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| 1 | 奶牛性控冻精技术的使用要点显示文摘本文从种公牛选择、性控精液获得方法、管理、受配牛的选择以及人工授精等方面,介绍了如何更好地使用性控冻精为奶牛业的发展提供服务。 | 王鸿周 施巧婷 朱肖亭 徐照学 | 2016 | 中国牛业科学2016，42，1： | 0 |
| 2 | 一例猪蓝耳病与猪圆环病毒病混合感染的诊断报告显示文摘2019年河南某猪场暴发了一起以仔猪消瘦,大批死亡为特征的传染病。为了确定致病病原,研究团队对患病猪场进行了流行病学调查,根据临床症状和病理剖检确定了疑似病原,再通过对猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、高致病性猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)4种疑似病原进行PCR和RT-PCR实验室诊断,最终确诊为猪蓝耳病病毒与猪圆环病毒2型的混合感染。 | 金磊 朱肖亭 李玉龙 张子敬 王二耀 徐照学 | 2020 | 猪业科学2020，37，8： | 9 |
| 3 | 以玉米粉和麸皮为主要原料生产单细胞蛋白饲料的研究显示文摘采用单因素实验设计,对酵母菌发酵,以玉米粉和麸皮为主要培养基原料的固体发酵培养基配方进行了筛选。以接种量、料水比例、发酵温度、发酵周期等因素作为研究对象,确定了最佳发酵条件。结果表明:筛选出的培养基配方为:玉米粉75%,麸皮21%,NH4NO3 2%,KH2PO4 1%,MgSO4 1%。适宜的发酵条件为:接种量12%,料水比例1∶1.5,发酵温度30℃,发酵周期66 h,该条件下发酵终产物粗蛋白含量最高,为20.56%。 | 赵彩艳 朱肖亭 王二耀 徐照学 施巧婷 | 2019 | 畜牧与饲料科学2019，40，7： | 7 |
| 4 | 健康与腹泻犊牛的粪便真菌差异分析显示文摘【目的】利用18S rRNA高通量测序技术,研究健康与腹泻犊牛的粪便真菌差异.【方法】利用18S rRNA高通量测序技术对10份腹泻和10份健康犊牛的粪便样本测序分析.【结果】Alpha多样性分析表明腹泻组与健康组两组间物种丰富度与多样性无显著差异(P>0.05).在门的水平上,与健康组比腹泻犊牛粪便中新丽鞭毛菌门相对丰度显著降低,而担子菌门和芽枝霉门显著升高(P<0.05).在属的分类水平上,相较于健康犊牛组,腹泻组中酵母属(Saccharomyces)、盲囊菌属和小脆柄菇属(Psathyrella)相对丰度明显降低,而弯孢属(Curvularia)、赤霉菌属(Gibberella)和耐干霉菌属(Xeromyces)丰度显著升高(P<0.05).【结论】健康与腹泻犊牛真菌间在多个水平存在显著差异,这可能是导致腹泻的直接原因,这也为犊牛腹泻的预防与治疗奠定了基础. | 金磊 朱肖亭 施巧婷 王二耀 徐照学 王培育 张子敬 | 2021 | 甘肃农业大学学报2021，56，3： | 2 |
| 5 | 和牛超数排卵及胚胎移植效果观察显示文摘[目的]为了研究和牛超数排卵和胚胎移植的效果,[方法]试验以和牛作供体,荷斯坦青年母牛作受体,采用PG+FSH方案对7头和牛供体进行超数排卵处理,用非手术法取胚并进行鲜胚移植。[结果]结果表明,采用PG+FSH方案头均获得胚胎数为(11.29±4.86)枚,可用胚胎(5.86±3.27)枚(A级和B级);鲜胚移植(A级和B级)妊娠率为51.22%。[结论]说明采用该方案对和牛供体进行超数排卵,并进行鲜胚移植的效果较为理想。 | 鲁立刚 王二耀 施巧婷 楚秋霞 朱肖亭 徐照学 | 2022 | 中国牛业科学2022，48，4： | 2 |
| 6 | 抗氧化剂对家畜胚胎体外发育影响的研究进展显示文摘现在研究普遍认为活性氧自由基是导致胚胎体外发育阻滞的主要原因。本文主要综述了不同抗氧化剂对牛胚胎体外发育的影响,并分析其作用机制。 | 金磊 张子敬 朱肖亭 吕世杰 黄永震 王二耀 徐照学 施巧婷 | 2019 | 中国牛业科学2019，45，6： | 2 |
