|
|
|
题名
|
作者
|
年代
|
出处
|
被引量
|
| 1 | 真核基因在pET系统中表达出现的问题与拟解决的方案显示文摘pET表达系统是以噬菌体的T7为启动子 ,可以从各种基因 (包括原核、真核细胞 )生产大量的目的蛋白[1 ] ,然而一些真核基因在pET表达系统中的蛋白表达量却很少 ,有许多因素影响真核基因在该表达系统中的表达 ,如信号肽序列、毒性基因与质粒的稳定性、mRNA转录的二级结构和稀有密码子 ,以及实际操作过程中表达条件等均会影响真核基因在pET系统中的表达。该文旨在分析其主要原因 ,并提出拟解决的方案 ,以达到满意的高效表达。 | 张锐 孙美榕 欧阳红生 张玉静 | 2004 | 生物技术2004，14，2： | 23 |
| 2 | 猪各组织器官内肌生成抑制素基因mRNA表达谱的研究显示文摘 用Trizol试剂法提取军牧一号猪的骨骼肌、心肌、肝、肾、肺、脾、胰、脂肪的总RNA做RT-PCR和嵌套PCR,结果在军牧一号猪骨骼肌、心肌和脂肪组织内检测到了肌生成抑制素mRNA的表达,而在其他组织中未检测到。 | 张锐 孙美榕 张红莲 杨捷 黄燕 陈绍红 杜慧 欧阳红生 | 2004 | 中国兽药杂志2004，38，3： | 12 |
| 3 | 十二烷基伯胺乙酸盐盐析法提取柚子皮果胶多糖的研究显示文摘首次报道一种十二烷基伯胺乙酸盐可以作为柚子皮果胶的沉淀剂,在pH3.5,温度50℃的稀果胶萃取液中加入十二烷基伯胺乙酸盐溶液,可与带负电荷果胶形成不溶于水的果胶十二胺盐复合物,完全沉降析出,再经过酸解和乙醇洗涤步骤,得到灰分低于1%的果胶,产率高达17.5%,有机胺可以回收重复使用。与传统的酒精沉降法相比,节省了真空减压浓缩工序,大大降低了酒精的用量。与饱和硫酸铝盐析法相比,灰分低,纯度高。本法提取工艺简单,效果较好,可以作为高效率制备优质果胶的一种新方法,为利用废弃物开发制备生物大分子多糖——果胶开辟了新的途径。 | 张锐 孙美榕 | 2006 | 食品工业科技2006，27，5： | 12 |
| 4 | 铁(Ⅲ)-4,7-二苯基-邻菲啰啉络合物光还原的研究及其应用显示文摘实验发现,在散射光中Fe(Ⅱ)-BPT络合物能发生显著的光还原反应,产生Fe(Ⅰ)-BPT络合物,上述反应在NaH_2PO_4-Na_2HPO_4缓冲液中进行缓慢。此法可用于铁矿中铁的价态分析。分析结果与标准值一致。 | 江淑芙 孙美榕 张书圣 | 1992 | 分析化学1992，20，7： | 8 |
| 5 | 提取琼胶糖的树脂新方法显示文摘目的研究一种低成本制备琼胶糖的简便方法。方法以江蓠琼胶粉为原料,采用NH4+型阳离子交换树脂脱除1.5%琼胶溶液中的金属离子,再用OH-型强碱性阴离子交换树脂在恒温70℃下吸附沉降琼胶酯,提取出白色琼胶糖。结果测定的灰分和硫酸根含量均符合电泳琼胶糖的指标,凝胶强度达到560g/cm2,提取率达57%,测定了其结晶紫电泳和DNA的琼胶糖凝胶电泳。结论本方法提取的琼胶糖具有良好的电泳性能,适合用于生物化学和分子生物学的凝胶电泳研究。本法与EDTA-2Na法和DEAE纤维素法相比,是一种低成本制备琼胶糖的简便方法。 | 张锐 孙美榕 | 2006 | 中国海洋药物2006，25，3： | 7 |
| 6 | 鱼类基因组DNA提取方法的优化及PCR扩增显示文摘以海水鱼军曹鱼为材料,分别采用4种不同处理方法———经典蛋白酶K法、CTAB法、改良SDS法及优化的一步法(ROSE)等提取基因组DNA,通过紫外分光光度计测定OD260/280值、琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示这4种方法均可以获得较高质量的基因组DNA,该基因组DNA用于目的基因的PCR扩增,均能得到PCR扩增的特异条带。改良SDS法及优化的一步法更加方便、快捷,而且成本低廉。 | 张锐 孙美榕 林洽辉 杨燕贞 曾苑玲 | 2006 | 水利渔业2006，26，4： | 7 |
