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| 1 | 毛皮动物传染病的综合防治措施显示文摘为了保证毛皮动物饲养业的发展,广大饲养者应该遵照“预防为主、防重于治”的原则,对恶性传染病必须重点预防:对一般性疾病应加强饲料、饮水卫生管理,对兽群加强饲养,提高机体抗病力。 | 鲍坤 冯二凯 | 2010 | 北方牧业2010，，14： | 0 |
| 2 | 坏死梭杆菌研究进展显示文摘坏死梭杆菌(Fusobacterium necrophorum,Fn)是一种严格厌氧的革兰阴性多形态杆菌,其致病因子包括内毒素、白细胞毒素、血小板凝集因子、血凝素和溶血素等,其中主要的致病因子是白细胞毒素。由坏死梭杆菌引起的疾病在不同国家和地区均有发生,鹿、羊等反刍动物感染坏死梭杆菌时表现为跛行,关节肿大,肝脓肿和腐蹄病,猪、马等动物感染坏死梭杆菌时主要表现为跛行,严重时继发其他细菌感染,对养殖业造成巨大损失;人类感染该细菌时表现为急性咽炎综合征(Lemierres syndrome)。论文通过对国内外坏死梭杆菌及其疫苗研究和新型佐剂的开发进行综述,以期为该细菌疫苗的研制提供参考。 | 孟祥玉 佟盼盼 冯二凯 陈立志 | 2017 | 动物医学进展2017，38，5： | 7 |
| 3 | 坏死梭杆菌44.5ku外膜蛋白的免疫原性分析显示文摘为分析从坏死梭杆菌中获得的44.5 ku外膜蛋白(OMP)免疫小鼠后的免疫原性,用SLS和LDS等试剂从坏死梭杆菌中提取44.5 ku外膜蛋白,将其作为免疫抗原经弗氏不完全佐剂乳化免疫小鼠,3次免疫后采血,获取血清并进行抗体效价、Western-blotting免疫原性和保护力检测。结果显示,三免后试验组小鼠血清抗体效价高,同时在攻毒试验中具有较好的保护力,Western-blot显示具有较好的反应特异性。结果表明,坏死梭杆菌44.5 ku外膜蛋白具有较好的免疫应答水平,为坏死梭杆菌亚单位疫苗的研究提供了基础数据。 | 徐晶 陈立志 李淑艳 冯二凯 | 2016 | 中国兽医科学2016，46，4： | 4 |
| 4 | 细菌菌落计数培养基TTC浓度的筛选研究显示文摘以细菌菌落计数方法,研究大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌在不同2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)浓度的平板计数琼脂上菌落形态和数量的变化情况。结果表明,3种菌在TTC终浓度≥0.0008%时,菌落颜色比较明显,逐渐加深;大肠埃希菌在TTC终浓度≤0.01%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,TTC终浓度≥0.02%菌落数量明显减少;金黄色葡萄球菌在TTC终浓度≤0.004%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,在0.04%TTC平板计数琼脂上不能生长;鼠伤寒沙门氏菌TTC终浓度≤0.01%的平板计数琼脂上的菌落数量和对照组无显著差异,在TTC终浓度≥0.02%的平板计数琼脂上菌落数量减少。不同浓度的TTC对鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希菌的生长影响较小,对金黄色葡萄球菌影响较大,故在食品(或饲料)细菌总数检测中,TTC的终浓度应选在0.0008%~0.004%之间。 | 刘晓颖 冯二凯 吴洪超 冯卓 李光玉 | 2015 | 特产研究2015，37，2： | 3 |
| 5 | 水貂阿留申病诊断抗原研究概述显示文摘近年来,随着水貂养殖行业的不断发展,一些疫病也成为了制约水貂养殖业发展的重要因素。水貂阿留申病作为毛皮动物的三大疫病之一(阿留申病、犬瘟热、病毒性肠炎),是导致母貂产仔率下降、公貂配种能力降低和毛皮质量下降的一种高度接触性传染病。至今为止,还没有商品化的疫苗来控制该病的传播及蔓延。控制水貂阿留申病最好的方法是通过检测淘汰所有抗体为阳性的水貂,进而达到净化貂群的目的。而在抗体检测过程中,诊断抗原的制备和纯化决定着检测方法的敏感性、特异性和准确性。论文对目前阿留申病毒细胞抗原及基因工程抗原研究进展做一综述,为今后该病病原检测工作提供参考。 | 于凯 倪佳 冯二凯 万洪理 陈立志 | 2017 | 动物医学进展2017，38，4： | 3 |
