|
|
|
题名
|
作者
|
年代
|
出处
|
被引量
|
| 1 | 蛋白水解物制备工艺及其在生物技术领域中的应用研究进展显示文摘蛋白水解物是蛋白质经酶、酸、碱和发酵等方法水解得到的混合物,由于其含有丰富的氨基酸和多肽,并为细胞生长提供多种营养成分、贴壁因子及生长因子类似物等,从而在生物技术领域中得到了广泛的应用。本文综述了蛋白水解物制备工艺、在生物技术领域中的应用及其在细胞培养中对细胞增殖、代谢的影响,以期为蛋白水解物的开发和应用提供参考。 | 张邵博 靳冬武 李明生 | 2019 | 天然产物研究与开发2019，31，2： | 11 |
| 2 | 超高压酶解酪蛋白及其产物在动物细胞培养中的应用显示文摘以牦牛酪蛋白为底物,游离氨基酸含量为指标,在超高压条件下分别采用胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶和胰酶六种不同的酶水解酪蛋白并筛选出最佳用酶,并在单因素实验的基础上采用正交实验确定最佳用酶水解酪蛋白的最佳工艺条件。最后探讨水解产物在细胞培养中的应用。结果表明,胰酶水解效果最好,用其在底物浓度15%,E/S=1∶5、水解压力150 MPa,温度为45℃,pH 7.5条件下水解4h后水解产物中游离氨基酸含量高达52.18%。酶解产物对BHK-21细胞没有细胞毒性,而具有促生长作用。这为酪蛋白的进一步开发利用和蛋白质水解产物在细胞培养中的应用奠定基础。 | 靳冬武 魏锁成 冯玉萍 马忠仁 郑荣 李明生 | 2016 | 天然产物研究与开发2016，28，12： | 3 |
| 3 | 天然高分子细胞培养基质的研究进展显示文摘天然高分子材料如壳聚糖、丝素蛋白和胶原蛋白等具有异体抗原性弱、生物相容性好、可生物降解且能促进细胞粘附、生长和增殖等优点。同人工合成高分子材料相比,天然高分子几乎不含有机溶剂和引发剂等物质,生物安全性高,是细胞培养基质的首选原材料。近年来,随着生物科技的发展,其新功能也不断被发现并受到学术界的广泛重视。本文综述了天然多糖类和天然蛋白质类高分子材料的理化性质及在细胞培养基质领域中的应用,对目前所存在的一些问题进行了描述并预测其发展动向。 | 龙仕和 李明生 靳冬武 马忠仁 冯玉萍 | 2015 | 高分子通报2015，，2： | 1 |
| 4 | 水解乳蛋白的制备及在细胞培养中的初步应用显示文摘采用正交法优化复合酶(胰酶和中性蛋白酶)水解凝乳酶干酪素制备水解乳蛋白(lacto-protein hydrolysate,LPH)的制备工艺,通过BHK和Vero细胞的培养效果检测水解乳蛋白的促细胞生长作用。结果显示水解乳蛋白的最佳制备工艺为:胰酶∶中性蛋白酶=2∶1(质量比),40℃,pH 7.0,酶/底物(E/S)=1∶5(质量比)水解6 h。所得产物氨基氮含量3.21 g/L,多肽含量35.63 g/L,游离氨基酸含量14.17 mg/mL,收率达40.20%。BHK和Vero细胞培养24 h,细胞密度均为各自空白的2.0倍,分别为Hyclone产品的1.0倍和0.86倍;培养48h,分别为各自空白的5.0倍和4.0倍,均为Hyclone产品的0.88倍。因此,该工艺简单,耗时短,制备得水解乳蛋白对BHK和Vero细胞生长有明显的促进作用。 | 田伟 冯玉萍 李明生 崔梦楠 靳冬武 龙仕和 马忠仁 | 2014 | 天然产物研究与开发2014，26，1： | 4 |
