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| 1 | 浙贝母碱逆转白血病细胞多药耐药的研究显示文摘 | 胡凯文 郑洪霞 齐静 侯丽 左明焕 陈信义 孙颖立 许元富 邵晓枫 杨纯正 | 1999 | 中华血液学杂志1999，20，12： | 63 |
| 2 | 阿霉素诱导的人白血病细胞系K562/A02多药抗药性(英文)显示文摘目的:研究白血病细胞多药耐药发生的机制. 方法:用逐步增加培养基中阿霉素(Dox)浓度的方法,诱导出一株耐Dox的人白血病细胞系K562/A02.用[~3H]TdR参入法测定IC_(50),HPLC法测定细胞内药物浓度,免疫组织化学法检测P-糖蛋白的表达,RT-PCR法测定mdr1基因表达,点杂交测定基因组中mdr1DNA和拓扑异构酶Ⅱ(TopⅡ)基因表达,CDNB法测定谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性. 结果:K562/A02对Dox、HHT、Dau、VCR、m-AMSA、VP-16具有较强的交叉耐药性,而对Ara-C耐药较弱,对5-FU、Cis和MTX不交叉耐药,表现出典型的多药耐药表型.K562/A02细胞内药物浓度明显低于K562细胞,P-170阳性表达.K562/A02细胞中MDR1基因拷贝数与K562的无差异,但mdr1mRNA高表达.TopⅡ的mRNA水平低于K562,GST的活性增高. 结论:白血病细胞多药耐药的机制与mdr1基因表达密切相关,也与TopⅡ和GST有关. | 杨纯正 栾凤君 熊冬生 刘炳仁 许元富 顾孔书 | 1995 | 中国药理学报1995，16，4： | 23 |
| 3 | 抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达显示文摘构建和表达抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用亲和层析法纯化该产物 ,并用Westernblot和分子排阻层析鉴定纯化产物 ;采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明 :抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体已构建成功 ,表达可溶性产物的产量达 2mg L以上 ,纯化产物中二聚体的比例达 90 % ,具有与Jurkat(CD3 + )和K5 62 A0 2细胞 (Pgp+ )结合的活性 ,与抗CD3ScFv及抗PgpScFv的亲合常数相当。成功地构建了抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并获得高效表达 。 | 高瀛岱 熊冬生 许元富 彭晖 邵晓枫 杨纯正 朱祯平 | 2003 | 生物工程学报2003，19，4： | 18 |
| 4 | 抗人VEGF受体Ⅱ胞外Ⅲ区单克隆抗体的制备显示文摘目的 制备人血管内皮细胞生长因子受体Ⅱ (Kinaseinsertdomaintontainingreceptor,KDR)胞外Ⅲ区的单克隆抗体 (McAb) ,探讨其抑制VEGF诱导的体外活性。方法 在大肠杆菌中表达重组KDR胞外Ⅲ区融合蛋白。融合蛋白经抗E tag柱分离纯化后免疫Balb/c小鼠 ,采用传统杂交瘤技术制备抗KDR胞外Ⅲ区McAb ,采用ELISA和Western免疫印迹鉴定其亚类和抗原结合特异性 ,并测定单克隆抗体对VEGF1 65刺激脐静脉内皮细胞株ECV30 4增殖的中和活性。结果 成功筛选出一株能稳定分泌抗KDR胞外Ⅲ区单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (1D3) ,其分泌抗体亚类为IgG1。该McAb可明显阻断VEGF1 65对脐静脉内皮细胞株ECV30 4的刺激增生作用。结论 抗人血管内皮细胞生长因子受体KDR胞外Ⅲ区McAb可通过封闭KDR而抑制VEGF活性 ,McAb | 李容 熊冬生 邵晓枫 李长辉 许元富 刘嘉 杨纯正 | 2003 | 免疫学杂志2003，19，3： | 14 |
