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| 1 | 弓形虫多基因核酸疫苗构建及其免疫保护性研究显示文摘目的构建弓形虫多基因核酸疫苗,评价其免疫保护性。方法 PCR扩增热休克蛋白(HSP70)基因片段,克隆到pcDNA3 ROP2 p30重组质粒中,构建pcDNA3 ROP2 p30 HSP70多基因核酸疫苗。采用该疫苗免疫BALB/c小鼠,检测小鼠脾淋巴细胞及全血CD4+、CD8+,血清、脾淋巴细胞培养液中IgG、IgM、IgA和IFNγ、TNF、IL 2、IL 4、IL 12等,并进行弓形虫攻击感染实验。结果应用PCR扩增出916 bp HSP70基因片段,成功构建pcDNA3 ROP2 p30 HSP70重组体,其中包含HSP70蛋白基因读码框内的完整序列。该弓形虫多基因核酸疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫,实验组小鼠血清抗体滴度高,CD4+和CD8+均增殖明显,组间差异有统计学意义(FCD4+=45.00,FCD8+=15.01,P均<0.01);其血清及脾细胞培养液中IFNγ、IL 2和IL 12含量均明显升高,尤以血清中升高显著。攻击实验结果显示,实验组小鼠存活时间明显延长。结论 pcDNA3 ROP2 p30 HSP70多基因核酸疫苗具有较强的免疫原性,能产生较好的免疫保护作用。 | 魏庆宽 | 2012 | 中国血吸虫病防治杂志2012,24,2: | 7 |
| 2 | 浅谈桥梁抗震分析方法显示文摘本文对桥梁抗震的分析方法进行了综述,介绍了桥梁抗震分析中的静力法、反应谱法、动力时程分析法、虚拟激励法等几种方法及其优缺点。 | 高远 魏志刚 王庆宽 | 2009 | 吉林交通科技2009,,1: | 3 |
| 3 | 确定周期序列k-错线性复杂度的一个快速算法显示文摘给出 GF(q)上确定周期为pn的序列k 错线性复杂度的一个快速算法 ,这里p和q是素数 ,并且q是一个模p2 的本原根 .算法推广了由肖、魏、林和Imamura提出的算法 . | 魏仕民 董庆宽 肖国镇 | 2001 | 西安电子科技大学学报2001,28,4: | 8 |
| 4 | 寄生虫和宿主微(常)量元素含量分布及其与致病关系的研究显示文摘微量元素和某些金属常量元素如锌(Zn)、铁(Fe)、铜(Cu)、硒(Se)、锰 (Mn) 、钙(Ca) 、镁 (Mg)等是构成多种激素、酶和维生素的关键成分和反应催化介质,是维持机体正常代谢及生命活动的重要物质,同时这些元素能够促进机体的细胞免疫和体液免疫,刺激机体抗体或免疫球蛋白的产生,增强机体的抗病能力,与寄生虫的感染、致病有着密切的关系.现将有关微(常)量元素与寄生虫病关系的研究进展综述如下. | 魏庆宽 程鹏 贾凤菊 程义亮 | 2003 | 中国寄生虫病防治杂志2003,16,4: | 4 |
| 5 | 血清学诊断中结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶的应用显示文摘【目的】在原核系统中表达结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate car-boxykinase PEPCK),并研究该蛋白在诊断结核病人血清抗体中的应用价值。【方法】应用基因重组技术表达重组蛋白结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶,经亲和层析法纯化表达产物。用表达的重组蛋白免疫小鼠,研究其免疫学特性。间接酶联免疫吸附试验(Enzyme link immunosorbent assay,ELISA)检测结核病人血清中特异性IgG抗体,并与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒检测结果对比。【结果】试验表明转化入大肠杆菌中的重组质粒能够表达并纯化出相对分子量为72kDa的重组蛋白;Western blot证实重组蛋白能够与小鼠抗BCG血清发生特异性反应;重组蛋白免疫小鼠后,小鼠血清中的抗体滴度可达1:1280以上;重组蛋白用作ELISA包被抗原检测病人血清阳性率为17.3%(30/173),其中排菌病人的阳性率为32.5%(13/42),不排菌病人的阳性率为12.9%。该方法结果与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒的检测结果相比,敏感性为51.0%,特异性为96.7%。【结论】结核杆菌PEPCK具有较好的免疫原性和抗原性,有可能作为结核病血清学诊断的一组抗原之一。 | 柏雪莲 魏庆宽 李瑾 李桂萍 | 2008 | 微生物学报2008,48,10: | 2 |