| 7 | 8例胸腔异位肾的X线和CT诊断显示文摘 | 贾建明 姜君威 孙美榕 陈根生 李也平 孙德才 | 2002 | 中国医学影像学杂志2002，10，1： | 5 |
| 8 | 锆(Ⅳ)同7-碘-8-羟基喹啉-5-磺酸三元混配化合物的形成及其荧光光度研究显示文摘在 EDTA 存在下,Zr(Ⅵ)与 H_2QSI 在 pH6.0时形成三元荧光配合物。其组成为Zr:H_2QSI:EDTA=1:1:1。荧光强度与锆离子在0.1~1.0μg/10ml 范围内呈现线性关系。对EDTA 的作用机理作初步探讨。 | 江淑芙 孙美榕 张书圣 | 1991 | 分析化学1991，19，11： | 4 |
| 9 | 提高猪瘦肉率的分子育种学方法显示文摘近年来 ,国内外已对瘦肉性状相关基因进行了大量的研究 ,如肌生成抑制素基因、肌生成素基因、ob基因及其受体基因(Leptin)、胰岛素样生长因子Ⅱ基因、脂肪酸结合蛋白基因等 ,该文综述了应用这 5种调控因子提高瘦肉率的分子育种学机理及方法。 | 张锐 孙美榕 张红莲 杨捷 黄燕 陈绍红 杜慧 欧阳红生 | 2004 | 生物技术2004，14，4： | 3 |
| 10 | 基因治疗与人类健康显示文摘随着分子生物学及基因工程技术的迅猛发展 ,基因治疗已经成为治疗人类疾病的重要方法之一 ,同时也是维护人类健康最有发展前景的手段之一。诸如遗传病、肿瘤、和传染病与心血管病的基因治疗。遗传免疫方面 ,病毒性疾病和肿瘤的基因治疗 ,如将病毒抗原基因 (HBsAg)及一些肿瘤抗原基因 (CEA)直接注入人体内而产生抗体 ;人类亚健康状态 ,如肥胖、秃顶、疲劳、衰老等的基因治疗。然而基因治疗目前仍面临着许多困扰 ,如基因治疗的有效性、安全性、及社会伦理等诸多问题 ,因此在临床实际应用中要慎之又慎。只有对基因治疗合理规范和正确引导并遵循伦理原则 。 | 张锐 孙美榕 张正 杨捷 黄燕 杜慧 陈绍红 | 2004 | 中国生物工程杂志2004，24，1： | 3 |
| 11 | 二、三元杂交半番鸭的遗传多样性RAPD分析研究显示文摘采用RAPD技术分析二元杂交和三元杂交半番鸭之间的基因组DNA的遗传多样性。从3组的60个随机引物中筛选出3个引物K16、K18、P11。3个引物中,共扩增出209条带,分子量约在300~3000bp之间,8个样品共有的条带数只有9条,占4.3%,反映了品种间的遗传变异。根据扩增得到的RAPD图谱计算了不同样品间的遗传距离(D)和遗传相似系数,并用非加权配对算术平均法(UPGMA)进行聚类分析,绘制它们的分子进化树。结果表明,湛江地区内利用杂种优势生产的半番鸭,二元杂交与三元杂交品种之间及同种类雌雄个体间均存在一定程度的差异,遗传变异较高,遗传多样性较丰富,为番鸭的遗传育种奠定了一定的基础。 | 张锐 孙美榕 王润莲 曾苑玲 杜慧 绍陈红 黄燕 杜炳旺 | 2010 | 生物学通报2010，45，11： | 3 |
| 12 | 猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化显示文摘猪肌生成抑制素(myostatin,MSTN)基因的cDNA去除信号肽后PCR扩增出成熟蛋白编码序列1.2kb片段熏将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞;筛选阳性克隆测序分析,结果表明与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamHI和SalI内切酶识别序列的另一对引物进行PCR扩增,将回收的1.2kbPCR目的片段定向克隆到pET28a(+)表达载体上,成功地构建了编码猪肌生成抑制素成熟蛋白的原核表达载体。LB液体培养基中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示重组菌表达的MSTN蛋白以包涵体形式存在;经薄层扫描仪扫描分析SDS-PAGE凝胶,表达的MST包涵体蛋白占菌体不溶性蛋白含量的27.9%,其相对分子质量为41451.3。所构建的表达载体中含六聚组氨酸标签HisTrap亲和柱纯化后纯度可达92.5%。该试验为获得较好的猪肌生成抑制素并制备抗体打下了良好的基础。 | 张锐 孙美榕 欧阳红生 张玉静 | 2004 | 生物技术通讯2004，15，1： | 2 |
