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| 1 | 我国临床流式细胞术的应用现状和展望显示文摘目前流式细胞术(VCM)是先进的细胞定量分析技术之一,FCM在医学及其他科学领域有着广泛和深入的应用,涵盖了从基础研究到临床诊断的多个方面。随着科学技术的快速发展,近年来我国FCM的临床研究与应用取得了显著进展。 | 沈立松 王维维 袁向亮 | 2016 | 中华检验医学杂志2016，39，5： | 15 |
| 2 | 不同流式细胞分析仪检测淋巴细胞亚群的比较研究显示文摘目的通过对淋巴细胞亚群百分比及绝对计数的检测,对比3种流式细胞仪(BriCyteE6、BDFACSCantoⅡ、Beckman Coulter FC500)在淋巴细胞亚群检测中的一致性和精密度。方法按照方法学对比的要求,将BriCyteE6与2种临床常用的流式细胞仪进行比对。2015年7月连续5d随机收集上海交通大学医学院附属新华医院检验科抽取的新鲜肝素抗凝外周全血标本73份,其中来自男性40例,女性33例,4h内荧光抗体染色分析各淋巴细胞亚群的百分比及绝对计数值。结果在进行淋巴细胞亚群百分比(%)检测时,3种仪器之间均具有较好的一致性(R2〉0.95,R2值0.9695~0.9924);在进行淋巴细胞亚群绝对计数(#)检测时,3种仪器之间亦均具有较好的一致性(R2〉0.95,R。值0.9691—0.9933);评估精密度时发现,在CD8%、T#、CIM+T#和CD8+T#检测时,BriCyteE6的CV%更小,与BD FACSCantoⅡ和Beckman Coulter FC500进行比较,差异有统计学意义(Friedman统计值分别为16.720、11.840、15.760、15.430,相应的P值分别为0.0002、0.027、0.0004、0.0004),而在检测T%、CIM%、NK%、B%、NK#、B#时,在3种仪器间CV%差异无统计学意义(Friedman统计值分别为4.242、3.916、0.852、2.595、1.855、0.578,P值分别为0.1199、0.1412、0.6532、0.2733、0.3996、0.7490),精密度具有一致性。结论3种仪器在淋巴细胞亚群检测时具有较好的一致性,BriCyteE6流式细胞仪或许可以作为现有流式细胞仪的替代或补充。 | 王维维 奚迪 袁向亮 沈立松 | 2016 | 中华检验医学杂志2016，39，5： | 15 |
| 3 | HPLC法测定血清甲氨蝶呤浓度的方法建立及其与荧光偏振法的比较显示文摘目的建立测定血清甲氨蝶呤(MTX)浓度的高效液相色谱(HPLC)法,并与荧光偏振法(FPIA)作比较,评价其临床实用性。方法血清样本经20%高氯酸沉淀蛋白质,吸取上清液进行HPLC分析。以MTX标准品外标法建立标准曲线,检测62例用药后患者血清MTX浓度,同时以FPIA测定。结果 HPLC法在0.049~25 ng/L内线性关系良好,日内及日间相对标准偏差(RSD)均〈6%,最低检测浓度为0.025 ng/L。HPLC法和FPIA具有良好的相关性(r=0.973,P〈0.01),2种方法测定值的差异无统计学意义(P=0.705)。结论 HPLC法具有便捷、准确、成本低等特点,与FPIA相关性良好,适用于临床MTX的血药浓度监测。 | 许耘川 袁向亮 沈立松 | 2010 | 检验医学2010，25，9： | 14 |
| 4 | 基于16S rRNA高通量测序技术分析小鼠实验性结肠炎肠道菌群结构特征显示文摘目的:明确溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)与肠道菌群间的相互关系,为寻找简单、安全的UC治疗方法提供实验基础。方法:通过3%硫酸葡聚糖钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导建立小鼠溃疡性结肠炎模型,观察检测体重变化、肠道病理改变,采用16S rRNA高通量测序技术,检测小鼠粪便中的肠道菌群,并分析比较结肠炎小鼠与正常小鼠间肠道菌群的多样性及丰度。同时,利用已有数据库,预估肠道菌群内的功能基因构成,分析2组间的菌群基因功能差异。结果:溃疡性结肠炎小鼠体重明显减轻,且肠道上皮完整性被破坏,同时肠道菌群多样性明显降低,溃疡性肠炎组小鼠肠道内双歧杆菌属降至0.2%明显低于正常组小鼠(P<0.05),而乳酸杆菌属平均丰度也显著降低至2.9%(P<0.05),提示可能是通过影响机体代谢从而造成溃疡性结肠炎的发生、发展。结论:溃疡性结肠炎小鼠的肠道菌群多样性降低,菌群分布均发生显著改变。 | 汪婷婷 郑乃盛 袁向亮 沈立松 | 2019 | 诊断学理论与实践2019，18，3： | 11 |