| 5 | 淀粉微载体的制备及对CHO-K1细胞培养的初步应用显示文摘以普通市售马铃薯淀粉为原材料,在常温下利用W/O乳化方法制备了交联淀粉微球,并以二乙胺基乙基修饰了微球的表面电荷。同时研究了制备淀粉微球的制备工艺和改性工艺,成功制备了适合细胞培养用的淀粉微载体。利用扫描电镜(SEM)、红外(FT-IR)、X射线衍射仪(XRD)对微球进行了表征。结果表明,最佳制备条件为:淀粉溶液浓度为7%,搅拌速度为500 rpm,交联剂用量为8%,水油相体积比1∶6;微球表面修饰最佳条件为:加入微球质量2倍体积的3.5 mol/L NaOH溶液和2.5 mol/L DEAE-HCl溶液,60℃密闭反应4 h。对比Cytodex-1微载体,培养CHO-K1细胞至144 h时,淀粉微载体表面细胞密度达到1.8×10~6cells/mL,且两者培养效果相似,表明了自制淀粉微载体是一种潜在的贴壁细胞培养用高分子材料。 | 张磊 李明生 郑荣 张健 靳冬武 马忠仁 冯玉萍 | 2017 | 天然产物研究与开发2017，29，3： | 4 |
| 6 | 酶解制备牦牛乳酪蛋白降血压肽的初步研究显示文摘目的:牦牛乳富含酪蛋白,其经酶解制备的降血压肽以安全性高、无副作用等优点已成为乳品开发和高血压防治药物研究的新热点.方法:本实验对从牦牛乳中提取的酪蛋白,依据复合蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及胰蛋白酶各自的最适pH及温度采用酶解方法制备降血压肽,并且以ACE抑制活性为指标初步筛选最佳水解酶.结果:五种酶ACE抑制肽抑制率分别为:复合蛋白酶为39.02%,中性蛋白酶为67.48%,碱性蛋白酶为56.10%,木瓜蛋白酶为71.54%,胰蛋白酶为8.94%.结论:说明,在最适pH及温度条件下,木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为制备降血压肽的最佳酶选,这为后续进一步的制备降血压肽实验提供依据. | 李倬 李明生 田伟 张福梅 李云龙 靳冬武 马忠仁 冯玉萍 | 2013 | 西北民族大学学报(自然科学版)2013，34，1： | 3 |
| 7 | 院前使用抗凝剂对颅脑损伤后预防VTE的影响显示文摘目前,抗凝治疗(包括抗血小板药物)在常见心血管疾病救治中的应用越来越广泛,然而这种抗凝治疗给颅脑损伤(TBI)后的患者在预防静脉血栓栓塞症(VTE)方面带来了困难和挑战。且TBI后VTE预防性抗凝治疗的药物选择与TBI的治疗效果明显相关。目前对院前正在抗凝治疗的TBI患者在预防VTE方面抗凝剂的选择、抗凝剂过量的对抗以及检测方法等方面仍没有成熟统一的观点。院前抗凝剂的使用对TBI后抗凝治疗的影响有两个方面:一方面院前抗凝剂使用带来的出血等副作用,另一方面TBI能进一步增加改变凝血障碍的可能性。本综述除了总结院前常用的抗凝剂的药物特点,也介绍了与之相关的各种检测手段的优缺点,目的是对院前已经使用过抗凝治疗的TBI患者在预防VTE方面提供全面的参考和指导。 | 黄月明 杨冬武 李港 韩光魁 崔昌萌 靳峰 | 2018 | 中华神经创伤外科电子杂志2018，4，1： | 2 |