| 13 | 硫氰酸铁络阴离子与结晶紫在水溶液中的显色反应研究显示文摘Fe(Ⅲ)离子在过量SCN-存在下可形成Fe(SCN)63-络阴离子。Likussar等利用Fe(SCN)63-与结晶紫(CV)形成深色的离子缔合物用氯仿萃取后,用光度法进行测定。水溶性大分子化合物如聚乙烯醇、阿拉伯树胶、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠等由于分子结构以及在水溶液中的形态不同于低分子表面活性剂,已被用作光度分析体系的增溶、增敏、增稳剂。本试验发现用上述水溶性大分子化合物作为Fe(SCN)63--CV缔合物的增溶、增稳剂,效果并不相同,这与水溶性大分子化合物本身的结构有关。其中以阿拉伯树胶的增稳、增敏效果最佳。 | 江淑芙 沈伟 孙美榕 王颖 | 1991 | 理化检验(化学分册)1991，27，2： | 2 |
| 14 | 猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化显示文摘 猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA在去除信号肽后,对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆,并测序分析,结果表明其与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamH 和Sal 内切酶识别序列的另1对引物进行PCR扩增,将回收的1.2kbPCR目的片段定向克隆到pET28a(+)表达载体上,成功地构建了猪肌生成抑制素成熟蛋白编码的原核表达载体。对成功构建的表达载体阳性克隆在LB液体培养基中用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳显示,重组菌表达的MSTN蛋白是以包涵体的形式表达的;SDS-PAGE凝胶经薄层扫描仪扫描分析,表达的MSTN包涵体蛋白占菌体不溶性蛋白含量的27.9%,表达的MSTN分子质量为41.4513ku。因为所构建的表达载体中含六聚组氨酸标签,用His-trap亲和柱进行纯化后,纯度可达92.5%。 | 张锐 孙美榕 张红莲 杨捷 黄燕 陈绍红 杜慧 欧阳红生 | 2004 | 西北农林科技大学学报(自然科学版)2004，32，9： | 2 |
| 15 | 胸腔内异位肾1例显示文摘 | 贾建民 孙美榕 | 1998 | 中国医学影像学杂志1998，6，1： | 2 |
| 16 | 软组织内骨软骨瘤1例显示文摘 | 贾建明 胡曦 孙美榕 | 2000 | 中国医学影像学杂志2000，8，6： | 1 |
| 17 | 金属卟啉-甲基紫精二连体配合物的合成及其光化学行为显示文摘本文合成了四(对-氯代甲基)苯基-甲基紫精卟啉及其Zn、Co、Mn配合物,用元素分析、红外光谱和紫外可见光谱进行了表征.研究了它们的光化学性质.结果表明.在TEOA中光照使M·TCMPP—mv￣2+发生了分子内从卟啉到甲基紫精的电子迁移反应.在ZnTCMPP-mv￣2+/TEOA/DMSO—H2O体系中可发生光敏化还原mv2+反应,生成较稳定的mv+.在Mn(Ⅲ)TCMPP-mv2+/CH3OH/H2O体系中可发生光助氧化甲醇反应,并检出了氧化产物甲醛. | 师同顺 孙美榕 王清民 孙晋峰 邹建忠 曹锡章 | 1994 | 无机化学学报1994，10，3： | 1 |