| 5 | 白血病患者多药耐药相关蛋白基因和多药耐药基因mdr1的表达及其临床意义显示文摘应用半定量逆转录-多聚酶链反应技术检测了29例白血病患者骨髓细胞中多药耐药相关蛋白(MRP)基因的表达,同时用间接免疫荧光法检测了每例患者的P糖蛋白(Pgp)的表达。发现临床耐药组Pgp过度表达占45.5%,MRP过度表达占63.6%;临床不耐药组分别占5.56%和16.67%。 | 杨仁池 杨纯正 郝玉书 邵晓枫 熊冬生 许元富 卞寿庚 | 1996 | 中华血液学杂志1996，17，2： | 14 |
| 6 | 急性白血病化疗后感染初始体温峰值与粒细胞缺乏持续时间的相关性及其机制显示文摘目的:探讨急性白血病患者化疗后感染初始体温峰值与粒细胞缺乏持续时间之间的相关性及其潜在机制。方法:本研究纳入单中心行巩固化疗的粒缺感染的CR1期急性白血病患者111例,回顾性分析感染初期体温峰值与粒细胞缺乏持续时间之间的相关性,以及不同体温峰值患者血清中IL-6水平的差异。建立单细胞体外培养体系及检测体内EdU掺入率,分析IL-6对小鼠造血干/祖细胞的作用。结果:本研究纳入的111例粒细胞缺乏感染患者中,44例患者体温低于38℃,其粒细胞缺乏持续时间9.5±3.69 d;高于38℃的患者(67例),其粒细胞缺乏时间为7.33±4.20 d,2组间具备统计学差异(P=0.006)。EdU检测显示,EdU掺入阳性的造血干/祖细胞增多同时,IL-6水平在不同初始体温峰值的患者中具有显著性差异(P<0.05)。动物实验结果显示,IL-6在体外及体内均可促进小鼠造血干/祖细胞的增殖。结论:对于粒细胞缺乏感染患者,初始体温峰值低于38℃,则化疗后粒细胞缺乏持续时间延长概率增加,其机制可能与促炎症因子促进造血干/祖细胞增殖有关。 | 张潇予 翟卫华 张荣莉 何祎 姜尔烈 伊马秀夫 许元富 冯四洲 韩明哲 | 2018 | 中国实验血液学杂志2018，26，3： | 12 |
| 7 | 细胞凋亡的抑制和肿瘤细胞耐药显示文摘细胞凋亡的抑制和肿瘤细胞耐药许元富杨纯正肿瘤细胞耐药是导致化疗失败的主要原因之一。多年的研究表明肿瘤细胞大致通过三个阶段(即①药物与靶作用之前;②药物与靶作用;③靶饱和以后的相应防御)来增强其在恶劣环境中的生存能力,从而残存下来,成为不缓解或再次复发... | 许元富 杨纯正 | 1997 | 中华血液学杂志1997，18，6： | 11 |
| 8 | 儿童实体恶性肿瘤多药耐药基因的表达显示文摘目的:测定儿童实体恶性肿瘤多药耐药基因(mdr 1)的表达,及其产物 P-糖蛋白(P-gp)。方法:17例儿童实体恶性肿瘤组织,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)定量检测其 mdr1mRNA 表达水平。其中15例同时应用 APAAP 免疫酶标组化法测定其 P-gp。结果:实验显示mdr1 mRNA 阳性率为82.4%(14/17),P-gp 阳性率为80.0%(12/15)。两者阳性符合率为86.7%(13/15),四格表精确概率计算两者差异无显著性意义(P>0.05)。提示 mdr1 过量表达是引起儿童实体恶性肿瘤细胞多药耐药性的重要机理。结论:mdr1 mRNA 及 P-gp 的检测,对指导临床医生预测儿童实体恶性肿瘤细胞对化疗药物的反应性、评估疗效及预后有重要意义。 | 王珊 金先庆 杨纯正 许元富 熊冬生 许嘉陵 | 1997 | 中华小儿外科杂志1997，18，5： | 9 |