| 7 | 绵羊卵母细胞体外成熟研究显示文摘卵母细胞体外成熟是体外受精、核移植等胚胎工程的重要基础环节,其成熟质量影响着胚胎工程和体外受精等生物技术的成功与否,如何改善卵母细胞体外成熟的质量是当前体外培养技术的一个热点。 | 朱肖亭 辛晓玲 王鸿周 肖小帅 王二耀 徐照学 | 2016 | 河南畜牧兽医(综合版)2016，37，5： | 1 |
| 8 | 碱预处理精子在牛ICSI上的应用显示文摘利用50 mmol的NaOH溶液分别处理牛精子30 min和1 h,显微镜下发现处理30 min精子尾部缩短1/3,处理1 h精子尾完全消失,仅留精子头。为了比较2种不同结构精子对胚胎发育的影响,对2组不同结构精子分别实施单精子注射,比较2组精子对胚胎发育的影响,通过差异染色比较胚胎发育质量,以制动精子作为对照。结果表明:①精子头组操作成功率高于缩尾精子组(P>0.05)和制动精子组(P<0.05);②缩尾精子组的卵裂率显著高于精子头组(P<0.05)和制动精子组(P<0.05),且桑囊率也显著高于制动精子组(P<0.05);③差异染色表明,缩尾精子组胚胎的细胞数和制动精子组胚胎的细胞数均显著高于精子头组(P<0.05)。因此,利用50 mmol的NaOH处理牛精子30 min,选择缩尾精子实施单精子注射,能提高胚胎操作效率和胚胎发育质量。 | 朱肖亭 金磊 张子敬 吕世杰 陈付英 徐照学 赵霞 王二耀 | 2021 | 中国草食动物科学2021，41，1： | 0 |
| 9 | 利用CRISPR-Cas9基因编辑技术制备牛MSTN基因编辑胚胎显示文摘为了给双肌肉牛品种的培育提供新的遗传素材,拟利用CRISPR-Cas9基因编辑技术制备牛MSTN基因编辑胚胎。从采集到的86对牛卵巢中收集卵母细胞进行成熟培养以及体外受精,并使用在线软件设计能够在体外高效编辑牛MSTN基因的gRNA序列,将验证后所得的体外切割活性最高的gRNA与Cas9 mRNA的混合物显微注射牛的受精卵,培养至囊胚后,利用T7EI核酸内切酶法检测囊胚中MSTN基因的编辑情况,然后将基因编辑阳性的囊胚样品进行测序验证。结果表明,牛胚胎体外培养平均囊胚率为21.28%;在设计的多条gRNA序列中,gRNA5的体外切割活性最高,为96.00%;将Cas9 mRNA和gRNA5的混合物显微注射受精卵并培养至囊胚后,T7EI核酸内切酶检测表明囊胚MSTN基因切割阳性率为15.40%;对MSTN基因编辑囊胚阳性样品测序表明,在gRNA5靶位点存在部分片段缺失。综上,说明利用CRISPR-Cas9基因编辑技术成功获得了牛MSTN基因编辑胚胎。 | 尉翔栋 吕晨晨 朱肖亭 冯亚杰 辛晓玲 施巧婷 梁瑞清 徐照学 王二耀 滑留帅 | 2019 | 河南农业科学2019，48，2： | 9 |
| 10 | 枯草芽孢杆菌发酵豆粕生产益生菌饲料的研究显示文摘研究以豆粕为主要原料,利用枯草芽孢杆菌发酵生产益生菌饲料。试验采用单因素设计,对以豆粕为主要原料的固体发酵培养基配方进行筛选,再以接种量、瓶装量、发酵周期和发酵温度等因素作为研究对象来确定其最佳发酵条件。通过试验得出固体发酵培养基配方为:45%豆粕,35%玉米粉,10%葡萄糖和10%麸皮;最佳发酵条件为:料水比例1∶2,接种量13%,瓶装量75 g/250 mL,发酵周期48 h和发酵温度36℃。 | 赵彩艳 王二耀 陈付英 楚秋霞 施巧婷 辛晓玲 朱肖亭 吕晨晨 徐照学 | 2017 | 饲料研究2017，40，20： | 8 |