| 18 | 军曹鱼肌生成抑制素基因的克隆与序列分析显示文摘肌生成抑制素(Myostation,MSTN)是一种骨骼肌生长的负调控因子,其生物功能主要是抑制骨骼肌的生长。肌生成抑制素的活性降低或丧失,可使肌肉与其他组织的比例大大提高,因此在动物育种和医疗上有很大的潜在应用价值。目前包括鱼类在内的20多种脊椎动物的MSTN cDNA已经得到克隆和测序。本实验依据已知的鱼MSTN cDNA的保守区域设计一对特异引物,利用PCR技术分别从军曹鱼基因组中扩增出一个约1000bp的特异片段和300bp片段,所得目的片段回收纯化,将其酶切产物连接到pMDl8-T克隆载体上,转化入JM109感受态细胞中,挑取阳性克隆进行转化子鉴定,其质粒测序结果与文献报道的一致,证明成功地克隆了军曹鱼肌生成抑制素基因。 | 张锐 孙美榕 邓思平 刘楚吾 黄燕 杜慧 绍陈红 | 2008 | 生物技术通报2008，24，S1： | 1 |
| 19 | 猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化显示文摘猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA去除信号肽后对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆测序分析,结果表明与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamHI和SalI内切酶识别序列的另一对引物进行PCR扩增,将回收的1 2kbPCR目的片段定向克隆到pET28a(+)表达载体上,成功地构建了猪肌生成抑制素成熟蛋白编码的原核表达载体。对成功构建表达载体阳性克隆在LB液体培养基中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳显示,重组菌表达的MSTN蛋白是以包涵体的形式表达的;SDS-PAGE凝胶经薄层扫描仪扫描分析,表达的MSTN包涵体蛋白占菌体不溶性蛋白含量的27 9%,表达的MSTN分子量为41451 3D.因为所构建的表达载体中含六聚组氨酸标签,则用His-trap亲和柱进行纯化后,纯度可达92 5%.该试验为获得较好的猪肌生成抑制素基因抗原、制备抗体打下了良好的基础。 | 张锐 孙美榕 欧阳红生 张玉静 | 2004 | 云南农业大学学报2004，19，3： | 0 |
| 20 | 猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列表达载体的构建及其转录水平的检测显示文摘构建猪肌生成抑制素 (MSTN)成熟蛋白编码序列的克隆与表达载体 ,并对mRNA进行转录水平的检测 ,为获得较好的猪肌生成抑制素抗原、制备抗体打下良好的基础。猪MSTN基因的cDNA去除信号肽后 ,用PCR扩增的 1.2kb目的片段与 pMD18 T载体连接 ,将克隆载体的质粒DNA与同样用BamHⅠ和SalⅠ限制性内切酶酶解的表达载体 pET2 8a(+ )质粒定向连接 ,对筛选出的阳性克隆用酶切及测序法鉴定。对猪MSTN基因成熟蛋白编码序列进行反转录 ,对mRNANorthern杂交进行转录水平的检测。结果 ,所得到的序列与所设计的序列完全一致 ,表明成功地进行了猪MSTN基因编码序列的克隆及筛选 ;目的片段定向插入 ,阅读框架正确 ;RT PCR成功地反转录得到约 1.2kb的目的DNA片段 ,Northern杂交后对mRNA印迹放射自显影 ,见到清晰的 1. | 张锐 孙美榕 欧阳红生 张玉静 杨捷 黄燕 陈绍红 | 2003 | 中国兽医科技2003，33，10： | 0 |
您所在的机构暂未开通此部分的功能，请联系管理员