| 9 | 急性白血病多药耐药相关蛋白基因表达及其与免疫表型和FAB分型的关系显示文摘为探讨急性白血病(AL)患者多药耐药相关蛋白(MRP)基因表达与FAB亚型及免疫表型的关系,应用半定量逆转录-多聚酶链反应技术检测了54例AL患者MRP基因的表达。以正常人或非恶性血液病患者的单个核细胞为对照组。发现临床耐药组MRP基因表达(中位数1.18)高于完全缓解(CR)组(中位数0.22,P=0.0659)。AL各组MRP基因表达均明显高于对照组(中位数0)。MRP基因表达与白血病FAB亚型无关。CD13+与CD13-组MRP基因表达有显著性差异(P=0.0029),而与其它细胞免疫表型无关。根据MRP基因表达在AL各组的分布,将MRP与β2微球蛋白之比大于1.0定为MRP+,临床耐药组MRP+占66.67%,明显高于CR组(20%,P=0.0213) | 杨仁池 杨纯正 郝玉书 熊冬生 邵晓枫 许元富 陈桂彬 卞寿庚 | 1996 | 中华血液学杂志1996，17，7： | 9 |
| 10 | 白细胞介素2和α干扰素逆转白血病细胞多药耐药的研究显示文摘目的:探讨细胞因子对人白血病细胞系K562/S及其多药耐药细胞系K562/A02的影响。方法:以MTT法测定小剂量细胞因子作用后柔红霉素(DNR)的毒性变化;用荧光法测定细胞内药物浓度;用免疫组化法检测p-膜糖蛋白(p-gp)变化;用RT-PCR法检测多药耐药基因(mdr-1)mRNA。结果:发现DNR对K562/A02及K562/S的半数抑制率(IC50)分别为45.08μg/ml及0.607μg/ml。α干扰素(IFN-α)和白细胞介素2(IL-2)作用24小时可增加DNR对K562/A02的细胞毒作用,与未加药组相比IC50下降为16.39及11.96μg/ml,但不影响K562/S细胞(IC50无明显改变)。且IFN-α、IL-2可提高细胞内DNR浓度,从未加药组的2151ng/mg蛋白到2570及2503ng/mg蛋白。但p-gp及mdr-1mRNA无明显改变。结论:IFN-α、IL-2可增加DNR对K562/A02细胞的毒性作用,增加K562/A02细胞内的药物浓度,但不是通过下调mdr-1mRNA机制而起逆转作用。 | 刘丽辉 刘复强 杨纯正 祁雅慧 杨凌 齐静 许元富 | 1997 | 中华血液学杂志1997，18，12： | 8 |
| 11 | 抗Pgp抗体PHMA02在肿瘤临床中的应用研究及预后分析显示文摘目的:应用单抗PHMA02 对148 例肿瘤患者P- 糖蛋白(Pgp)的表达进行检测,并对该单抗的特异性、检测结果与临床符合率以及预后的准确性进行评估。方法:应用免疫组化法检测了47 例实体瘤标本,应用药敏实验检测15 例儿童恶性肿瘤;应用间接免疫荧光法、RT- PCR 法和药敏实验检测了101 例急性白血病(AL) 患者;用医学统计软件分析数据。结果:1) 在47 例实体瘤标本中,儿童恶性肿瘤中多药耐药阳性( MDR+) 表达率较高(867 %) ,乳腺癌淋巴结转移灶中MDR+ 表达率为667% ,显著高于乳腺癌原发灶的300 % ( P< 001) 。2) 在101 例急性白血病(AL) 患者中,难治和复发组的MDR+ 表达率(529 % )显著高于初诊组(192 % )( P< 001)。3) 单抗PHMA02 的检测结果与国外同型单抗JSB- 1 的平行检测结果呈正的直线相关( P<005) ,与RT- PCR 的检测结果具有相关性(P< 001) ;部分标本的药敏实验结果与单抗PHMA02 的检测结果基本一致。结论:1) 单抗PHMA02 的检测结果与临床有较好的符合率,可在临床上应用。2)Pgp 在成人肺癌和乳腺癌中均有一? | 许元富 杨纯正 熊冬生 邵晓枫 王珊 孙云晖 薛艳萍 李维廉 | 1999 | 中国肿瘤临床1999，26，9： | 8 |
