成,免疫组化结果显示瘤组织有K-ras和c-myc蛋白的表达;MOSE细胞和Myc细胞没有肿瘤形成。结论:重组逆转录病毒载体具有高转导效率,突变的K-ras可使MOSE发生恶性转化,在体内形成肿瘤;c-myc不能使MOSE发生恶性转化,但具有协同作用。 | 姚德生 李力 Kenneth Garson Barbara C. Vanderhyden | 2006 | 广西医科大学学报2006，23，3： | 2 |
| 6 | OPCML对卵巢癌细胞抑制的体内外实验研究显示文摘目的探讨OPCML在体外、体内对卵巢癌细胞的影响。方法将OPCML用重组慢病毒转导入人卵巢癌细胞A2780、OCC1和正常小鼠卵巢上皮细胞CD1。通过细胞增殖试验、细胞聚合力试验、细胞周期的分析和体内成瘤试验等来研究OPCML在卵巢癌细胞中的功能。结果(1)OPCML能被重组慢病毒高效地转导入靶细胞,转导效率几乎达100%,同时达到稳定的表达,Westernblot能检测到OPCML(60kDa)和GFP(27kDa)基因蛋白在靶细胞中的表达;(2)在A2780细胞系,转导入OPCML后的细胞(A2780-OPCML)的增殖明显的比未转基因(A2780)或仅转空载体(A2780-pWPI)者慢(P<0.01),但在OCC1和CD1细胞系,OPCML对细胞的增殖无明显的影响(P>0.05);(3)用流式细胞仪法对细胞周期分析显示,OPCML对A2780的细胞周期有明显的滞留作用(P<0.05),但对OCC1、CD1细胞则无明显滞留作用;(4)细胞聚合力试验提示OPCML能明显增强细胞的粘附力;(5)表达OPCML的A2780细胞在裸鼠皮下仅有一个(1/4)有肿瘤生长,体积显著小于A2780及A2780-pWPI组(4/4)(P<0.001),免疫组织化学染色法能够检测到OPCML蛋白在肿瘤组织中的表达。结论慢病毒载体作为转基因的工具,具有高效转导率和稳定表达的特点;OPCML能够增加细胞的粘附能力,抑制A2780的增殖和体内成瘤,提示OPCML可能是一个新的抑癌基因。 | 姚德生 李力 Kenneth Garson Barbara C Vanderhyden | 2007 | 肿瘤防治研究2007，34，2： | 2 |
| 7 | 新生儿心电图判读指南(一)显示文摘 | Schwartz PJ Garson A Jr Paul T 魏丽 周同甫 | 2008 | 中华妇幼临床医学杂志(电子版)2008，4，6： | 2 |
| 8 | 永生化正常小鼠卵巢上皮细胞系的建立显示文摘目的:探讨具有“永生化”特性的正常小鼠卵巢上皮细胞(MOSE)系建立的方法和可行性。方法:用胰酶消化法从温度敏感抗原(TsAg)转基因小鼠中分离MOSE,用4%血清培养液培养,通过细胞形态学特征的观察、细胞免疫组织化学染色检测CK-19和Vimentin来鉴别,体内成瘤实验观察有否恶性转化。结果:用胰酶消化法能迅速获得足够的MOSE,低血清(4%)培养可以有效去除可能污染的间质细胞,CK-19和Vimentin检测显示均符合上皮细胞的特性,细胞培养和体内成瘤实验均提示其符合具有“永生化”细胞的特性,没有自发发生恶性变,在体内没有成瘤能力。结论:用胰酶消化法,从转TsAg小鼠卵巢中获取的正常MOSE细胞具有“永生化”的特性,能够满足体外实验研究的需要,为卵巢癌的研究提供了可靠的细胞系。 | 姚德生 李力 Kenneth Garson Barbara C. Vanderhyden | 2006 | 广西医科大学学报2006，23，4： | 2 |
| 9 | Detection of hepatitis C viral sequences in blood donations by ' nested' polymerase chain reaction and prediction of infectivity显示文摘 | Garson JA Tedder RS Briggs M | 1990 | Lancet1990，335，8703： | 1 |
| 10 | The MIQE guide- lines: Minimum information for publication of quantita- tive real-time PCR experiments显示文摘 | Bustin S A Benes V Garson J A | 2009 | Clin Chem2009，55，4： | 1 |
| 11 | New isocyano and isothiocyanato terpene metabolites from the topical marine sponge Acanthella cavernosa 显示文摘 | CLARK R J STAPLETON B L GARSON M J | 2000 | Tetrahedron2000，56，19： | 1 |
| 12 | Evaluation of 3D numerisation with structured light projection in breast surgery显示文摘 | SINNA R GARSON S TAHA F | 2009 | Ann Chit Plast Esther2009，54，4： | 1 |
| 13 | New isocyano and isothiocyanato terpene metabolites from the tropical marine sponge Acanthella cavernosa 显示文摘 | Clark R J Stapleton B L Garson M J | 2000 | Tetrahedron2000，56，： | 1 |
| 14 | Pediatric therapeutic cardiac catheterization:a statement for healthcare professionals from the Council on Cardiovascular Disease in the Young,American Heart Association显示文摘 | Allen HD Beekman RH 3rd Garson A Jr | 1998 | Circulation1998，97，6： | 1 |
| 15 | 5D evaluation and mammary augmentation surgery 显示文摘 | b GARSON S DELAY E SINNA R | 2005 | Ann Chit Plast Esthet2005，1，50： | 1 |
| 16 | The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-tlme PCR experiments 显示文摘 | Bustin S A Benes V Garson J A | 2009 | Clin Chem2009，55，4： | 1 |
| 17 | The MIQE guidelines:minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments显示文摘 | BUSTIN S A BENES V GARSON J A | 2009 | Clin Chem2009，55，4： | 1 |
| 18 | The MIQE guidelines:minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments显示文摘 | BUSTIN S A BENES V GARSON J A | 2009 | Clin Chem2009，55，4： | 1 |
| 19 | Modulation of cortical- limbic pathways in major depression: treatment-specific effects of cognitive be- havior therapy显示文摘 | Kimberly Goldapple Zindel Segal Carol Garson | 2004 | Archives of General Psychiatry2004，61，1： | 1 |
| 20 | The MIQE guidelines:min imum information for publication of quantitative real-time PCR experiments显示文摘 | Bustin S A Benes V Garson J A | 2009 | Clin Chem2009，55，4： | 1 |
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