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| 1 | 牛卵泡液对牛卵母细胞体外成熟的影响显示文摘本研究系统探讨了牛卵泡液(BFF)对牛卵母细胞体外成熟的影响。在成熟培养液中添加10%的BFF,明显提高牛卵母细胞体外成熟后的囊胚发育率(45.1%比28.2%,P<0.05),虽然该处理对牛卵母细胞体外成熟后的受精分裂率无明显影响(87.5%比87.5%)。然而,当BFF在成熟培养液中的浓度提高到40%时,卵母细胞体外成熟后的受精分裂率(68.6%)和囊胚发育率(16.6%)均明显下降(P<0.05)。来自不同大小卵泡(2~5mm,5.1~8mm和大于8mm)BFF的卵母细胞体外成熟培养效果无明显差异,只是来自大于8mm卵泡的BFF将卵母细胞粘在一起,明显地降低成熟培养后的可用卵母细胞数。在成熟培养液中加入激素(2.5×103iu/L促性腺激素(HCG),50iu/L促乳素,0.05mg/L胰岛素、睾酮和雌二醇)对BFF的卵母细胞成熟培养效果无影响。这些结果表明,在成熟培养液中添加一定浓度的BFF可促进牛卵母细胞获得胚胎发育能力,BFF的这一作用与其来源的卵泡大小和激素的存在与否无关。 | 石德顺 卢克焕 | 1994 | 广西农业大学学报1994，13，1： | 35 |
| 2 | 流式细胞仪分离精子法的研究进展显示文摘以X精子和Y精子的DNA含量差别为基础的流式细胞仪分离精子技术是有效的哺乳动物性别控制方法。目前,流式细胞仪分离精子的速度与上世纪90年代初期相比已提高了30多倍,以3000个/秒的常规速度分离X精子或Y精子的准确率可达到85%~90%。迄今,用分离精子人工授精已产下了数万头的动物后代,而分离人的精子也开始应用到了避免X染色体连锁遗传疾病的生殖医学工程中。 | 陆阳清 张明 卢克焕 | 2005 | 生物技术通报2005，21，3： | 32 |
| 3 | 在成熟过程中添加牛血清和猪卵泡液对猪卵母细胞核成熟及体外受精后早期胚胎发育的影响显示文摘研究目的在于探讨在成熟过程中添加牛血清和猪卵泡液对猪卵母细胞核成熟、卵丘细胞扩散及体外受精后早期胚胎发育的影响。卵母细胞·卵丘细胞复合体在含FSH和LH的以下处理组的成熟液中成熟培养 2 3~ 2 4h :(1)对照组-改良TCM - 199+0 .1%PVA ;(2 )试验组 1-改良TCM - 199+10 %新生牛血清 ;(3)试验组 2 -改良TCM - 199+10 %猪卵泡液 ,再移至无FSH和LH的不同处理组的成熟液中成熟培养 2 3~ 34h。试验 1中 ,卵母细胞在 4 6~ 4 8h成熟培养后 ,观察卵丘细胞扩散情况 ,并对卵母细胞进行固定和染色 ,鉴定卵母细胞减数分裂情况 :试验 2中 ,对在不同处理组的成熟液中成熟培养 4 6~ 4 8h的卵母细胞进行体外受精 ,再培养 8d。受精后第 2天检查分裂率、第 6天检查桑椹胚 /囊胚率、第 8天检查囊胚率。 4 6~ 4 8h成熟培养后试验组 1和试验组 2的大部分卵母细胞 -卵丘细胞复合体的卵丘细胞完全扩散 ,而对照组的卵丘细胞只有 5 0 %扩散。试验组 1和试验组 2的卵母细胞核成熟率分别为 39.9% (77/ 193)和 4 4 .3% (93/ 2 10 ) ,与对照组的卵母细胞核成熟率 4 8.1% (99/ 2 0 6 )相比没有显著差异 (P <0 .0 5 )。卵母细胞分裂率试验组 1(5 0 .0± 1.8) %和试验组 2 (49.9± 2 .6 ) %与对照组的卵母细胞分裂率 (49.0± | 卢晟盛 张艳玲 石德顺 卢克焕 | 2002 | 黑龙江畜牧兽医2002，，8： | 25 |
| 4 | 受精液中肝素和咖啡因的组合对牛卵母细胞体外受精的影响显示文摘采用2种肝素浓度(10,30mg/L)与3种咖啡因浓度(2.5,5,10mmol/L)的交叉组合,以30mg/L肝素的受精液为对照,探讨肝素和咖啡因对牛卵母细胞体外受精的影响,并确定受精后将卵母细胞移至单层细胞的合适时间。结果表明,当卵母细胞在受精后5h移至单层细胞时,10mg/L肝素加5mmol/L咖啡因或30mg/L肝素加2.5mmol/L咖啡因的体外受精效果最好,二者的囊胚率和囊胚孵化率分别为56.9%±7.0,81.1%±12.7及56.9%±7.0,78.9%±9.8。 | 文国艺 卢克焕 | 1994 | 广西农业大学学报1994，13，1： | 20 |