| 6 | 坏死梭杆菌外膜蛋白提取及免疫原性分析显示文摘从坏死梭杆菌(Fusobacterium necrophorum,FN)中提取外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)并分析免疫原性。采用无菌心脑浸液(BHI)肉汤培养基培养坏死梭杆菌,用20mmol/L HEPEs-LiCl缓冲液提取外膜蛋白,经SDS-PAGE、Western blot和接种小鼠病理学检测分析表明,具有唯一条带,分子质量为44.5ku,具有良好的免疫活性并有一定毒性,研究结果为坏死梭杆菌亚单位疫苗研制奠定了基础。 | 徐晶 陈立志 刘晓颖 冯二凯 | 2016 | 动物医学进展2016，37，6： | 2 |
| 7 | 坏死梭杆菌白细胞毒素研究进展显示文摘坏死梭杆菌白细胞毒素(Lkt)是一组对反刍动物白细胞特别是多形性白细胞(PMNs)有特异性毒性作用的细胞外毒素,被认为是坏死梭杆菌感染动物的主要毒力因子。白细胞毒素的物理稳定性较低,高温或极端pH环境中都能使白细胞毒素活性丧失。研究发现,白细胞毒素开放阅读框(ORF)全长9 726bp,由3个基因(lktB、A和C)组成,结构基因是第2个基因(lktA)。白细胞毒素对白细胞的毒性作用有剂量依赖性,并且溶血活性较低,不能在豚鼠猪皮肤上形成皮肤坏死症状。 | 冯二凯 陈立志 刘晓颖 | 2009 | 动物医学进展2009，30，7： | 2 |
| 8 | 梅花鹿致病性源坏死梭杆菌的分离与鉴定显示文摘为确定湖北省恩施自治州某鹿场致患病鹿蹄腐烂的病原菌,本研究于患病梅花鹿的前蹄病健结合处采集病料并对其进行细菌分离培养,最终分离到一株厌氧菌。对该细菌进行了形态观察、生化试验、16S rRNA基因序列测定、细菌生化鉴定仪鉴定、药物敏感性试验以及小鼠致病力试验等。结果显示该细菌在显微镜下呈革兰氏阴性、丝状、长短不一的杆菌。16S rRNA基因序列测定结果显示该分离菌株与多株坏死梭杆菌参考株的同源性均为99%,将其命名为HNFnf;经Vitek细菌鉴定仪鉴定该细菌为坏死梭杆菌;药敏试验结果显示,该菌对青霉素、头孢类等中度敏感,对阿米卡星、链霉素、庆大霉素耐药。本研究为临床治疗由坏死梭杆菌引起的反刍动物'腐蹄病'与'肝脓肿'提供参考依据。 | 孟祥玉 佟盼盼 冯二凯 陈立志 | 2018 | 中国预防兽医学报2018，40，4： | 2 |
| 9 | 鹿布氏杆菌病的常用检测方法显示文摘鹿布氏杆菌病是由布氏杆菌(Brucella)引起的一类人兽共患的急、慢性传染病,在我国某些养鹿场中时有发生。大多数鹿感染布氏杆菌病后没有明显的临床表现,很难通过流行病学和临床症状进行确诊。目前对于鹿病的诊断多采用血清学及病原学检测方法,消除鹿布氏杆菌病最有效的方法是准确的诊断后,大规模地屠宰病鹿并进行无害化处理,从而有效地切断传染源。 | 刘晓颖 程世鹏 冯二凯 陈立志 | 2012 | 特种经济动植物2012，15，10： | 0 |
| 10 | Vero细胞生物反应器微载体悬浮培养工艺的建立显示文摘为了实现非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)在生物反应器中的大规模生产,并使其可在以Vero细胞为细胞基质的病毒疫苗生产中应用,试验采用控制变量法对Vero细胞微载体悬浮培养相关参数进行逐一摸索研究。结果表明:在3~5 g微载体、1 L培养体系中,使用DMEM培养基、血清浓度为8%~10%、初始接种密度为30~50个/球,采用灌流式培养方式可使细胞达到最佳状态。说明成功建立了Vero细胞生物反应器的微载体悬浮培养工艺。 | 盛程程 冯二凯 任飞 李文娟 陈立志 | 2018 | 黑龙江畜牧兽医2018，0，1： | 8 |