| 5 | CD127用于特异性识别调节性T淋巴细胞的方法建立及临床应用评价显示文摘目的建立用膜表面标志CD4cD妒cD劣界定调节性T淋巴细胞的方法,并评价其临床应用意义。方法五色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD127-PE/CD4-PerCP/CD25-APC/CD3-PC7抗体组合鉴定调节性T淋巴细胞,分选CD4CD25^highCD127^low细胞鉴定Foxp3mRNA和蛋白水平的表达情况,比较CD127^low与Foxp3+界定调节性T淋巴细胞的相关性。用该膜表面标志分析20名健康对照者外周血及35例胃癌患者不同部位CD4cD去调节性T淋巴细胞(Treg)细胞的分布特点及意义。结果用CD4CD25^highCD127^low界定调节性T淋巴细胞的Foxp3蛋白表达率为87.1%,Foxp3mRNA高表达。用膜表面抗原CD4CD25^highCD127^low界定调节性T淋巴细胞与CD4CD。sighFoxp3’具有相关性(r=0.985,P〈0.01)。胃癌患者外周血CD4CD25^highCD127^low调节性T淋巴细胞占CD4T淋巴细胞的比例为(8.67±3.52)%,高于健康对照组[(5.12±2.46)%,t=2.542,P〈0.05]。胃癌患者腹腔积液、肿瘤浸润性淋巴细胞、癌旁淋巴结中CD4CD25^highCD127^low调节性T淋巴细胞占CD4T淋巴细胞比例均高于外周血(分别为t=2.357,P〈0.05;t=6.174,P〈0.01;t=5.481,P〈0.01)。胃癌Ⅰ期+Ⅱ期患者外周血CD4CD25^highCD127^low细胞占CD4T淋巴细胞的比例为(6.04±2.31)%,Ⅲ期+Ⅳ期患者为(10.16±2.29)%,其分期差异具有显著统计学意义(t=2.473,P〈0.05)。结论CD4CD。highCD矗≯抗体组合可用于鉴定调节性T淋巴细胞。胃癌患者CD4CD25^highCD127^low调节性T淋巴细胞的比例升高,且增高程度与肿瘤临床分期相关。 | 袁向亮 沈定丰 卢剑 董平 王剑 李美星 沈立松 | 2008 | 中华检验医学杂志2008，31，5： | 11 |
| 6 | 流式细胞术分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞活化试验及其临床意义显示文摘目的建立流式细胞术(FCM)分析嗜碱性粒细胞活化试验(BAT)的方法并评估其在过敏性疾病诊断中的意义。方法以CD63/CD203c/CD45抗体组合,建立用FCM分析户尘螨致敏的嗜碱性粒细胞脱颗粒的方法。以皮肤点刺试验(SPT)作为金标准方法,将FCM检测活化嗜碱性粒细胞与荧光酶联免疫吸附试验(FELISA)测定特异性IgE(sIgE)结果作比较,分析其临床应用价值。结果以CD45和CD203c联合设门,可以得到纯的嗜碱性粒细胞;CD63是活化嗜碱性粒细胞的最佳标志;Spearman相关系数显示,sIgE的Unicap分级与活化嗜碱性粒细胞呈中度相关;FCM检测活化嗜碱性粒细胞与FELISA测定sIgE结果在户尘螨过敏性疾病诊断中的差异无统计学意义(P>0.05),但前者的敏感度、符合率、阳性预测值以及阳性似然比各项指标都优于后者。结论通过FCM分析CD63的表达来确定活化嗜碱性粒细胞是诊断速发型超敏反应的一种有效、安全的体外检测方法。 | 徐翀 王小蕊 蒋黎敏 王连升 袁向亮 潘秀军 沈立松 | 2007 | 检验医学2007，22，3： | 9 |