| 5 | 生长因子对卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外发育的影响显示文摘为了探讨生长因子(EGF,PDGF)对牛卵母细胞体外成熟与早期胚胎体外发育的影响,本研究进行了两个实验。实验1:在卵母细胞体外成熟(IVM)中,将卵母细胞平均随机的放入表皮生长因子浓度为0,2.5,25,50μg/L的成熟培养液和对照组中。实验2:在早期胚胎体外培养(IVC)过程中,将受精卵平均随机分配入5个不同培养液的处理组:(1)TCM-199+10%阉公牛血清(SS);(2)TCM-199+EGF+PDGF;(3)TCM-199+EGF;(4)TCM-199+PDGF;(5)TCM-199+无生长因子、其中EGF:50μg/L,PDGF:0.1μg/L。2,3,4,5组有0.1%PVA和0.3%BSA,并与颗粒细胞单层协同培养。卵母细胞的体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)和早期胚胎体外培养(IVC)的方法与Lu等(1987)报道的相同。结果表明:浓度为50μg/L的处理组分裂率与对照组无差异(89.0%,92.4%,P>0.05),而浓度为0,2.5,25μg/L的处理组分裂率均显著低于对照组(78.6%,82.3%,84.3%,P<0.05),在囊胚率和第7d一级胚胎率上各组均无差异。EGF在体? | 李兵兵 卢克焕 | 1994 | 广西农业大学学报1994，13，1： | 20 |
| 6 | 现行牛IVF程序在水牛体外受精的应用研究显示文摘本研究对我所现行的牛体外受精程序 ( IVF)应用于水牛体外受精的可行性进行了探讨。结果表明 ,水牛卵巢生长卵泡少 ,平均仅可回收 5枚卵母细胞 ,只相当于黄牛 ( 14.3个 )的1/ 3。水牛卵母细胞的体外成熟率为 51.7% ,体外受精卵裂率为 58.7% ,均极显著地低于黄牛(分别为 87.3%和 69.6% ,P<0 .0 1)。水牛卵母细胞经体外受精后 ,早期胚胎的体外发育速度较黄牛快 ,体外受精后的第 6d囊胚发育率占 36.4 % ,累计到第 7d时占 80 .7% ,极显著地高于黄牛 ( 57.6% ,P<0 .0 0 1)。水牛早期胚胎的体外囊胚发育率为 31.5% ,与黄牛的 ( 39.2 % )差异不显著 ;孵化囊胚率为 73.8% ,也与黄牛的相仿。实验结果表明 ,我所现行的牛 IVF程序应用于水牛的体外受精研究是有效、可行的 ,特别是早期胚胎的体外培养系统 ,已接近于黄牛的水平。但尚需设法提高水牛卵母细胞的体外成熟培养效果 。 | 谭世俭 阳年生 石德顺 卢克焕 | 1998 | 广西农业大学学报1998，17，4： | 19 |
| 7 | 哺乳动物性别控制研究进展显示文摘 | 卢克焕 | 2002 | 中国兽医学报2002，22，4： | 19 |
| 8 | 不同血清种类及其浓度对牛卵母细胞体外受精的影响显示文摘以3个试验探索能否用自行采集、价廉的成年牛血清(发情母牛血清OCS和阉公牛血清SS)来代替犊牛血清(FCS)。试验1,比较OCS和FCS及其2种浓度(10%和20%)对牛卵母细胞体外成熟的影响。结果表明,OCS影响牛卵母细胞体外成熟的效果与FCS的效果无显著差异(均达到90%以上)。同时,2种浓度间亦无显著差异。试验2,比较不同浓度的OCS(0,1%,5%,10%,20%,50%)对牛早期胚胎体外发育的影响。结果表明,早期胚胎的总囊胚率及7天龄囊胚率随着OCS浓度从0到20%的增加而提高。但当浓度增至50%时囊胚率则有下降之趋势,然而与20%浓度比较,差异不显著。试验3,探讨能否利用采集简单且价廉的SS来代替OCS,进行了SS与OCS在卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外培养两阶段的效果比较。结果表明,SS亦完全可以替代OCS。 | 卢晟盛 卢克焕 | 1994 | 广西农业大学学报1994，13，1： | 18 |
| 9 | 动物性别控制研究现状显示文摘 | 梁明振 卢克焕 | 2002 | 上海畜牧兽医通讯2002，，4： | 17 |