| 11 | 利用简化基因组测序筛选安格斯牛生长相关的受选择基因显示文摘旨在探究安格斯牛生长相关的受选择基因,为肉牛生长相关主效基因的鉴定提供参考。本试验共采集72头南阳牛母牛和14头黑安格斯牛母牛血样并提取基因组DNA。利用SLAF-seq(specific-locus amplified fragment sequencing)技术获得全基因组SNP标记并对试验个体基因型进行分型。通过计算各SNP位点的遗传分化系数(Fst值)和核苷酸多态性(πratio)筛选两品种间的差异基因组区域,并与动物QTL数据库中牛生长性状QTLs进行比对,重合区域作为候选区域。随后对候选区域内基因进行功能注释以筛选候选基因,并根据'Expression Atlas'数据库对候选基因的组织表达情况进行分析。经筛选后,本试验共得到69762个SNPs,以Fst值和πratio值的99%分位数为阈值筛选得到33个两品种间高度差异的基因组区域,其中16个基因组区域与生长性状相关QTLs重合。这些区域共包含27个基因,其中4个基因(FXR1、ADAR、IGF1和MNF1)与骨生长、肌肉发育和生长调控有关。FXR1和MNF1均在骨骼肌组织中高表达,ADAR和IGF1分别在脑组织和肝脏中表达最高。结果提示,IGF1基因可作为影响肉牛生长的关键候选基因,FXR1、ADAR、MNF1基因可优先进行进一步验证研究。 | 吕世杰 陈付英 金磊 张子敬 朱肖亭 施巧婷 辛晓玲 楚秋霞 柏中林 王二耀 徐照学 | 2020 | 畜牧兽医学报2020，51，4： | 5 |
| 12 | 慢病毒介导稳定表达FABP4的小尾寒羊成纤维细胞系的构建显示文摘构建1株能够稳定表达FABP4的小尾寒羊成纤维细胞系,用于小尾寒羊未来的品种保护、开发与利用,首先利用组织块培养法制备了小尾寒羊原代成纤维细胞,然后利用全基因合成法克隆了绵羊FABP4基因,并构建了过表达FABP4的慢病毒载体。经过包装后,使用获得的慢病毒感染小尾寒羊原代成纤维细胞,并通过嘌呤霉素筛选稳定转染细胞,最后应用Western Blot鉴定FABP4蛋白的过表达水平。结果表明,经过传代2~3次后,得到纯度较高的小尾寒羊原代成纤维细胞。滴度测定表明,当在96孔板中添加病毒原液量为10^(-4)μL时,观测不到荧光。当添加量为10^(-3)μL,能够观测到荧光,说明获得慢病毒的滴度为1×10~6TU/m L以上。利用制备的慢病毒感染小尾寒羊原代成纤维细胞,并经过嘌呤霉素筛选后,在荧光显微镜下所有细胞均能观察到绿色荧光。应用Western Blot分析发现,在对照组几乎检测不到FABP4蛋白的表达,而在病毒感染组则能够清晰的观察到FABP4蛋白的表达,说明成功制备了稳定表达FABP4的小尾寒羊成纤维细胞系。 | 滑留帅 王璟 白杰 朱肖亭 陈付英 于翔 楚秋霞 辛晓玲 徐照学 赵洪昌 王二耀 | 2018 | 华北农学报2018，33，1： | 3 |
| 13 | 精子不同处理方式对绵羊胞质内单精子注射效率的影响显示文摘胞质内单精子注射前对精子进行预处理是模拟精子受精过程的变化增强精子解聚能力。常用的精子处理方法有聚乙烯吡咯烷酮、二硫苏糖醇、冻融处理等。研究表明ICSI卵的卵裂率低的主要原因是精子解聚能力差。因此研究精子的处理方法提高ICSI的注射效率是十分必要的。该实验探讨了精子不同预处理方法对ICSI胚胎发育的影响。利用超声波细胞粉碎仪对精子做不同时间(3 s、6 s)的处理,观察ICSI胚胎发育情况,选择最佳的处理时间,然后利用超声波分别处理鲜精和冻精,比较不同精液对ICSI胚胎发育的影响。将精子分别利用超声波和碱处理,对比两种不同预处理方法对ICSI卵卵裂率和桑囊胚率的影响,结果表明:(1)超声波处理绵羊精子最佳的处理时间是6 s;(2)鲜精和冻精经超声波处理后对ICSI卵的卵裂率(39.1%vs 37.4%,P>0.05)和桑囊率(12.3%vs 13.2%,P>0.05)影响不显著;(3)冻精经碱处理后其ICSI卵的卵裂率(46.6%vs37.4%,P<0.05)和桑囊胚率(20.4%vs 13.2%,P<0.05)均显著高于超声波处理冻精。 | 朱肖亭 王鸿周 肖小帅 滑留帅 施巧婷 辛晓玲 徐照学 王二耀 | 2017 | 江西农业大学学报2017，39，2： | 2 |