| 7 | 标本前处理因素对流式细胞术检测淋巴细胞亚群的影响显示文摘目的:探讨抗凝剂、保存时间和保存温度等分析前因素对流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群的影响。方法:随机采集健康人全血10份,分别用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)和肝素钠2种抗凝剂抗凝,4℃及室温(18℃-22℃)保存,在不同时间点(〈4 h、24 h及48 h)分别使用荧光抗体标记,用流式细胞术检测CD3+T淋巴细胞、CD3+CD4+辅助性T细胞、CD3+CD8+杀伤性T细胞、CD19+B淋巴细胞及CD16+CD56+NK细胞占淋巴细胞的百分比,并采用荧光微球进行各淋巴细胞亚群的绝对计数。结果:与2种抗凝剂各自的室温条件下4 h内检测结果相比较,在肝素抗凝剂组中4℃保存至48 h,CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞的绝对计数显著降低(P〈0.05);肝素抗凝血与EDTA-K2抗凝血间在4℃及室温保存至24 h及48 h的淋巴细胞亚群百分比差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论:在检测总淋巴细胞亚群比例及绝对计数时,肝素钠抗凝的全血标本应保存在室温下,并在48 h内完成检测;EDTA-K2抗凝全血标本则可在4℃及室温下保存,在48 h内完成检测。 | 费奇力 王维维 袁向亮 张良 | 2014 | 诊断学理论与实践2014，13，3： | 9 |
| 8 | 肿瘤相关巨噬细胞来源外泌体激活IFN通路促进胃癌细胞免疫逃逸显示文摘为探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophage,TAM)外泌体促进胃癌细胞发生免疫逃逸的机制,采用体外诱导M2型巨噬细胞的方法模拟TAM,通过超速离心法提取M2型巨噬细胞外泌体(M2 macrophages’exosome,M2e),并与胃癌细胞共培养以获得摄取了M2e的胃癌细胞,再与CD8^(+)T细胞进行共培养。使用天冬氨酸半胱氨酸特异性蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-3/7的荧光底物和AnnexinV-7-氨基放线菌素D(7-amino-actinomycin D,7-AAD)试剂检测胃癌细胞的凋亡情况,以评估T细胞的杀伤作用。利用MicroArray技术深入探索M2e影响胃癌细胞的信号通路,并用RT-PCR、Western blotting和流式细胞术对这一信号通路进行进一步的验证。结果显示,胃癌细胞能大量摄取M2e。相比未摄取M2e的胃癌细胞,摄取了M2e的胃癌细胞与活化T细胞共培养后,凋亡比例下降,说明其能减弱CD8^(+)T细胞的杀伤作用。MicroArray结果显示,摄取了M2e的胃癌细胞IFN通路被广泛激活。IFN通路激活能促进胃癌细胞表达PD-L1,进而使活化的CD8+T细胞的杀伤功能减弱,因此胃癌细胞产生了免疫逃逸。该研究揭示,巨噬细胞与胃癌细胞的信息交互作用使胃癌细胞产生了抗免疫杀伤作用,胃癌细胞免疫逃逸可能与TAM外泌体有潜在联系。 | 郑乃盛 汪婷婷 袁向亮 沈立松 | 2021 | 现代免疫学2021，41，1： | 8 |
| 9 | 肿瘤免疫检查点抑制剂的临床不良反应及处理策略显示文摘以细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4)和免疫检查点程序性死亡分子1(programmed death-1,PD-1)/程序性死亡分子配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)抗体为代表的免疫检查点抑制剂(immune checkpoint blockade,ICB)作为一种新型恶性肿瘤治疗药物,在临床上对多种肿瘤都具有良好的治疗效果。然而,这些药物也可产生广泛的免疫相关性不良反应,迫使患者中止治疗,甚至影响患者生存。因此,随着ICB在临床上的广泛应用,临床医生需要充分认识肿瘤ICB治疗可能产生的不良反应以及适当的治疗策略,以提高ICB治疗患者的生存率和治疗效果。 | 汪婷婷 罗琴 袁向亮 沈立松 | 2018 | 肿瘤2018，38，2： | 7 |