| 6 | 地理信息系统在疟疾控制研究中的应用显示文摘及时、准确地预测和预报疟疾疫情是控制疟疾流行的关键。地理信息系统在疟疾控制中的推广应用,为开展疟疾现场研究提供了有力的技术手段,并为决策者制定预防策略,赢取宝贵时间,以采取相应防治措施,减少社会和人民的经济损失。因此,近年来地理信息系统在疟疾控制与研究中发挥着日趋重要的作用。 | 魏庆宽 张清国 黄炳成 | 2010 | 中国媒介生物学及控制杂志2010,21,4: | 2 |
| 7 | Expression and identificationff tile multiple gene ROP2-P30 Toxoplasma gondii in Ecoli BL21 [J ]显示文摘 | 张佃波 魏庆宽 宰德富 等 | | 中国人兽处患病学报0,,: | 1 |
| 8 | 一种基于公钥的低成本RFID双向认证协议显示文摘基于目前资源消耗最少的RFID公钥认证方案cryptoGPS协议,提出了一种低成本双向认证协议,采用有效的密钥管理方法、改进的快速Rabin加密算法、低汉明重量(LHW)模值以及轻量级流密码算法Grain V1,并设计使用新型低资源乘法器完成标签的大数模乘,在节省资源的同时克服了cryptoGPS密钥管理不灵活和认证单向性的缺点。安全性分析和基于Design Complier平台Smic 0.25μm工艺的仿真结果表明,该方案有足够的安全性且标签只需4 530个门即可完成双向认证,适用于资源受限的RFID系统。 | 魏丽丽 董庆宽 丁文秀 | 2013 | 电信科学2013,29,10: | 1 |
| 9 | 猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B3基因的原核表达、纯化以及免疫反应性分析显示文摘目的将猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B3基因进行原核表达,分析重组蛋白的免疫反应性。方法根据Ts8B3基因序列设计引物,以囊尾蚴RNA反转录的cDNA为模板PCR扩增Ts8B3基因,扩增产物经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切后连接至原核表达载体pGEX-4T-1,将重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α(E.coli DH5α),PCR、双酶切筛选阳性质粒,测序确认后转化至E.coli BL21,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表达产物。纯化重组蛋白,以囊虫病人血清为一抗,采用Western blot分析其免疫反应性。结果 PCR扩增Ts8B3基因片段为201bp,双酶切和测序显示重组表达质粒构建成功。重组质粒转化BL21后经IPTG诱导4h,以包涵体的形式表达相对分子质量单位(Mr)为33×103的目的蛋白。纯化的重组蛋白能被囊虫病患者血清识别。结论成功构建Ts8B3基因重组质粒,表达的重组蛋白具有免疫反应性,为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础。 | 李瑾 肖婷 孙慧 魏庆宽 贾凤菊 黄炳成 | 2018 | 中国病原生物学杂志2018,13,5: | 8 |
| 10 | 巢式PCR法检测弓形虫的应用研究显示文摘目的调查山东省商品肉弓形虫污染和动物弓形虫感染情况,并进行SAG2分型研究,分析商业肉制品在弓形虫传播中的作用。方法自由市场采集商品肉,用巢式PCR方法检测弓形虫DNA,阳性者经纯化PCR产物,进行SAG2临床分型研究。结果共检测商品肉89份,阳性22份,阳性率为24·72%。其中,猪肉标本56份,16份阳性,阳性率为28·57%,Ⅰ型13份,Ⅱ型1份,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染1份,未能定型1份;羊肉标本33份,6份阳性,阳性率为18·18%,Ⅰ型5份,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染1份。22份阳性标本中单纯Ⅰ型占81·82%,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染占9·09%,Ⅲ型未能检测到。1份可疑病人血标本阳性,为Ⅰ型。结论肉类弓形虫污染率很高,以Ⅰ型为主,是人类感染的重要来源。家庭食品加工过程中生熟不分与人们对食品鲜美的追求造成误食包囊感染,可能是造成人类弓形虫感染率大幅升高的最为重要的原因之一。 | 傅斌 刘克义 韩广东 魏庆宽 李瑾 崔勇 | 2005 | 中国热带医学2005,5,5: | 6 |