| 14 | POLB基因在动物上的研究进展显示文摘DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,POLB)属于DNA聚合酶X家族中的一员,主要参与真核生物DNA的复制、DNA损伤修复、基因重组以及细胞周期调控等多种生物代谢过程。POLB所在的DNA修复基因与癌基因、抑癌基因、细胞周期调节基因以及细胞凋亡基因共同维持着细胞基因组的稳定性和完整性。若特异性敲除POLB会导致胚胎致死。近年来研究发现,POLB与细胞的生长发育、周期调控等息息相关。POLB表达下降使得上述的癌基因、抑癌基因受到损伤后却不能得到正确修复,从而导致细胞周期的紊乱、增殖失控。因此,本文将从POLB的基因结构、生物学功能、POLB在动物方面的研究等几个方面的相关研究进展进行综述,重点阐述其生物学功能,以期更深入了解POLB,为畜禽品种的改良奠定理论基础。 | 李玉龙 翟亚莹 吕世杰 于翔 朱肖亭 张志杰 张格阳 张子敬 施巧婷 陈付英 徐照学 王二耀 | 2021 | 中国牛业科学2021，47，5： | 0 |
| 15 | 郏县红牛和安格斯牛18月龄背最长肌差异表达基因的筛选与分析显示文摘旨在通过转录组学分析筛选出影响牛肌肉发育的候选基因。对5头18月龄的郏县红牛背最长肌进行转录组测序,获得转录组数据后与3头18月龄安格斯牛背最长肌的转录组数据(GSE57327)进行联合分析。结果:与安格斯牛相比,郏县红牛背最长肌中4945个基因表达显著上调(FDR<0.05),2186个基因显著下调(FDR<0.05)。GO功能富集分析显示差异基因主要富集在与代谢相关生物学过程中。KEGG信号通路分析显示差异表达的基因主要富集到氧化磷酸化(oxidative phosphorylation)等通路上。从氧化磷酸化通路中筛选出两品种间差异表达最显著的20个基因,通过反刍动物基因组数据库(ruminant genome database,RGD)查看该20个基因的组织表达情况,其中泛素-细胞色素c还原酶复合物Ⅲ亚基Ⅺ(UQCR11)、细胞色素c氧化酶亚基7A1(COX7A1)、细胞色素c铜伴侣蛋白(COX17)、NADH氢酶辅酶Q铁硫蛋白5(NDUFS5)和线粒体ATP酶合成体ε亚基(ATP5F1E)这5个基因在牛骨骼肌组织中的表达量高于其他组织,推测这5个基因在牛的生长发育过程中可能发挥重要作用,可作为候选基因进行进一步验证。 | 张格阳 李玉龙 朱肖亭 张志杰 翟亚莹 牛欣然 黄永震 曾滔 张子敬 施巧婷 王二耀 吕世杰 | 2023 | 畜牧与兽医2023，55，5： | 0 |
| 16 | 液相芯片技术在动物遗传育种中的应用显示文摘液相芯片技术是近年来发展起来的一种先进的高通量分子检测技术,集一体化流式细胞术、荧光微球和激光技术等技术优势,具有快速、简便、敏感、准确和成本低等优点。相比其他检测技术,液相芯片可以同时检测多个生物分子指标,如蛋白质、核酸和代谢产物等。在动物遗传育种中,这些分子指标可以用于疾病基因定位、群体繁殖力评价、亲缘关系研究、遗传多样性分析等重要领域。该文介绍了液相芯片的原理、优缺点及其在动物遗传育种中的应用,以期为辅助开发动物遗传育种检测新技术提供参考。 | 张格阳 吕世杰 朱肖亭 翟亚莹 张志浩 施巧婷 张子敬 屈俊峰 陈付英 王二耀 | 2023 | 中国畜禽种业2023，19，6： | 0 |
| 17 | 胚胎移植前供体牛与受体牛血浆外泌体miRNA差异表达分析显示文摘【目的】探索胚胎移植前供体牛与受体牛血浆外泌体miRNA的表达差异,以明确血浆外泌体miRNA在牛早期妊娠中的作用及其调控机制。【方法】以3~6岁、体重480~600 kg的夏南牛作为研究对象,选取10头供体牛进行同期发情、超数排卵和人工授精,23头受体牛只做同期发情处理。在人工授精后第7天,冲洗供体牛子宫以获取囊胚,选取3头囊胚数相近的供体牛及3头与供体牛体重和年龄均相近的受体牛,颈静脉采血,进行血浆外泌体的分离与鉴定;然后提取血浆外泌体miRNA,并检测其表达量;采用R语言中的DESeq差异算法计算P值,并筛选出P<0.05的miRNA,对差异表达的miRNA进行靶基因预测、GO功能富集分析和KEGG信号通路分析。【结果】6个样本的囊泡粒径均在135 nm左右,符合外泌体的特征。与供体牛相比,受体牛中有9个miRNAs表达显著上调(P<0.05),13个miRNAs显著下调(P<0.05);22个差异表达的miRNAs中,有15个miRNAs预测出无重复的靶基因2990个。