| 10 | Foxp3在胃癌细胞中的表达显示文摘目的:观察胃癌细胞株及人胃癌组织中Foxp3基因和蛋白的表达水平和分布特点,探讨胃癌细胞通过表达Foxp3直接参与免疫逃逸的机制。方法:应用实时荧光定量PCR技术,分别检测3株胃癌细胞株(MGC-803、BGC-823、SGC-7901)中的Foxp3mRNA表达水平,并采用流式细胞术破膜染色检测其Foxp3蛋白表达水平。对30例胃癌病理切片进行免疫组织化学染色,观察Foxp3在胃癌组织中的分布特点。结果:3株胃癌细胞株中均检测到有Foxp3基因表达,Foxp3的相对表达强度依次为BGC-823>SGC-7901>MGC-803,Foxp3蛋白表达水平与mRNA表达水平一致。30例胃癌病理切片中27例胃癌细胞表达Foxp3,且细胞质和细胞核都有表达。结论:Foxp3作为调节性T细胞发挥特异性免疫抑制功能的关键基因,在胃癌细胞中也有表达,这可能是其直接参与胃癌细胞免疫逃逸的重要机制之一。 | 薛剑 李美星 袁向亮 王剑 张通通 沈立松 | 2009 | 诊断学理论与实践2009，8，2： | 6 |
| 11 | CD4^+CD25^+CD127^lo2-细胞体外抑制效应T淋巴细胞增殖的影响显示文摘1995年,Sakaguchi等率先在小鼠外周血中分离获得发挥免疫抑制功能的CD4^+CD25^+T淋巴细胞,被称为调节性T淋巴细胞(Regulatory Tcells,Treg)。Treg细胞不仅具有抑制自体反应性T淋巴细胞的功能,还能阻止效应性T淋巴细胞的过度增殖和活化,甚至能影响B淋巴细胞产生免疫球蛋白。 | 王剑 袁向亮 李美星 薛剑 张通通 沈立松 | 2009 | 中华检验医学杂志2009，32，3： | 6 |
| 12 | 流式细胞术快速测定红细胞渗透脆性的应用显示文摘目的建立流式细胞术快速检测红细胞渗透脆性的方法,评估流式细胞仪测定红细胞渗透脆性的可能性。方法收集30例抗凝外周血,每例标本均一分为二,1份在采集2 h内检测(正常对照组),另1份经37℃孵育24 h(阳性对照组);另收集3例临床确诊的遗传性球形红细胞增多症患者作为疾病组。分别使用流式细胞术检测各组红细胞渗透脆性。通过流式细胞术测定红细胞残留百分比确定生理盐水和无菌水最佳体积比,确定乙二胺四乙酸(EDTA)和肝素2种抗凝剂对其的影响。另收集14例肝素抗凝标本,同时采用改良Sanford法和流式细胞术测定红细胞残留百分比,对比评价流式细胞术和改良Sanford法测定红细胞渗透脆性的特点。结果采用流式细胞术检测正常对照组的红细胞残留百分比为72.03%±5.68%,明显高于阳性对照组(46.47%±15.83%,P<0.05);疾病组红细胞残留百分比为5.76%±3.54%,明显低于正常对照组(P<0.001)。当生理盐水和无菌水体积比为1.2∶0.8时,正常对照组和阳性对照组红细胞残留百分比差异最大(P<0.05);与EDTA抗凝剂比较,肝素抗凝的外周血更适合于红细胞渗透脆性检测。流式细胞术与改良Sanford法测定红细胞渗透脆性有较好的一致性,但流式细胞术敏感性更高。结论流式细胞术测定红细胞渗透脆性具有操作简便、敏感性更好等特点,有实际应用的可行性。 | 王维维 袁向亮 费奇力 沈立松 | 2016 | 检验医学2016，31，10： | 6 |
| 13 | 基于NCBI基因表达综合数据库筛查胃癌关键基因和信号通路的分析显示文摘目的利用生物信息学方法筛选胃癌相关的关键基因以及参与的信号通路,初步探索胃癌发生、发展的相关指标。方法以美国国立生物技术信息中心(NCBI)基因表达综合数据库(GEO)的胃癌相关芯片数据,利用GEO2R分析平台筛选出胃癌组织和对照组织表达有显著差异的基因。对这些差异基因进行基因本体(GO)生物过程分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。利用卡普兰—迈尔—绘图仪(KM-Plotter)分析关键基因对胃癌患者生存时间的影响。结果在3个胃癌数据集中共筛选出1 480个差异基因,其中上调基因879个,下调基因601个。对表达有差异的基因进行信号通路和生物功能分析,鉴定发现主要集中于细胞色素P450家族、葡萄糖醛酸转移酶家族等基因簇。进一步分析这些关键基因,新发现ALDH3A1、NEUROD1等基因与胃癌的发生、发展密切相关。根据这些关键基因表达水平的高低对胃癌患者进行分组,2个组患者生存时间差异有统计学意义(P<0.05)。结论建立的整合基因组学分析方法筛选出了新的胃癌发生、发展关键基因,该方法为胃癌研究提供了有价值的信息,为进一步的功能研究提供了依据。 | 张鹏 罗琴 汪婷婷 袁向亮 沈立松 | 2018 | 检验医学2018，33，3： | 5 |