| 11 | CPV-2c型犬细小病毒分离及其VP2序列分析显示文摘采用犬细小病毒PCR诊断方法对临床的犬细小病毒病料进行检测,通过序列鉴定确定为1株CPV-2c型犬细小病毒(命名为2c-I),与近年来国内分离株的核苷酸同源性为99.3%~99.9%,与国外分离株的核苷酸同源性为98.5%~99.8%。此外,CPV 2c-I分离株在267、324、377、440位点氨基酸发生了变异。通过构建进化树发现,2c-I隶属我国目前流行CPV-2c的分支,但与国内最近3年内分离CPV-2c存在一定的遗传变异。 | 施鹏飞 程悦宁 冯二凯 罗国良 王振军 易立 | 2020 | 特产研究2020，42，1： | 5 |
| 12 | 水貂阿留申病抗体检测技术研究及应用进展显示文摘水貂阿留申病严重危害毛皮动物产业发展,其病毒中和抗体不能提供保护能力,相反可造成水貂持续性感染,迄今尚无特异的防治方法。因此世界各国主要通过抗体检测技术筛选并淘汰阳性水貂以达到阿留申病的净化清除。本文介绍了阿留申抗体检测的经典技术,常规检测技术对流免疫电泳及一些有潜在应用价值的新兴技术,并对其发展趋势做了展望。 | 万洪理 冯二凯 吴洪超 杨艳玲 倪佳 陈立志 | 2015 | 病毒学报2015，31，1： | 3 |
| 13 | 以斑马鱼为模式动物的病原微生物感染模型的研究进展显示文摘斑马鱼作为一种模式动物,已经被广泛地应用于遗传学和发育生物学研究,随着对该生物免疫系统的深入研究,人们发现斑马鱼有较为完整的特异性免疫系统,并具备血液系统发育过程透明和对特异性免疫系统依赖性低等特点,从而使这种新型模式动物在免疫学研究中的应用开始为人们所重视。已有报道将斑马鱼用于研究多种病原菌和病毒引起的哺乳动物急性感染过程。现对以斑马鱼为模式动物的病原微生物感染模型的研究作一概述。 | 王燕 陈立志 刘晓颖 冯二凯 姚志利 | 2010 | 吉林农业大学学报2010，32，S1： | 3 |
| 14 | 影响坏死梭杆菌分泌白细胞毒素因素的研究显示文摘利用已分离坏死梭杆菌菌株,建立坏死梭杆菌白细胞毒素活性体外检测方法,并评价培养条件对坏死梭杆菌天然白细胞毒素活性的影响。结果表明,预还原、厌氧无菌心脑浸液肉汤培养基(pH7.3左右)、培养时间10h~12h(对数生长期后期),此工艺参数下获取的细菌培养物上清液的白细胞毒性最大。获得的坏死梭杆菌天然白细胞毒素经Western blot证实,能被抗白细胞毒素重组BSBSE蛋白的兔血清识别,表明提取的白细胞毒素具有反应原性。 | 冯二凯 陈立志 刘晓颖 汪孙杰 曹阅 徐晶 | 2012 | 动物医学进展2012，33，11： | 2 |
| 15 | 坏死梭杆菌白细胞毒素bsbse-gas-sh真核表达载体的构建显示文摘根据GeneBank中提供的白细胞毒素基因序列,设计引物并扩增bsbse和gas-sh片段。通过T4 DNA Ligase连接形成融合片段bsbse-gas-sh,亚克隆pMD○R18-T质粒和测序。成功构建表达bsbse-gas-sh毕赤酵母表达载体pPIC9K-bsbse-gas-sh。为下一步bsbse-gas-sh的真核表达及免疫机理研究奠定了基础。 | 汪孙杰 陈立志 刘晓颖 冯二凯 曹阅 徐晶 | 2012 | 特产研究2012，34，4： | 1 |
| 16 | 坏死梭杆菌白细胞毒素部分融合基因的真核表达及生物学特性研究显示文摘为了解坏死梭杆菌白细胞毒素的致病机制,本研究将实验室前期构建的坏死梭杆菌白细胞毒素基因部分融合基因的真核表达质粒(p PIC9K-bsbse-gas-sh)转化毕赤酵母KM71H细胞,1%甲醇诱导其表达目的蛋白;SDS-PAGE结果显示,甲醇诱导3 d后,重组BSBSE-GAS-SH蛋白以分泌形式表达于培养物上清液中,分子量约为117.9 ku;western blot表明重组蛋白能够与抗BSBSE抗血清发生反应,具有良好的反应原性;细胞毒性试验表明重组蛋白对小鼠肝细胞和巨噬细胞均具有细胞毒性作用,并且具有剂量依赖性,其中重组蛋白对小鼠巨噬细胞的细胞毒性作用更强。本研究为揭示坏死梭杆菌白细胞毒素致病机制提供了相关的实验数据。 | 冯二凯 刘晓颖 佟盼盼 任飞 尹茉莉 于凯 陈立志 | 2016 | 中国预防兽医学报2016，38，7： | 1 |