GO功能富集分析和KEGG信号通路分析的结果表明,这些靶基因主要富集在与生物黏附(biological adhesion)、定位(localization)、细胞连接(cell junction)功能有关的通路上,显著富集的信号通路与黏着斑(focal adhesion)、黏着连接(adherens junction)有关,提示血浆外泌体miRNA可能参与调控胚胎着床。【结论】研究结果可为筛选和探究影响胚胎着床的血浆外泌体miRNA提供参考,并为进一步阐明血浆外泌体miRNA在母牛早期妊娠调控中的作用提供依据。 | 翟亚莹 施巧婷 楚秋霞 朱肖亭 滑留帅 张子敬 陈付英 祁兴磊 王二耀 吕世杰 | 2022 | 中国畜牧兽医2022，49，2： | 0 |
| 18 | 郏县红牛POLB基因克隆及生物信息学分析显示文摘【目的】克隆郏县红牛DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,POLB)基因,并对其进行生物信息学分析。【方法】以郏县红牛肌肉组织cDNA为模板,通过PCR方法克隆POLB基因完整CDS区序列;利用在线软件进行遗传距离分析并构建系统进化树,分析POLB蛋白的理化性质、疏水性、磷酸化位点、跨膜结构、信号肽、二级结构、三级结构和互作蛋白。【结果】郏县红牛POLB基因CDS区序列全长1008 bp,编码335个氨基酸。系统进化树分析表明,郏县红牛POLB基因氨基酸序列与绵羊等反刍动物的亲缘关系最近,与其他哺乳类动物和禽类次之,与斑马鱼(鱼类)最远。郏县红牛POLB蛋白分子质量为38.26 ku,理论等电点(pI)为9.10,半衰期为30 h,不稳定系数为31.06,总平均亲水系数为-0.659,属于稳定的亲水性蛋白;磷酸化位点预测分析发现,郏县红牛POLB蛋白包含17个丝氨酸磷酸化位点、12个苏氨酸磷酸化位点和4个酪氨酸磷酸化位点;跨膜区和信号肽预测结果显示,郏县红牛POLB蛋白不属于跨膜蛋白和分泌型蛋白;二级结构和三级结构预测发现,其主要包含α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲4种结构;在线软件预测结果表明,POLB蛋白与XRCC1、FEN1、PARP1和LIG3等为互作蛋白。【结论】本研究成功克隆了郏县红牛POLB基因CDS序列,其与绵羊亲缘关系最近;POLB蛋白为无跨膜结构、无信号肽的亲水性蛋白,与XRCC1蛋白互作程度最高,结果可为进一步探究POLB基因生物学功能提供参考。 | 李玉龙 吕世杰 翟亚莹 张志杰 朱肖亭 张子敬 陈付英 施巧婷 王二耀 | 2022 | 中国畜牧兽医2022，49，3： | 0 |
| 19 | 牛胚胎冷冻技术及冷冻保护剂研究进展显示文摘胚胎冷冻保存是胚胎移植过程中重要的步骤之一,在地方牛品种遗传资源保护方面具有广泛的应用价值。当前胚胎冷冻技术有3种,一是慢速冷冻法,二是快速冷冻法,三是玻璃化冷冻法,冷冻保护剂可分为细胞内液冷冻保护剂、细胞外液冷冻保护剂与抗冻蛋白。该文综述了国内外牛胚胎冷冻技术及冷冻保护剂的研究进展,旨在为相关从业人员提供技术参考。 | 翟亚莹 张子敬 吕世杰 朱肖亭 张格阳 朱进华 李峥 于翔 王红利 施巧婷 闫祥洲 王二耀 | 2022 | 中国畜禽种业2022，18，10： | 0 |
| 20 | 基因编辑技术在我国畜牧业的研究进展显示文摘基因编辑(geneediting)是一种通过增加、减少和修饰特定位点核苷酸改变生物体DNA的技术。近年来,基因编辑技术也被越来越多的人熟知,得到了极大的关注,除了广泛应用于人生命科学研究以及临床应用等方面外,在畜牧业也有较为广泛的应用。该文核心将从基因编辑技术、基因编辑技术在家畜上的运用以及基因编辑技术发展前景等方面展开综述。 | 张格阳 张子敬 翟亚莹 吕世杰 朱肖亭 朱进华 李峥 于翔 王红利 施巧婷 闫祥洲 王二耀 | 2022 | 中国畜禽种业2022，18，10： | 0 |
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