| 12 | 人4-1BBL胞外区基因的克隆与表达研究显示文摘用RTPCR方法从人单核THP1细胞系克隆人41BBL胞外区基因,将其重组到pAYZ表达载体中,构建成人41BBL胞外区基因表达载体。将该载体转化大肠杆菌16C9,获得稳定表达,表达产物主要以可溶性状态存在;SDSPAGE和Westernblot分析显示,其分子量约为22kD,与预期结果一致。这是首次在大肠杆菌中获得41BBL胞外区可溶性表达。生物学活性检测显示41BBL对于维持T淋巴细胞系因子释放非常有益,同时PI单染表明它能抑制Jurkat细胞的凋亡。这将在抗肿瘤免疫治疗中具有潜在应用前景。 | 姜文国 熊冬生 邵晓枫 王金宏 许元富 刘芳 郭红星 朱祯平 杨纯正 | 2005 | 生物工程学报2005，21，5： | 7 |
| 13 | 抗抗CD3 ScFv单克隆抗体的制备及鉴定显示文摘目的:制备抗抗CD3 ScFv单克隆抗体并研究其生物活性。方法:分离纯化后的抗CD3 ScFv蛋白免疫BALB/c小鼠,采用传统杂交瘤技术制备抗抗CD3 ScFv单克隆抗体;采用ELISA和Western blot鉴定其亚类和抗原结合特异性;采用FACS测定抗抗CD3 ScFv单克隆抗体对Jurkat细胞特异活性。结果:成功筛选出一株能稳定分泌抗抗CD3 ScFv单克隆抗体的杂交瘤细胞株(10B7),其分泌的抗体亚类为IgG1。该抗抗CD3 ScFv单克隆抗体直标后可特异性结合抗CD3 ScFv蛋白和抗CD3抗体。结论:文中所研制的抗抗CD3 ScFv单克隆抗体具有与抗CD3抗体、抗CD3 ScFv蛋白特异结合的活性,在肿瘤导向治疗中抗CD3/抗肿瘤双特异抗体的亲和层析纯化、药代动力学监测等方面具有广泛的应用前景。 | 邵晓枫 熊冬生 高灜岱 许元富 郭红星 刘芳 郭桂庆 杨纯正 | 2007 | 中国免疫学杂志2007，23，2： | 7 |
| 14 | 抗CD_(20)嵌合抗体Fab’片段在大肠杆菌中高效表达显示文摘利用PCR方法从抗CD2 0 ScFv表达载体上扩增重链可变区 (VH)、轻链可变区(VL)基因 ,然后将VH、VL 基因重组到Fab’表达载体中 ,构建成抗CD2 0 嵌合抗体Fab’片段表达载体 pYZFcd2 0 ,用pYZFcd2 0转化大肠杆菌 16C9,在 16C9菌中分泌表达可溶性抗CD2 0 Fab’片段 ,经分离纯化获得具有CD2 0 抗原特异结合活性的Fab’片段 ,竞争性免疫荧光抑制实验表明 ,抗CD2 0 Fab’片段能竞争性抑制亲本鼠源性抗CD2 0 单克隆抗体HI4 7和Daudi细胞CD2 0 | 赖增祖 熊冬生 许元富 朱祯平 范冬梅 彭晖 邵晓枫 杨纯正 | 2000 | 高技术通讯2000，10，4： | 7 |
| 15 | 抗Pgp/抗CD3双特异双链抗体的生物学活性研究显示文摘目的 研究抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体介导的特异性靶向杀伤活性。方法 采用亲和层析法分离纯化本室构建的抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体可溶性表达产物 ,并用SDS PAGE、Westernblot及抗活细胞间接免疫荧光法鉴定纯化产物 ;采用51 Cr释放试验测定其介导的体外靶向杀伤活性。结果 纯化的抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体具有与Jurkat细胞 (CD3+ )和K5 6 2 A0 2 (Pgp+ )细胞结合的活性 ;抗Pgp 抗CD3双特异双链抗体具有介导激活的T淋巴细胞杀伤Pgp表达阳性的耐药肿瘤细胞的作用 ,杀伤作用的强弱显示出效靶比和剂量依赖关系 ,且可被CD3ScFv或PgpScFv特异性的阻断。结论 抗Pgp 抗CD3微型双功能抗体有望成为治疗耐药肿瘤 ,特别是肿瘤残留灶和微小转移灶的治疗的一种新策略。 | 高瀛岱 熊冬生 许元富 杨铭 彭晖 邵晓枫 刘汉芝 杨纯正 | 2004 | 中华微生物学和免疫学杂志2004，24，5： | 7 |