| 8 | 胰蛋白酶激活条件优化及其在细胞培养中的应用显示文摘基于猪胰脏提取胰蛋白酶,以酶活力为衡量指标,在单因素试验的基础上通过正交试验探讨了胰蛋白酶原的激活条件,并通过离子交换层析纯化胰蛋白酶,最后探讨胰蛋白酶对BHK-21和Vero两种贴壁依赖性细胞的消化效果。结果表明,胰蛋白酶原最佳的激活条件为:激活剂浓度0.2 mol/L,pH 8.5,16℃下激活1.5 h,酶活力达到2 953.68 U/mg。通过DEAE sepharose FF纯化后其酶活力达到3 980.42 U/mg,纯化倍数达到2.26;细胞消化结果表明,用其消化BHK-21细胞和Vero细胞并连续10代,平均消化时间和细胞增殖浓度与Hyclone和Gibco产品没有明显的差异(p>0.05),每代细胞形态良好,生长正常。该工艺简单,激活耗时短,易于产业化,为胰蛋白酶的国产化和进一步研究奠定理论依据。 | 李明生 靳冬武 张健 冯玉萍 郑荣 张磊 李倬 马忠仁 | 2017 | 食品与生物技术学报2017，36，12： | 2 |
| 9 | 葡聚糖微球在生物医药领域中的应用显示文摘葡聚糖微球自开发以来,已广泛地应用于组织工程、细胞培养、蛋白分离纯化等方面.其既可以作为药物的控释载体,又可以作为种子细胞扩增培养的载体.目前,在生物制药领域下游分离纯化技术越来越受到关注的背景下,作为柱层析凝胶和分离层析介质的葡聚糖微球也越来越受到科学家的青睐.文章对葡聚糖微球自研究以来的重大历史性突破及当代科学前沿的应用成果加以总结和介绍,着重介绍了葡聚糖微球在医药、疫苗开发、凝胶层析三个方面的应用现状. | 张健 李明生 靳冬武 张磊 马忠仁 冯玉萍 | 2015 | 西北民族大学学报(自然科学版)2015，36，3： | 2 |
| 10 | 高压酶解卵清蛋白的工艺优化及其在BHK-21细胞培养中的初步应用显示文摘采用高压技术水解卵清蛋白,以水解度为指标,对6种酶的水解效果进行比较,筛选出最佳水解用酶;在单因素实验的基础上,采用正交实验的方法对高压酶解卵清蛋白的工艺进行优化,并对酶解产物在BHK-21细胞培养中的应用进行了初步探讨。结果表明:6种酶中胰酶的水解效果最好,水解最佳工艺为:压力120 MPa、温度50℃、p H值7.0和酶/底物(E/S)=1∶2.5(质量比),水解度达到45.13%;用酶解产物培养BHK-21细胞,细胞生长形态良好,在培养168 h后,试验组细胞最大密度达到6.69×105cells/m L,是对照组的1.56倍,细胞数量增大了33.45倍,说明卵清蛋白酶解产物有明显的促细胞生长效果,为其在细胞培养中的应用提供了理论依据。 | 张健 李明生 靳冬武 张磊 郑荣 马忠仁 冯玉萍 | 2016 | 天然产物研究与开发2016，28，9： | 1 |
| 11 | 常温下制备豌豆淀粉微球的方法及对亚甲基蓝的吸附性能研究显示文摘以普通豌豆淀粉为原料,在常温下利用W\O乳化方法制备交联淀粉微球(CSM)为吸附载体。研究了制备豌豆淀粉微球的最优制备工艺条件。利用红外(FT-IR)、X射线衍射仪(XRD)、扫描电镜(SEM)对微球进行表征。结果表明当淀粉溶液浓度为7%,搅拌速度为500 rpm,交联剂聚乙二醇二缩水甘油醚用量为8%,水油相比1∶6时,制备出的淀粉微球成球率最高,粒径均一,大小约为150μm。以亚甲蓝为载药模型,吸附实验表明淀粉微球对亚甲基蓝的吸附行为符合Langmiur方程。表明该淀粉微球在吸附药物等领域有广阔的应用前景。 | 张磊 李明生 张健 靳冬武 郑荣 马忠仁 冯玉萍 | 2016 | 甘肃畜牧兽医2016，46，23： | 1 |
| 12 | 胰酶水解凝乳酶干酪素工艺优化显示文摘以天然牧区凝乳酶干酪素为原料,用甲醛滴定法测定水解度,采用单因素试验和正交试验法优化牛源胰酶水解酪蛋白的工艺条件.结果显示,最优工艺条件为:40℃,pH=7.0,E/S=1∶5(重量比)水解4 h.产物水解度可达21.19%,收率达58.27%. | 田伟 冯玉萍 李明生 马忠仁 靳冬武 崔梦楠 龙仕和 | 2013 | 西北民族大学学报(自然科学版)2013，34，2： | 0 |