| 11 | 弓形虫棒状体蛋白及其核酸疫苗研究现状显示文摘弓形虫病目前尚无理想的特效治疗药物和防治措施,研制安全便捷、保护力强的核酸疫苗是弓形虫病防治的有效策略。棒状体蛋白(Rhoptry protein,ROPs)是弓形虫在入侵宿主细胞过程中所分泌的一类蛋白,其在弓形虫入侵宿主细胞、纳虫空泡(Parsitophorous vacuole,PV)形成及胞内弓形虫的增殖调控等方面发挥着重要作用,是最具潜力的疫苗候选抗原分子之一。本文就ROPs家族重要成员特性、表达载体选择及其核酸疫苗在动物实验中的免疫原性,以及免疫保护作用等方面进行了概述。 | 马荣 孙慧 闫歌 魏庆宽 | 2018 | 中国血吸虫病防治杂志2018,30,1: | 6 |
| 12 | 微小隐孢子虫表面抗原CP23基因的克隆及表达显示文摘目的构建微小隐孢子虫表面抗原CP23基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法用微小隐孢子虫卵囊感染免疫抑制BALB/c小鼠,用不连续蔗糖密度梯度离心法纯化微小隐孢子虫卵囊,用酚-氯仿抽提法提取微小隐孢子虫基因组DNA,PCR扩增CP23基因片段,然后克隆至TA载体;通过酶切、测序鉴定后,将CP23基因片段用限制性内切酶切下克隆至pET-30a(+)载体,构建pET-30a-23质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达蛋白用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。结果扩增出约340bp的微小隐孢子虫CP23基因片段并成功构建pET-30a-23质粒,表达出分子质量单位为27ku的融合蛋白,Western blot显示该蛋白能被抗微小隐孢子虫血清识别。结论成功构建pET-30a-23质粒,表达产物具有免疫反应性,为微小隐孢子虫的免疫学诊断及疫苗研制打下了基础。 | 宰德富 张佃波 魏庆宽 韩广东 李瑾 刘克义 | 2006 | 中国病原生物学杂志2006,1,3: | 6 |
| 13 | 微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗免疫原性的研究显示文摘目的探讨微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗(rBCG-CP15/60-23)的免疫原性。方法用rBCG-CP15/60-23免疫BALB/c小鼠,免疫前后取血,用ELISA法检测IgG抗体,末次免疫后2周取淋巴细胞作体外培养,测定培养上清IFN-γ、IL-2和IL-12的水平。设实验组、BCG组、载体组和PBS对照组。结果rBCG-CP15/60-23免疫后2周开始小鼠IgG抗体水平逐渐升高,与BCG组和载体组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);免疫鼠脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ和IL-2的含量与PBS对照组和BCG组比较差异有统计学意义(P均<0.05),IL-12水平组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论rBCG-CP15/60-23免疫小鼠后能刺激机体产生IgG抗体,IFN-γ和IL-2的分泌增加,具有较好的免疫原性。 | 黄炳成 李瑾 魏庆宽 肖婷 崔勇 韩广东 | 2008 | 中国病原生物学杂志2008,3,12: | 5 |
| 14 | 分型辨治乳糜尿316例显示文摘根据中医对乳糜尿发病机制的认识,结合病情及尿液性质的不同,采用分型辨证的方法,对316例乳糜尿患者分别选用乳糜1~4号汤进行治疗。结果服药后乳糜尿消失244例,占77.2%;显著进步28例,占8.9%;进步44例,占13.9%。 | 孙广平 杨艳君 吕桂月 魏庆宽 辛福敏 | 1998 | 山东中医药大学学报1998,22,5: | 4 |
| 15 | 恶性疟原虫与耐药性相关分子遗传标记的研究进展显示文摘长期以来抗疟药在全球的广泛使用导致恶性疟原虫已普遍对氯喹等传统药物产生耐受性,并对青蒿素类药物造成潜在威胁。随着在基因水平上对疟疾抗药性的深入研究,分子遗传标记已广泛应用于恶性疟耐药性和控制疾病的监测。本文就常见抗疟药的主要作用机制、相关分子标记及其多态性特征的研究进展作一综述。 | 徐超 黄炳成 闫歌 魏庆宽 | 2016 | 中国病原生物学杂志2016,11,12: | 3 |