| 17 | 致病性坏死梭杆菌血凝素相关外膜蛋白基因的克隆与生物信息学分析显示文摘为了扩增坏死梭杆菌(Fusobacterium necrophorum)血凝素相关外膜蛋白基因完整的核苷酸序列和了解该蛋白的分子特征,以坏死梭杆菌AB型菌株的基因组DNA为模板,利用染色体步移技术分别扩增已知序列的5'端旁侧序列和3'端旁侧序列,并测序和拼接,对拼接结果进行生物信息学分析。结果显示,成功获得F.necrophorum血凝素相关外膜蛋白基因的完整核苷酸序列,全长4247bp,含有1个3372bp的开放阅读框,编码1123个氨基酸,蛋白质分子质量约为120ku。生物信息学分析表明,该蛋白没有明显的信号肽序列和跨膜结构;该蛋白质第750位-1123位氨基酸残基区域具有较强的抗原性;SMART预测显示,该蛋白存在一个自转运蛋白结构域、血凝活性结构域和多个参与碳水化合物代谢的结构域。上述结果提示,成功获得F.necrophorum血凝素相关外膜蛋白基因的完整核苷酸序列,编码约为120ku的蛋白质,该蛋白质可能是具有血凝活性的外膜自转运蛋白家族的成员,并且该蛋白质的C端可能具有较强的抗原性。 | 吴洪超 刘晓颖 冯二凯 闫喜军 陈立志 | 2015 | 特产研究2015，37，3： | 1 |
| 18 | 坏死梭杆菌外膜蛋白基因的克隆与表达显示文摘依据GenBank中登录的坏死梭杆菌外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)基因序列,设计1对引物进行PCR扩增OMP片段并克隆至pET-28a中,构建原核表达重组质粒pET-28a-OMP。将pET-28a-OMP转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,表达含2个His的重组蛋白。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,该重组蛋白分子质量为93ku,为包涵体表达,具有反应原性。本试验结果为坏死梭杆菌OMP免疫机制的研究提供了基础数据。 | 徐晶 陈立志 刘晓颖 冯二凯 汪孙杰 曹阅 | 2013 | 中国畜牧兽医2013，40，6： | 1 |
| 19 | 致病性坏死梭杆菌天然白细胞毒素毒性研究显示文摘为研究坏死梭杆菌白细胞毒素毒性及其致病机理,通过超滤截留技术从细菌培养物上清液分离获得坏死梭杆菌天然白细胞毒素,并通过细胞毒性试验、动物试验以及透射电镜观察等手段对分离获得的白细胞毒素的毒性进行研究。结果表明:坏死梭杆菌白细胞毒素对牛外周血白细胞具有细胞毒性作用,毒素毒性强弱与剂量呈正相关性,高浓度白细胞毒素能裂解白细胞,低浓度白细胞毒素则可诱导细胞凋亡。坏死梭杆菌白细胞毒素一方面能诱导宿主形成坏死病灶,另一方面也能诱导宿主产生对抗坏死梭杆菌感染的免疫保护力。 | 冯二凯 陈立志 刘晓颖 姚志利 王艳 | 2013 | 吉林农业大学学报2013，35，4： | 0 |
| 20 | 貂源肺炎克雷伯氏菌的分离及毒力和耐药性的分析显示文摘为探讨采自山东省部分地区的10株貂源肺炎克雷伯氏菌(Kp)的毒力和耐药性,本研究从疑似肺炎发病水貂的肺中分离出10株革兰阴性菌,经PCR及Vitek全自动细菌鉴定仪鉴定为肺炎克雷伯氏菌。对10株肺炎克雷伯氏菌进行人工感染及毒力试验、药敏试验、耐药基因检测及接合转移试验。结果显示,10株肺炎克雷伯氏菌攻毒后小鼠全部死亡,肺、肝、脾和肾均有不同程度的出血。分离株中大部分肺炎克雷伯氏菌对临床常用药物表现出多重耐药,其中对氨基糖苷类、青霉素类、三代头孢菌素类、喹诺酮类及磺胺类抗生素的耐药性较高,但对阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南及多黏菌素等抗生素敏感。耐药基因TEM、SHV和CTX-M的检出率分别为100%、70%和80%,以TEM基因检出率最高。 | 韩坤 白雪 闫喜军 孟祥玉 冯二凯 吕娇 于莹 陈立志 | 2018 | 中国兽医科学2018，48，8： | 24 |
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