| 10 | 牛体外受精胚胎一步脱防冻剂冷冻方法的研究显示文摘为了研究适合于牛体外受精胚胎的一步除防冻剂的冷冻方法,特进行两个试验。试验1分别用1.5M甘油+0.25M蔗糖、1.5M乙二醇和1.5M丙二醇作防冻剂冷冻体外受精后第7天,已发育至囊胚阶段的牛胚胎。使胚胎降温至-7℃后,植冰,然后以0.3℃/分的速率降温至-30℃,立即将胚胎投入液氮中冷冻保存。在37℃水中解冻胚胎后,使其直接在含15%胎犊血清(FCS)的磷酸缓冲液(PBS)中脱去防冻剂。经体外培养72h后,3组胚胎的孵化率分别为77.27%(102/132)、73.24%(104/142)、47.90%(57/119),第1、2组的孵化率极显著高于第3组(P<0.01),说明用1.5M丙二醇溶液冷冻的胚胎,在解冻后不宜直接在PBS中脱防冻剂。试验2比较用不同浓度(1.0M01.5M,2.0M)的乙二醇和不同投液氮温度(-25℃,-30℃,-35℃)冷冻胚胎的效果。结果表明乙二醇浓度和投液氮温度对胚胎孵化率均无显著影响(P>0.05),各组胚胎的孵化率变动于74.44%-85.48%之间。 | 阳年生 黄凤玲 卢克焕 | 1996 | 中国畜牧杂志1996，32，2： | 15 |
| 11 | 聚维酮碘对常温保存猪精子质量的影响显示文摘通过在猪鲜精和17℃保存精液中添加聚维酮碘(PVP-Ⅰ),探讨其杀灭精液有害细菌的效果和对精子质量的影响,从而达到阻断病原菌垂直传播的目的。保存后不同时间时取样精液接种和培养,用细菌菌落计数的方法检测精液中细菌菌落总数,并用MicroScanA/S4细菌鉴定仪鉴定细菌种类。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率、活力,低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整性线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)测线粒体活性和考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,用PVP-Ⅰ消毒猪精液时,在0~0.27g/L随着PVP-Ⅰ质量浓度的增加杀菌效果越好。精液中添加0.20g/L和0.27g/L PVP-Ⅰ能杀死棒状杆菌、大肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、链球菌(作用1h),但不能杀死变形杆菌。在猪精液稀释液中添加质量浓度0~0.20g/L的PVP-Ⅰ对17℃保存猪精子质量无影响。结果表明,聚维酮碘在质量浓度0.20g/L能杀死猪精液中的棒状杆菌、大肠杆菌、不动杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、链球菌,并且对17℃保存猪精子质量常规指标(活率、活力、线粒体活性、质膜完整性和顶体完整性)无影响。 | 包宋权 梁世忠 韦明宇 卢晟盛 卢克焕 | 2011 | 中国兽医学报2011，31，1： | 15 |
| 12 | 两种方法对牛体外受精及体外发育的影响显示文摘本研究包括2个试验。试验1,采用由多种大分子物质组成的生物试剂Percol做成离心梯度,离心处理精液获得较高活率的精子。将其用于卵母细胞的体外受精,在使用45μL大小的受精滴及2×106个/mL的最终受精精子浓度时,加入20个或40个卵母细胞,二者均获得较高的分裂率(%)89.0±5.0、88.1±3.8及囊胚率(%)51.0±7.0、46.3±16.7。试验2,为了更接近胚胎在母牛体内发育的实际状态(动态),采用一种新的方法即将摇床振动培养引入牛早期胚胎的体外发育阶段,以期提高胚胎发育质量。结果表明,在早期胚胎基数及环境因素完全一致的前提下,振动培养组的囊胚发育率(%)及囊胚卵化率(%)分别为61.1±12.2、82.6±6.8,而常规的静置培养组为67.4±6.3、88.0±7.4,方差计算表明二者无显著差异(P>0.05)。 | 文国艺 卢克焕 | 1996 | 中国兽医学报1996，16，5： | 14 |