| 14 | 不同分期胃癌患者外周血淋巴细胞Foxp3 mRNA表达水平的研究显示文摘目的采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,研究不同分期胃癌患者外周血淋巴细胞Foxp3 mRNA的表达水平。方法普通RT-PCR结合胶回收制备Foxp3 mRNA-CDS标准品,利用标准品制备定量PCR标准曲线,对曲线进行灵敏度、精密度和特异性分析,用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测40例胃癌和8例正常对照外周血Foxp3 mRNA。结果获得Foxp3全长CDS标准品,标准曲线范围(2.8×102)^(2.8×108)拷贝/μl,最低检测值280拷贝/μl,批内和批间变异系数(CV)<5%。Foxp3基因在胃癌患者外周血表达水平显著高于健康对照(P<0.01),表达水平与肿瘤分期显著相关(P<0.05)。结论Foxp3基因上调表达与胃癌的发生、发展和预后有关。 | 卢剑 袁向亮 沈立松 | 2007 | 临床检验杂志2007，25，3： | 5 |
| 15 | 胃癌CD^+4 CD^high 25 Foxp3^+调节性T淋巴细胞数量和分布及Foxp3基因表达与肿瘤分期的相关性显示文摘目的 研究胃癌患者CD^+4 CD^high 25 Foxp3^+调节性T淋巴细胞(Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3的表达变化与胃癌临床国际肿瘤淋巴转移分类(TNM)分期的关系。方法 用四色流式细胞术以Foxp3·FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析20名健康对照者及47例胃癌患者(临床TNM分期Ⅰ11例、Ⅱ期18例、Ⅲ期10例、Ⅳ期8例)外周血、腹腔积液、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD^+4 CD^high 25 Foxp3^+ Treg的数量及分布情况。实时荧光定量PCR技术检测Treg Foxp3 mRNA表达水平。结果 胃癌患者外周血CD^+4 CD^high 25 Foxp3^+ Treg占CD^+4 T淋巴细胞的百分比为(8.03±3.47)%,高于正常健康对照组(5.83±2.93)%,差异具有统计学意义(P〈0.05)。胃癌患者腹腔积液、肿瘤浸润淋巴细胞、癌旁淋巴结中Treg占CD^+4 T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(分别为P〈0.05、P〈0.01、P〈0.01)。胃癌组织局部,TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度显著高于外周血和腹腔积液(P〈0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者Treg比例分别为(5.72±1.95)%、(6.45±2.23)%、(9.58±3.13)%、(11.70±2.30)%,这提示Treg与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.784,P〈0.01)。胃癌患者外周血单个核细胞Foxp3基因mRNA表达水平明显高于健康对照组(P〈0.01)。Foxp3基因表达水平与胃癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.623,P〈0.05)。结论 胃癌患者CD^+4 CD^high 25 Foxp3^+ Treg的比例升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关。胃癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3的表达强度均有所不同,提示肿瘤局部免疫抑制功能增强,这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD^+4 CD^high 25 Foxp3^+Treg将来可作为胃癌患者病情进展的重要判断指标之一。 | 袁向亮 沈定丰 卢剑 董平 王剑 李美星 沈立松 | 2008 | 中华检验医学杂志2008，31，4： | 5 |