| 16 | 蛋白激酶C在K562/AO2细胞多药耐药中作用的初步研究显示文摘蛋白激酶C在K562/AO2细胞多药耐药中作用的初步研究赵春亭杨纯正邵晓枫熊冬生许元富齐静杨天楹多药耐药(MDR)的产生与多种因素有关,有关蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)是否在MDR中起作用国内未见报道,国外尚存在争议,PKC分布... | 赵春亭 杨纯正 邵晓枫 熊冬生 许元富 齐静 杨天楹 | 1998 | 中华血液学杂志1998，19，5： | 6 |
| 17 | 抗P-gp单克隆抗体的制备和鉴定显示文摘mdr1基因的表达产物P糖蛋白(P170,Pgp)作为一种外排泵,在ATP的参与下,可将细胞内的药物运到细胞外,从而使细胞产生多药耐药(MDR)。我们利用杂交瘤技术制备了一株抗Pgp单抗,并初步探讨了其在临床上的应用前景。材料和方法1细胞系HL... | 熊冬生 杨纯正 邵晓枫 许元富 许立忠 栾凤君 王小华 | 1999 | 中华血液学杂志1999，20，6： | 6 |
| 18 | 人B淋巴瘤裸鼠腹腔内移植模型显示文摘目的:建立人 B淋巴瘤裸鼠移植瘤腹腔模型,主要是为了研究抗 CD20/CD3双功能抗体对人 B淋巴瘤的治疗作用。方法:采用5周龄左右的雌性BALB/c-nu,腹腔注射pristane 0.2ml/只 2次,经60Co照射,3天后腹腔接种人B淋巴瘤细胞株(Raji)1×10~7/只,并于第 2天随机分组用预先激活的T细胞加入双功能抗体进行治疗,每周腹腔给药 1次,共4次。结果:人B淋巴瘤细胞株(Raji)裸鼠腹腔移植,接种38只均获成功,成瘤率100%。染色体检查证明为人类染色体特征,病理形态学观察,瘤块主要分布于腹腔、肠系膜、淋巴结、贴近肠壁处,并且CD19、CD20,HLA—DR阳性率达95%以上,对照组40天时全部死亡,治疗组存活至100天处死。结论:成功地建立了人类B淋巴瘤裸鼠移植瘤腹腔模型,经过实验证明,抗CD3/抗 CD20。双功能抗体有很好地抑癌作用。 | 邵晓枫 杨纯正 熊冬生 许元富 彭晖 赖增祖 朱祯平 | 2001 | 中国肿瘤临床2001，28，3： | 6 |
| 19 | 应重视肿瘤耐药机制和耐药基因检测研究及应用显示文摘 | 杨纯正 许元富 齐静 | 2005 | 中华检验医学杂志2005，28，12： | 6 |
| 20 | 人VEGF受体II基因3区的克隆、表达研究显示文摘用RT PCR法从人胎儿脐静脉内皮细胞中克隆人VEGF受体II基因 3区 ,将其重组到 pAYZ表达载体中 ,构建成人VEGF受体II基因 3区表达载体。将该载体转化大肠杆菌 16C9,获得稳定表达 ,表达产物以可溶性状态存在 ;SDS PAGE和Westernblot分析显示 ,其分子量约为 14kD。以纯化的表达产物免疫Balb/c小鼠 ,眼球采血制备抗血清 ,抗血清效价在 10 3以上 ,并具有抑制VEGF诱导内皮细胞增殖的作用 ,在抑制肿瘤血管新生中具有潜在的应用前景。 | 熊冬生 刘嘉 邵晓枫 李蓉 许元富 彭晖 范冬梅 朱祯平 杨纯正 | 2002 | 高技术通讯2002，12，5： | 5 |
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