| 13 | 动物性别控制研究的进展显示文摘1前言1.1自然性别比例的理论基础在自然条件下,哺乳动物性别的百分数比例基本保持50:50。对这一合理的性别比例也许至少可以从两个方面去理解。首先,从精子发生理论看,精子在生精管产生过程中,携带X染色体和Y染色体的精子数目是相等的,这是精子细胞在减数... | 卢克焕 | 1999 | 广西畜牧兽医1999，15，1： | 13 |
| 14 | 牛体外受精胚胎移植后的怀孕率及双胎率显示文摘为了测定牛体外受精胚胎移植到受体母牛后的怀孕率和双胎率,本研究共进行了3个胚胎移植试验。试验1,测定新鲜胚胎移植后的怀孕效果。将160枚新鲜胚胎移植到80头受体母牛(每头受体接受2枚胚胎),移植后60~90d的怀孕率为65%(52/80),其中双胎率为50%(2/52)。试验2,测定经室温保存4~18h的胚胎移植后的怀孕效果。供试验用的68头受体母牛均于移植前7d(即发情当天)进行人工授精。移植时每头受体牛接受1枚胚胎。移植后40~65d的怀孕率为76.5%(52/68),其中双胎率为65.4%(34/52)。试验3,测定冷冻胚胎移植后的怀孕效果。将454枚冷冻胚胎移植到227头受体母牛,每头接受2枚冻胚。移植后50~60d的怀孕率为61.7%(140/227),其中双胎率为25%(35/140)。本研究结果表明,用完全体外化技术生产的牛胚胎移植到受体母牛后可获得满意的怀孕率和双胎率,这一技术将为加速向用牛生产的发展开辟一条崭新的途径。 | 卢克焕 黄凤玲 阳年生 | 1994 | 广西农业大学学报1994，13，1： | 13 |
| 15 | 稀释液中卵黄浓度对猪精液冷冻保存效果的影响显示文摘为探索卵黄在猪精液冷冻中的应用效果,筛选出猪精液冷冻稀释液中卵黄的最佳浓度,分别在猪精液冷冻稀释液中添加不同比例(20%、25%、30%)的卵黄,并以精子活率、活力、路径速率(VAP)、轨迹速率(VCL)、直线运动速率(VSL)等为指标,对猪精液稀释后、平衡后和冷冻后3个阶段的精液质量进行比较分析。结果表明,将猪精液冷冻稀释液中卵黄的添加量提高5~10个百分点,其稀释后、平衡后及解冻后3个阶段精子的5个运动参数与常规添加量相比均无显著差异(P>0.05)。可见,提高猪精液冷冻稀释液中卵黄浓度未能显著改善猪精液冷冻后的质量,综合考虑,猪精液冷冻稀释液中卵黄浓度仍以20%(v/v)为宜。 | 胡传活 孙艳艳 胡传水 王献伟 李林 郭堂玉 卢克焕 | 2010 | 广西农业科学2010，41，6： | 13 |
| 16 | 日粮不同硒水平对公猪繁殖及精浆营养生化参数的影响显示文摘选择年龄、体重、精液质量较一致、正在使用的健康壮年长白公猪5头,采用5×5正交拉丁方试验设计,在不同阶段分别饲喂含硒量为0.05mg·kg-1(处理1)、0.15mg·kg-1(处理2)、0.25mg·kg-1(处理3)、0.35mg·kg-1(处理4)、0.45mg·kg-1(处理5)日粮,研究硒对公猪繁殖参数、精浆生殖激素、精浆营养生化参数的影响。结果表明:(1)处理1公猪精子畸形率显著高于处理4公猪精子的畸形率(P<0.05);(2)处理4公猪精浆促卵泡生成素(FSH)、睾酮(T)的浓度显著高于处理1公猪精浆FSH、T的浓度(P<0.05);(3)处理4公猪精浆的谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性显著高于处理1公猪精浆的GSHPx活性(P<0.05);(4)采精量、精子密度、精子活率、精液pH值、精浆促黄体生成素(LH)浓度、精浆尿素含量、精浆总蛋白含量,在不同处理条件下均没有显著的差异(P>0.05);(5)精子活率、精子畸形率、精浆FSH浓度、精浆LH浓度、精浆T浓度、精浆尿素的含量、精浆的GSHPx活性与日粮硒含量之间均存在着一定的规律性:即在一定范围内(0.35mg·kg-1),它们的变化随日粮硒含量的增加而增加或降低,超出该范围则降低或升高;(6)综合上述结果,长白公猪日粮硒含量以0.35mg·kg-1较为适当。 | 梁明振 卢克焕 黎宗强 卢晟盛 石德顺 牛向丽 梁贤威 梁坤 文崇利 林宝东 梁戈 | 2003 | 广西农业生物科学2003，22，3： | 13 |