| 16 | 胃癌CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的异常增高与患者免疫抑制状态的相关性分析显示文摘目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞在胃癌患者血清及腹腔冲洗液(或积液)中异常增高与机体免疫状态的关系。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胃癌患者血清和腹腔冲洗液中IFN-γ、IL-4细胞因子的水平。利用多参数流式细胞仪分析56例胃癌患者术前的外周血和肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)中Treg细胞及CD8+T细胞[又称细胞毒T淋巴细胞(CTL)]的比率。另检测12例胃癌患者手术前后外周血Treg细胞的比率变化。结果:相对于健康对照组,胃癌患者血清Th1/Th2比例降低,差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌患者外周血中的Treg细胞比率明显高于健康对照组,晚期患者高于早期患者,差异有统计学意义(P均<0.05);TIL中Treg比率明显高于外周血(P<0.05)。TIL中Treg细胞比率与CTL的比率呈负相关(r=-0.4,P<0.05)。12例患者肿瘤切除后Treg细胞比率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:胃癌患者血清及肿瘤组织中Treg细胞的比率随肿瘤进展而升高;Treg细胞比率升高和CTL降低可能参与肿瘤细胞的免疫逃逸。 | 张通通 袁向亮 李美星 赵燕 沈立松 | 2010 | 诊断学理论与实践2010，9，4： | 4 |
| 17 | 急性心肌梗死患者不同血清白介素6水平对心肌损伤的预测价值显示文摘目的探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者不同血清白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)水平对心肌损伤的预测作用。方法采用临床病例对照诊断研究设计。收集2012年11月至2013年5月在上海新华医院急诊科或心内科就诊的AMI患者54例,健康体检者20名。采用ELISA检测AMI患者发病24 h内血清IL-6和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)含量,采用流式细胞术检测健康人和AMI患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和Th17比例。随机选取AMI患者中IL-6+(IL-6≥10 ng/L)和IL-6-(IL-6〈10 ng/L)的各10例患者血清标本,应用Luminex方法检测19种细胞因子,同时分析临床生化指标。采用F检验验证数据方差齐性,正态分布数据组间比较采用t检验或方差分析,非正态分布数据采用秩和检验。结果与健康对照组相比,高敏C反应蛋白(high sensitivity C reactive protein,hs-CRP)和肌酸激脢(creatine kinase-MB,CK-MB)在两组AMI中均增高,差异有统计学意义,并且IL-6+组显著高于IL-6组[hs-CRP:8.43(1.28-10.75)μg/L vs 0.55(0.15-1.35)μg/L,Z=27.3,P〈0.05;CK-MB:25.0(14.0-66.0)μg/L vs11.5(8.8-17.0)μg/L,U=217,P〈0.05]。IL-17、TGF-β、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和Th17细胞比例在IL-6+和IL-6-AMI两组中均高于健康对照组,但差异无统计学意义。IL-6+和IL-6-AMI患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例均低于健康对照组,两组间比较无统计学差异。结论 IL-6+AMI患者表现出更严重的心肌损伤(以TNI为指标)和炎症反应(hs-CRP、IL-10和IL-8为指标),IL-6或许可用于AMI风险分层。 | 马妍慧 邓琳 袁向亮 徐苓 李莉 沈立松 徐伟平 | 2014 | 中华临床实验室管理电子杂志2014，2，2： | 4 |