| 16 | 脑囊虫病人的EEG、BEAM与CT的对比研究显示文摘目的:探讨EEG、BEAM和CT在诊断脑囊虫病中的应用价值。方法 对263例脑囊虫病人的检查结果进行对比分析。结果 该组病人的EEG、BEAM和CT异常率分别为63.9%、79.1%和84.0%。BEAM比EEG提高阳性检出率15.2%,提示BEAM优于目测EEG,它能分辨出目测中不易识别的的EEG微细变化,显示出不同导联及频段的能量分布,有定量分析价值。CT和BEAM的诊断符合率为86.4%,定侧或定位符合率为82.5%。结论 BEAM和CT从脑功能和形态结构上为脑囊虫病的诊断提供重要依据。 | 王中磊 魏庆宽 胡颖新 | 2000 | 脑与神经疾病杂志2000,8,4: | 1 |
| 17 | 蓝氏贾第鞭毛虫保护性抗原的实验研究显示文摘目的筛选蓝氏贾第鞭毛虫的保护性抗原,为免疫疫苗的研制奠定基础。方法利用已建立的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体体外培养系统,获取滋养体抗原,并进一步分离、纯化、活性鉴定;然后分组免疫小鼠,检测相关免疫指标;再行攻击感染试验,视其抗感染能力,筛选出保护性强的抗原组分。结果成功获取5个组分的抗原蛋白(P76/66、P54/50、P34/32、P30/29和P21/19),P76/66抗原活性最强,其诱发BALB/C小鼠产生的抗体含量最高。各组分抗原免疫小鼠,产生的白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)及CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量均随免疫次数的增多而逐渐增加。攻击试验结果显示,P76/66抗原的免疫保护率最高为100%,其次是P21/19为65%。结论P76/66抗原具有良好的免疫保护力,为蓝氏贾第鞭毛虫免疫疫苗的研制提供了物质基础。 | 陈锡欣 傅婷霞 赵长磊 魏庆宽 李瑾 | 2007 | 中国热带医学2007,7,12: | 1 |
| 18 | 结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧基酶诱导小鼠细胞和体液免疫应答显示文摘目的检测结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)对BALB/c小鼠的免疫保护作用。方法选清洁级BALB/c小鼠60只,随机分为两组,实验组和对照组。实验组每只小鼠用表达的PEPCK融合蛋白10μg加弗氏不完全佐剂进行腹腔免疫注射,对照组小鼠仅用弗氏不完全佐剂注射。每隔2w免疫1次,共免疫3次。末次免疫2w后,分别取小鼠脾脏、血清,流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞,MTT法检测淋巴细胞对刺激的应答水平,ELISA检测血清各种细胞因子及抗PEPCK抗体。结果实验组小鼠的脾脏明显大于对照组小鼠的脾脏,且粘连严重,CD4+T细胞增殖明显(73.5±3.69),CD4+/CD8+比值显著升高(5.1±0.98)(P<0.01);且淋巴细胞的应答能力明显强于对照组小鼠;实验组小鼠血清中IFN-γ、IL-12和TNF-α明显高于对照组,血清抗体滴度随免疫次数逐步增高。结论结核杆菌PEPCK能够有效的刺激机体产生细胞免疫反应和体液免疫反应,尤以细胞免疫反应为主,是很好的抗结核候选疫苗分子之一。 | 柏雪莲 魏庆宽 李瑾 韩广东 崔勇 刘克义 | 2008 | 中国人兽共患病学报2008,24,12: | 1 |
| 19 | 乙肝表面抗原载体多价重组核酸疫苗研究进展显示文摘研究表明,乙肝病毒的包膜蛋白HBsAg不仅可以作为疫苗的理想候选分子,还可作为基因工程疫苗的理想载体,用来成功构建多种重组核酸疫苗。本文概述了以乙肝表面抗原为载体,重组或联合其他病毒、寄生虫、细胞因子等其他基因制作多价核酸疫苗的研究进展。 | 肖婷 郭根灵 辛宪云 魏庆宽 | 2012 | 中国病原生物学杂志2012,7,7: | 1 |
| 20 | 微小隐孢子虫重组BCG-Cp23疫苗的构建及鉴定显示文摘目的构建和鉴定微小隐孢子虫Cp23基因卡介苗重组疫苗。方法用微小隐孢子虫感染免疫抑制BALB/c小鼠,用蔗糖密度梯度离心法纯化其粪便中的卵囊,酚-氯仿法提取微小隐孢子虫的基因组DNA,PCR扩增Cp23基因片段,然后将其克隆TA载体;通过酶切、测序鉴定后,将Cp23基因片段用限制性内切酶切下克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV262结核杆菌热休克蛋白(HSP)启动子下游,构建重组质粒pMV262-Cp-23,用电穿孔将该质粒导入野生卡介苗(BCG-WT)构建微小隐孢子虫Cp23基因卡介苗重组疫苗。结果扩增出约360bp的微小隐孢子虫Cp23基因片段并成功构建pMV262-Cp23质粒,通过PCR扩增和提取质粒、酶切表明质粒正确导入BCG-WT中。结论成功构建微小隐孢子虫Cp23基因卡介苗重组疫苗。 | 李瑾 黄炳亮 魏庆宽 肖婷 崔勇 刘克义 | 2008 | 中国人兽共患病学报2008,24,12: | 1 |