| 13 | MDCK细胞无血清悬浮培养技术在流感疫苗研究与生产中的应用进展显示文摘流感是一种常见的呼吸道疾病,由流感病毒引起,接种疫苗是预防流感的有效手段。MDCK细胞(Madin-Darby Canine Kidney Cells)具有易于培养和高产量的特点,可以支持流感病毒的复制和增殖,被广泛用于流感疫苗的研究和生产。随着对流感病毒研究的不断深入,为了进一步拓展MDCK细胞用于流感病毒研究和工业应用的能力,研究人员开始发展MDCK细胞无血清全悬浮培养技术。通过长期的培养和优化,驯化的MDCK悬浮细胞株可以更好地适应流感病毒的生长环境,提高流感病毒的产量和感染性。总之,MDCK细胞无血清悬浮培养技术在流感病毒研究和工业应用中发挥着重要作用,为流感疫苗生产和抗流感药物研发提供更好的工具。同时也必须重视MDCK细胞的安全性,采取合适的措施来确保其应用的安全性和可靠性。 | 靳莉武 张震宇 靳冬武 马花 马玉梅 乔自林 王家敏 | 2024 | 生物技术通报2024，40，2： | 0 |
| 14 | 牦牛乳酪蛋白降血压肽对高血压大鼠体内降压效果研究显示文摘目的:观察牦牛乳酪蛋白降血压肽对应激性高血压大鼠(stress induced hypertensive rats,SIHR)和正常Wistar大鼠的降压效果,并与降压药物厄贝沙坦(irbesaran)和卡托普利(Captopril)的作用效果进行比较。方法:采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶水解制备牦牛乳酪蛋白降血压肽,分别以20 mg/kg、40 mg/kg和60 mg/kg剂量的牦牛乳酪蛋白降血压肽一次灌胃,每隔2 h测量SIHR收缩压(SBP),连续测量8 h;长期实验持续6周,每天60 mg/kg一次灌胃,每隔1周测量SBP一次。结果:SIHR给予牦牛乳酪蛋白降血压肽后,血压均显著下降(P<0.05),并均在灌胃后3-6 h达最低,血压下降最大幅度为(27±5.13)mmHg,呈现一定的量效关系;而正常大鼠给予牦牛乳酪蛋白降血压肽后血压无显著变化,服用厄贝沙坦和卡托普利后血压则保持显著下降的趋势。长期灌胃牦牛乳酪蛋白降血压肽可使SIHR血压明显下降(P<0.05),并且降压效果稳定。结论:牛乳酪蛋白降血压肽对SIHR有明显的体内降压效果,长期服用可稳定血压,对正常大鼠血压无明显影响。 | 冯玉萍 李倬 张福梅 陈诚 田伟 靳冬武 龙仕和 崔梦楠 暴艳敏 | 2014 | 中兽医医药杂志2014，33，3： | 3 |
| 15 | 流式细胞术优化MDCK细胞基因转染效率的研究显示文摘为探究脂质体介导的MDCK细胞基因转染效率,并获得最佳的优化方案,本研究选取不同配比的质粒和脂质体浓度,将p-EGFP-C1质粒转入MDCK细胞.转染后36 h,利用台盼蓝染色法检测细胞活率,流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况和转染效率,获得优化的转染条件.结果发现,转染后MDCK细胞,实验组细胞活力与阴性对照组差异不显著(P>0.05).当质粒(μg)∶脂质体(μL)浓度配比为0.5∶1.0、0.5∶1.25、0.5∶1.5时,转染率达到了较高水平,分别为(23.4±3.4)%、(24.5±4.5)%、(25.2±3.7)%,从经济因素考虑,脂质体介导的MDCK细胞基因转染质粒(μg)与脂质体(μL)的最佳配比浓度为0.5∶1.0.这为MDCK细胞用于基因转染提供了一定的理论基础. | 王家敏 王美皓 马玉梅 靳冬武 赵彩红 李自良 乔自林 马忠仁 | 2020 | 西北民族大学学报(自然科学版)2020，41，1： | 1 |