| 18 | 实时荧光定量RT-PCR检测血液肿瘤细胞株PAX5 mRNA表达显示文摘目的 建立实时定量逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)检测6个血液肿瘤细胞株中PAX5和CD19的 mRNA相对表达量。方法 一系列稀释的反转录自NAMALWA细胞株总RNA的cDNA被用于构建PAX5、CD19 和GAPDH扩增的标准曲线。实验证实靶基因(PAX5和CD19)与管家基因(GAPDH)的扩增效率一致,因此可 以用比较循环数(Ct)法对PAX5和CD19的表达进行相对定量。结果 在NAMALWA(B细胞系)细胞株中, PAX5和CD19mRNA相对表达量分别为2.35%和2.52%;而在其他T细胞和髓系细胞株中几乎不表达。结论 本研究中所建立的实时定量RT PCR能简单、快速、方便地对PAX5和CD19mRNA表达水平进行定量,且适 用于对大量、不同种血液恶性肿瘤患者进行观察研究。 | 张蓓 袁向亮 沈立松 | 2005 | 检验医学2005，20，2： | 3 |
| 19 | 脂连素和C-反应蛋白在急性心肌梗死中的变化显示文摘目的观察急性心肌梗死(AMI)发病后脂连素的动态改变及与C-反应蛋白(CRP)的关系,探讨其临床意义。方法选取27例AMI患者为研究对象,以ELISA法分别测定发病后24h内及第7天血清脂连素水平,并以15例冠心病作为对照组进行比较分析,两组同时测定血清CRP。结果AMI组血清脂连素在发病24h内明显低于冠心病组(P<0.001),随后逐渐上升,其值变化有统计学意义(P=0.007),同时AMI组血清CRP明显升高,与脂连素的变化呈负相关(r=-0.36,P=0.04)。结论血清脂连素水平下降与AMI发生密切相关,并在疾病早期恢复中可能起到抗炎及保护血管内皮细胞的作用。 | 沈晟晖 袁向亮 潘曙明 | 2008 | 中国急救医学2008，28，1： | 3 |
| 20 | 转录因子PAX5在儿童急性白血病细胞中的表达显示文摘为了观察了解儿童急性白血病细胞中转录因子PAX5的表达特性,采用实时定量RT-PCR方法测定了6个血液肿瘤细胞株以及6例正常儿童、58例初发和4例复发急性白血病儿童(其中包括39例B-ALL,10例T-ALL和13例AML)骨髓细胞中PAX5和CD19mRNA的表达水平。结果表明:在Namalwa(B细胞系)细胞株中,PAX5和CD19mRNA相对表达量分别为2.35%和2.52%;而在T-和髓系细胞株中几乎不表达。在临床样本中B-ALL组比T-ALL组和AML组的PAX5mRNA表达高(P=0.029和P=0.013)。T-ALL组和AML组的PAX5mRNA表达水平均低于正常对照组,而T-ALL组与AML组之间的表达差异无显著意义。在B-ALL患儿中,PAX5mRNA表达的个体差异很大。此外还发现,初发治疗前组和复发组的B-ALL患儿PAX5mRNA表达高于化疗完全缓解组(P=0.011和P=0.006)。由于在CD19基因的启动子上有B细胞特异性激活蛋白的结合位点,研究发现在B-ALL中PAX5表达水平与同样用实时定量RT-PCR检测的CD19表达水平之间存在明显的相关性。结论:运用实时定量RT-PCR方法能快速准确地在B-ALL的临床标本中检测和定量PAX5基因的表达。研究中发现部分B-ALL中PAX5mRNA表达明显升高,因此它可将其作为进一步研究B-ALL发病机理的另一个切入点。 | 张蓓 帖利军 叶启东 顾龙君 汤静燕 袁向亮 沈立松 | 2006 | 中国实验血液学杂志2006，14，1： | 3 |
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