| 17 | 颗粒细胞制备单层细胞时其浓度对牛早期胚胎体外发育的影响显示文摘应用颗粒细胞制备单层细胞时,将其浓度分为8组:64×106、32×106、16×106、8×106、4×106、2×106、0.5×106、0个/mL,观察了不同浓度颗粒细胞对体外受精早期胚胎体外发育的影响。试验结果表明,制备单层细胞的适宜颗粒细胞浓度为(0.5~32)×106个/mL,其中16×106个/mL浓度组的囊胚率为42.3±8.0%,明显高于对照组(22.7±8.3%)及64×106个/mL浓度组(25.2±12.O%)(P<0.01)。就发育速度和胚胎质量而言,该组胚胎的发育较快且质量较好,而且标准差反映批与批之间结果较为稳定,是理想的做单层浓度。 | 文国艺 卢克焕 | 1994 | 中国兽医学报1994，14，2： | 12 |
| 18 | 促性腺激素对猪卵母细胞体外成熟的影响显示文摘在成熟液中同时添加不同浓度(0.25~2.0μg/mL)FSH和不同浓度(0.25~2.0μg/mL)LH,探讨这2种促性腺激素结合使用对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果显示,当FSH的添加浓度为0.25~2.0μg/mL及LH的添加浓度为0.25~2.0μg/mL时,猪卵母细胞的核成熟率极显著高于没有添加FSH和LH的对照组(P<0.01),而FSH和LH不同浓度组合之间对猪卵母细胞核成熟影响差异不显著(P>0.05)。结果表明,成熟液中同时添加0.25μg/mLFSH和0.25μg/mLLH便能极显著地促进猪卵母细胞的核成熟率,国产FSH和LH用于猪卵母细胞体外成熟研究是可行的。 | 卢晟盛 卢克焕 | 2004 | 西南农业大学学报(自然科学版)2004，26，6： | 12 |
| 19 | 流式细胞仪在猪性别控制中的应用初探显示文摘在国内首次报道使用流式细胞仪对猪进行性别控制研究。猪精液通过流式细胞仪进行X、Y精子分离,分离精子经过数小时保存后,用于陆川母猪输卵管授精,最后产出健康仔猪。试验结果表明:①第1次(2005-10-14)精子分离的纯度为:X88%、Y83%;活力为X35%、Y21%。第2次(2006-01-13)纯度为:X70%,Y68%;活力为:X52%,Y36%。②该试验中母猪受孕率为25%,未受孕者仍然可在生产条件下继续繁殖。③受孕母猪(1头)产出健康仔猪5头,出生成活率100%,大小均匀,活力良好,哺乳期(28 d断奶)平均日增重与生产群极为接近(151.43 g1、48.93 g),但产活仔数低(生产群为8.4头/窝)。④仔猪雌性率为60%。试验结果初步表明:在该实验室现有条件下,使用流式细胞仪分离的X、Y精子,母猪通过输卵管受精可以产出健康仔猪;精子分离对仔猪哺乳期生长无明显影响;对性别比例有一定调控作用。 | 曾有权 陆阳清 牛金涛 黎江 蓝海恩 潘天彪 张明 蒙冰 卢克焕 | 2006 | 安徽农业科学2006，34，18： | 12 |
| 20 | 不同冷冻保护液和解冻温度对猪精液冷冻效果的影响显示文摘在BF5稀释液中分别添加不同水平的牛血清白蛋白(BSA)(0.5,1,1.5g/L)、二甲基乙酰胺(DMA)(0.5%,1%,1.5%)、甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)(1,2.5,5g/L),对成年健康猪精液进行冷冻保存,于不同温度(37,50,70℃)解冻后分别检测冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性、顶体完整率、线粒体活性。结果显示,0.5g/LBSA组冷冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性均高于其他组,但差异不显著(P>0.05)。1%DMA组冷冻后精子活率和活力显著优于1.5%DMA组(P<0.05),同时也高于对照组(3%甘油)冻后精子活率和活力,但差异不显著。不同质量浓度CLC组冷冻后精子的活率、活力、质膜完整性和线粒体活性与对照组相比差异不显著。50℃和70℃解冻组精子的活率和线粒体活性显著高于37℃解冻组的精子;50℃解冻组精子的活力和质膜完整率显著高于其他2组。因此,在猪精液冷冻稀释液中,用DMA可以代替甘油作为渗透性保护剂,且以1%DMA、50℃解冻最佳。 | 郭堂玉 凌泽继 韦明宇 卢晟盛 卢克焕 | 2010 | 中国兽医学报2010，30，7： | 12 |
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