| 16 | 瑞士乳杆菌发酵制备牦牛乳酪蛋白源性降血压肽的工艺研究显示文摘目的:以牦牛乳源酪蛋白为原料,利用瑞士乳杆菌,对发酵法制备降血压肽的工艺进行初步探讨.方法:试验首先采用凝乳酶沉淀法从牦牛乳中提取酪蛋白,依据瑞士乳杆菌的发酵特点,按5%(体积比)接菌量进行发酵制备降血压肽.然后并以降血压肽对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制率为指标,主要探讨了底物浓度、pH值、发酵时间三因素对瑞士乳杆菌发酵法制备降血压肽工艺的影响.结果:在接菌量为5%,其他三因素各设置五个水平进行工艺优化,最优工艺条件为:底物浓度4%、发酵pH值8.0、发酵时间16 h.此工艺条件下ACE抑制率可达约68%.结论:通过实验说明底物浓度、pH值、发酵时间等参数的控制对发酵酪蛋白制备抑制肽很重要,此试验数据为后续进一步完善制备降血压肽的实验奠定了重要的基础. | 张福梅 李倬 刘乐乐 田伟 靳冬武 李明生 央珂 韩玉梅 | 2013 | 西北民族大学学报(自然科学版)2013，34，2： | 1 |
| 17 | 细胞培养用琼脂微球的制备与初步应用显示文摘用4%的琼脂溶液作为水相,环己烷为油相,司盘-80为乳化剂,采用乳化分散法制备了琼脂微球,再通过化学交联法固化.用DEAE-HCl修饰了微球表面的电荷密度,并通过正交试验优化了改性工艺,最终制得细胞培养用琼脂微球.通过对比研究了Cytodex1微载体与琼脂微球的表征及细胞培养效果.结果显示,最优改性工艺为:加入微球2倍体积4.5 mol/L的Na OH溶液,再加入微球2倍体积2.5 mol/L的DEAE-HCl溶液,在搅拌状态下加热至60℃,密闭反应4 h.最终制得琼脂微球表面电荷密度为4.00 mmol/100 g,与Cytodex1微载体的4.05 mmol/100g几乎相当.静置培养时,四种细胞在两种微球上的贴壁率和伸展性各有优劣.悬浮培养BHK-21细胞时,Cytodex1微载体表面出现一定程度的'空球'现象,而琼脂微球表面细胞较均匀地伸展.培养至120 h时,两种微球表面的细胞均达到4.5×107cells.继续培养,Cytodex1表面的细胞数开始下降,而琼脂微球表面仍增殖至168 h时才开始下降.综上所述,自制琼脂微球具备作为细胞培养用材料的条件. | 崔梦楠 李明生 张健 张磊 马素娟 龙仕和 靳冬武 冯玉萍 | 2014 | 西北民族大学学报(自然科学版)2014，35，4： | 1 |
| 18 | 一种血清替代物对MDCK细胞培养特性的研究显示文摘为评估一种血清替代物(Billion cell)支持动物细胞体外培养的效果,分别在含10%Billion cell(3个储存温区37℃、4℃、-20℃)和10%FBS的DMEM培养液中连续传代培养MDCK细胞,利用传代稳定性观察、克隆形成率、绘制生长曲线及生长动力学分析的方法,评价Billion cell对MDCK细胞促生长效果的影响.结果显示:静置培养,-20℃、4℃储存温区的Billion cell和FBS能较好促进MDCK细胞增殖,平均集落形成率从高到低依次为-20℃Billion cell、FBS、4℃Billion cell、37℃Billion cell;生长动力学分析发现平均比生长速率、平均倍增时间和最大增殖浓度从高到低依次为-20℃Billion cell、FBS、4℃Billion cell、37℃Billion cell,故-20℃储存温区的Billion cell支持MDCK细胞培养效果最佳且优于FBS.通过Billion cell对MDCK细胞培养效果影响的研究,旨在开发替代牛血清支持动物细胞培养的有效血清替代物,为生物制品生产提供必要条件. | 王美皓 王家敏 刘文凯 佛生福 靳冬武 马玉梅 马忠仁 乔自林 丁功涛 | 2020 | 西北民族大学学报(自然科学版)2020，41，2： | 1 |
| 19 | 牦牛胰酶的制备及其在水解乳蛋白中的应用研究显示文摘基于牦牛胰脏提取胰酶,以酶活力和收率作为衡量指标,在单因素实验的基础上通过正交实验,确定牦牛胰酶制备的最佳工艺,最后探讨胰酶水解酪蛋白制备水解乳蛋白的效果。结果表明,牦牛胰酶最佳制备工艺为牦牛胰脏∶25%乙醇(提取剂)=1∶1,提取激活时间为5h,激活p H=6.8,75%乙醇沉淀8h。所得胰酶中胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶的酶活力分别为1867、16298和5683 U/g,收率达9.7%;用其在温度40℃,p H7.5,酶与底物比例为1∶5的条件下水解酪蛋白4 h后所得的水解乳蛋白与Hyclone的水解乳蛋白相比较,有19种相同的氨基酸,且氨基酸总含量高于Hyclone的水解乳蛋白,分别为36.111%和27.725%。综上可知,该工艺简单,耗时短,易于产业化,在水解蛋白质领域中具有良好的应用前景。 | 靳冬武 李明生 龙仕和 崔梦楠 马素娟 张健 张磊 李倬 冯玉萍 马忠仁 | 2015 | 食品工业科技2015，36，15： | 0 |
| 20 | 酶解牦牛乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究显示文摘目的:乳清蛋白是牦牛乳中的重要成分,其经酶解制备的乳源性ACE抑制肽以安全性高和无副作用等优点在高血压的防治中具有重要的研究和应用价值.本实验研究利用乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺技术.方法:本实验对从牦牛乳中提取的乳清蛋白,分别根据碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶及胃蛋白酶各自的最适pH及温度,采用酶解法制备ACE抑制肽,以ACE抑制活性为指标初步筛选出最佳水解酶,并探究最佳酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳反应条件.结果:碱性蛋白酶为制备ACE抑制肽的最佳水解酶,其最佳反应条件为:pH8.5、温度60℃、E/S为5.5%、水解6 h.制备的ACE抑制肽抑制率可达到85.2%.结论:碱性蛋白酶为最佳酶选,用碱性蛋白酶制备的ACE抑制肽体外抑制率较高,符合工业生产要求.这为进一步优化乳清蛋白降血压肽的制备工艺提供依据. | 冯玉萍 李倬 曾鸿运 田伟 靳冬武 龙仕和 崔梦楠 暴艳敏 马桂兰 | 2013 | 西北民族大学学报(自然科学版)2013，34，2： | 0 |
您所在的机构暂未开通此部分的功能，请联系管理员